基于SRAP的西瓜种质资源遗传多样性评价

运用SRAP分子标记技术分析了80份西瓜种质资源的遗传多样性，28对不同的引物组合共扩增出308条谱带，其中多态性谱带68条。引物组合的多态性频率最低为9.1%，最高为45.5%，平均22.1%。基于全部材料的SRAP基因型数据评价品种间的遗传关系，80份西瓜种质的遗传相似系数变化范围在0.94～1.00之间，表明供试西瓜种质资源的遗传背景比较狭窄。利用NTSYS软件聚类分析，80份西瓜材料被划分为3个类群，类群间相似度较高。来源地不同的西瓜材料也被划分到一个类群，进一步说明供试材料遗传背景狭窄。西瓜育种要取得突破性进展，必须加强种质资源的引进与创新。     

低温胁迫下西瓜同源二倍体和三倍体甲基化及基因表达的差异分析

为了揭示西瓜二倍体及三倍体在低温胁迫下的耐冷性分子机制,以西瓜二倍体自交系‘83166’（‘京欣1号’品种的母本）及其同源三倍体为材料,利用MSAP及cDNA-AFLP技术研究低温处理前后基因表达的差异,并对差异带进行克隆、测序和比对。28对MSAP引物扩增得到2 356个位点,其中二倍体经低温处理后总甲基化率下降8.5%,三倍体下降10.4%。将13条差异带与西瓜基因组数据库比对,有7条带确定是西瓜基因组序列。26对cDNA-AFLP引物组合扩增出1 267条带,其中二倍体上调表达占48.2%,下调表达占51.8%;三倍体上调表达占51.3%,下调表达占48.7%。21条差异带在NCBI中找到了同源序列基因,包括假定蛋白（38.1%）、能量与代谢（38.1%）、信号转导（9.5%）、物质运输（9.5%）以及DNA修饰（4.8%）,另有9条无同源序列。低温胁迫后,三倍体去甲基化率与上调表达量均大于二倍体,而且三倍体诱导出更多的差异基因参与了能量代谢调控、信号转导、物质运输等过程,说明在抵御低温胁迫中三倍体比二倍体有更强的耐冷性。     

太空诱变西瓜后代突变体检测及相关片段克隆

为进一步研究太空环境对西瓜后代的影响,应用53对AFLP引物对200粒M2代单株进行分析,根据Gene Walking Kit的要求设计引物,利用TAIL-PCR技术对差异片段进行延伸,在GenBank上用BLASTn和BLASTx软件对其进行序列同源性比对.结果表明:引物E50/M60在135号和74号检测到差异片段,长度分别为253 bp、81 bp和98 bp,对此进行序列比对,未检测到同源性大于40％的序列.对253 bp进行延伸得到长度为1 379 bp的片段,此片段与黄瓜光照诱导下的EST序列有93％的同源性.