根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病1号生理小种遗传转化体系的优化

针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp cubense race 1,Foc1),以潮霉素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40 h、在LB液体摇床培养中培养时间28~30 h(200 r/min)、乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L、共培养温度为25℃、IM固体培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到150~200个转化子/106个Foc1孢子。在选择性培养基筛选转化子时,我们首次采用了直接覆盖选择性培养基方法,比传统的转膜反贴方法更方便简单。在荧光显微镜下观察到转化子的绿色荧光。潮霉素抗性测试发现转化子的抗性表现稳定。     

外来水产动物引进的风险评估体系的构建与应用

外来水生生物入侵被认为是导致我国水生生态系统生物多样性破坏的主要因素之一,同时阻碍了我国水产养殖业的健康发展。在众多造成水生生物入侵的因素中,外来水产动物的引进是重要因素之一,其中不仅包括外来物种自身造成的生物入侵,也包括外来物种携带的病原生物对本土物种、生态环境、人类健康等造成的巨大威胁。为了对待引入外来水产动物的风险进行科学评估,根据分析常见外来水生动物可能存在的入侵机制与生态风险,利用层次分析法和成对比较矩阵方法对指标权重进行计算,构建了外来水产动物引进的风险定量评估体系。该评估体系包括6个一级指标(即外来种自身性质、外来种生态风险、病原生物入境、病原生物暴露、危害与影响、外来种风险防控)和32个二级指标。利用该评估体系对我国境内现有的三种外来水产动物进行定量的风险评估,评估结果显示：鳄雀鳝(Atractosteus spatula)的风险值R为3.5975,为高风险等级;虾夷扇贝(Mizuhopecten yessoensis)风险值R为2.7823,为中风险等级;锦绣龙虾(Panulirus ornatus)风险值R为1.9568,为低风险等级。该评估结果与我国农业农村部、生态环境部、海关总署等相关单位提供的资料高度吻合,说明该模型在外来水产动物引进与养殖风险评估的相关工作中有重要的应用价值。     

香蕉枯萎病菌fow2基因的克隆及其序列分析

为了解fow2基因在尖镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp.Cubense,Foc）侵染香蕉过程中的作用,同时比较Foc的1号和4号生理小种中fow2基因的差异,采用PCR和RT-PCR方法,分别扩增了这2个生理小种的fow2基因,并对测序结果进行生物信息学分析。测序结果显示,以Foc1、Foc4的gDNA为模板,这两个生理小种的PCR扩增产物大小分别为2439、2440 bp;而以cDNA为模板,PCR扩增产物大小分别为1992、1986 bp。分析结果表明,两个基因都含有6个外显子和5个内含子;没有信号肽,也没有跨膜结构;但根据PROSITE蛋白位点分析,2个生理小种的fow2基因存在一些差异。