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[目的]通过抗原合成、免疫小鼠制备单克隆抗体,为研制利巴韦林检测试剂盒和胶体金免疫层析试纸条奠定基础.[方法]通过琥珀酸酐法制备利巴韦林的完全抗原R-HS-BSA,免疫BALB/c小鼠,使小鼠产生免疫反应.建立间接ELISA和间接竞争ELISA系统,检测小鼠血清,并应用杂交瘤技术建立利巴韦林Mab细胞株,用体内诱生腹水法制备利巴韦林单克隆抗体,并对其效价、敏感性免疫学特性进行鉴定.[结果]成功合成利巴韦林的免疫原R-HS-BSA和包被原R-HS-OVA,二者蛋白浓度为10.9 mg/mL和10.6 mg/mL,结合比为11∶1和9∶1;血清效价为1∶32 000;制备的单克隆抗体浓度为7.462 mg/L;得到单克隆抗体的ICs0为39.8ng/mL.[结论]初步建立利巴韦林的完全抗原及包被原的制备方法,得到利巴韦林单克隆抗体. 相似文献
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