饲用纤维素酶的研究进展

纤维素是自然界中最丰富的可再生自然资源。我国每年仅作物秸秆的纤维素产量就高达2亿t,其中绝大多数被烧掉,不仅浪费自然资源,还带来了严重的环境问题。有效地开发和利用纤维素作为饲料来源．对解决我国饲料资源紧张、人畜争粮这一突出矛盾具有重大现实意义．也是促进我国畜牧业可持续发展的有效途径之一。     

载锌壳聚糖微粒的体外抗菌性能试验

试验采用二倍稀释法检测并比较了载锌壳聚糖微粒(CNP-Zn)、壳聚糖微粒(CNP)、锌离子(Zn2 )和金霉素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抗菌效果.结果表明:载锌壳聚糖微粒(CNP-Zn)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抗菌效果显著优于壳聚糖微粒(CNP)、Zn2 ,接近于金霉素,故可开发为安全、高效的饲用抗菌剂.     

地衣芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆和表达

提取地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)基因组，通过PCR克隆了该菌的β-1，3-1，4．葡聚糖酶基因全长。该基因全长818bp,ORF为732bp,编码243个氨基酸，计算分子量为27.35kD，等电点为8．31。经Blast分析，该序列与短小芽孢杆菌(B．pumilus)同源性最高(99％)，而与基因库中地衣芽孢杆菌的同源性为94％，该基因已被GenBank接受(AY225317)。用BamHI和XhoⅠ双酶切目的片断和表达载体pET-30a( )后相连接，构建重组表达载体pET-lic，并导人大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中表达。酶学特性表明：SDS-PAGE电泳在27kD左右有表达蛋白带，该工程菌总酶活达67．34U／mL，是出发菌的60倍，最适温度在50℃左右，最适pH在5～6之间。该工程菌可作为材料构建耐热性好和酶活高的杂合基因工程菌。     

短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究

提取短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)基因组,通过PCR克隆了短小芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因全长序列.结果表明:该基因全长754 bp,ORF为717 bp,编码239个氨基酸,计算分子量为26.98 kD,等电点为6.08.经Blast分析,该序列与地衣芽孢杆菌同源性最高(91%),该基因首次在GenBank上登录(登录号AY164456).在克隆载体上亚克隆基因全长,构建重组表达载体pET-pum,导入大肠杆菌BL 21中表达.SDS-PAGE电泳表明:在27 kD左右有表达带,酶活较低(7.24 U/mL),仅为出发菌酶活的16%,其最适温度为50 ℃左右,最适pH在5左右.