基于质粒表达的siRNA对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的抑制作用

猪圆环病毒2型(PCV2)是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的必要病原,对养猪生产构成了严重威胁,但当前缺乏有效的防治手段.为了探索治疗PCVAD的新途径,分别针对PCV2的病毒复制相关蛋白基因(rep)与衣壳蛋白基因(cap),构建了PCV2特异的siRNA表达质粒(pGensil-R259、pGensil-C297和pGensilC490)和PCV2非特异的阴性对照质粒(pGensiI-SCR).在脂质体介导下,将构建的siRNA表达质粒与阴性对照质粒转染PK-15细胞,转染质粒20 h后感染PCV2.结果质粒表达的特异siRNA抑制了PCV2 DNA的合成及Rep和Cap蛋白的表达,使病毒滴度(TCID50)显著下降;针对靶基因不同位点的siRNA的抑制效果不同,病毒感染后36 h内,siRNA对PCV2的抑制作用最强,随后有所下降,但直至感染后60 h仍然能够显著抑制PCV2复制.实验结果提示质粒表达的特异siRNA能够显著地抑制PCV2的增殖,但这种抑制功能与作用时间呈负相关.     

抓好函授教学环节是提高教学质量的基本保证

函授教学过程是函授学员在教师有目的、有计划地指导下,积极主动学习和掌握系统的文化科学基础知识与基本技能的过程,函授教学过程的主要教学环节有:自学、面授、辅导、答疑、作业、实验实习、成绩考核、毕业实习、毕业设计(论文)及答辩等。在教学管理中,以质量为核心,抓好教学过程的各个环节是确保函授教学质量不断提高的基本保证。　　一、自学和作业自学是函授教育的重要一环,占函授教学总学时的60%,作业是促进学生理解、巩固掌握所学知识,检验自学效果,培养自学能力的必要手段。如何抓好自学环节,充分发挥学员学习的主动性,体现函授教学…     

苦荞中查尔酮合成酶基因（CHS）的克隆

获得完整的苦荞查尔酮合成酶基因（CHS）信息并评价其进化地位,对分子辅助选育高黄酮含量的苦荞品种具有重要的指导意义。用RACE法克隆苦荞CHS基因,用生物信息学手段分析预测苦荞CHS基本理化性质和同源性,用临接法构建了该酶的系统发生树。获得1250 bp的CHS cDNA全长,含241 bp的3’UTR和185 bp的5’UTR;等电点（pI）和分子量（Mr）分别为5.33和35340.75 Da;克隆获得975 bp的开放性阅读框（ORF）。预测该基因编码含325个氨基酸残基的蛋白,氨基酸同源比对结果表明,苦荞CHS与蓼科的虎杖相似性很高;临接法构建的系统发生树结果表明,苦荞CHS与其他双子叶植物有共同的起源,与蓼科的金荞麦、甜荞、虎杖及石竹科的满天星亲缘关系较近。成功获得苦荞CHS基因的cDNA全长,克隆出完整的ORF,并确定了苦荞中该酶的进化地位和方向。     

基于矿质元素的苦荞产地判别研究

 【目的】分析不同省份苦荞矿质元素的特点,筛选判别苦荞产地的有效指标,同时探索苦荞产地溯源和判别的方法。【方法】对苦荞主产区山西、甘肃、青海、四川和云南省的39个苦荞品种中的7种矿质元素Cu、Zn、Fe、Mn、Ca、P和Se的含量进行统计分析,在对7种矿质元素进行逐步筛选的基础上,应用非参数判别的K最近邻法进行判别分析。【结果】不同省份苦荞品种的矿质元素含量存在不同程度的差异,云南苦荞Cu、P含量最高;山西苦荞Se含量最高;青海苦荞Zn、Fe、Ca含量最高;四川苦荞Cu、Zn、Fe、Ca、P含量均最低,Mn和Se含量也较低;甘肃苦荞Mn含量最低。Se、Mn、Zn、Ca和P对苦荞分类有极显著影响,Fe和Cu对苦荞判别影响不显著;判别结果回判正确率和交互验证正确率均为97.4%。【结论】矿质元素含量和现代统计技术相结合的判别方法,用于苦荞产地溯源和判别是有效、可行的。     

苦荞种质资源AFLP标记遗传多样性分析

 【目的】从分子水平研究苦荞种质资源的遗传多样性,为综合评价苦荞种质资源提供依据。【方法】用筛选出的20对AFLP引物,对14个不同地理来源的165份苦荞种质进行遗传多样性分析。【结果】共扩增出938条清晰的条带,其中314（33.48%）条呈多态性,平均每对引物组合的条带数和多态性带数分别为46.9个和15.7个。不同地理来源苦荞种质的Shannon-Weaver多样性指数为0.1093～0.2661,四川资源群最高,青海、云南和甘肃/宁夏等资源群次之,湖南资源群最低。利用Popgen Ver.1.32软件,依不同地理来源苦荞资源群间Nei′s遗传一致度可聚类成5个组,聚类结果与苦荞地理分布相关。基于Structure 2.2软件分析,165份苦荞资源分为5大组群,并与Popgen Ver.1.32聚类结果呼应得较好,其中云南和四川资源的群体结构最复杂,最为多样化,分别被聚到了5个组群中。【结论】苦荞类群的亲缘关系以及遗传多样性与其地理分布有一定相关性。     

苦荞SSR分子遗传图谱的构建及分析

构建苦荞遗传连锁图谱,为今后有关苦荞基因组结构、重要农艺性状QTL定位、分子标记辅助育种和基因克隆等研究工作奠定基础。以栽培苦荞‘滇宁一号’和苦荞野生近缘种杂交产生的119份F4代分离材料为作图群体,利用SSR分子标记来构建苦荞的分子遗传连锁图谱。本研究构建的连锁图谱包含15个连锁群,由89个标记组成,其中偏分离的标记有22个,占24.7%,每条连锁群上的标记在2~16之间。连锁群长度在6.9~165.8 cM的范围,覆盖基因组860.2 cM,总平均长度9.7 cM。本研究构建了首张苦荞SSR遗传连锁图谱,为苦荞QTL定位、基因克隆、遗传选育等研究奠定了基础。     

健康猪携带的多杀性巴氏杆菌的血清学定型

国内外对多杀性巴氏杆菌的血清分型已有大量报导。1981年我们在黑龙江省富裕县,从94头屠宰猪的扁桃体分离到44株多杀性巴氏杆菌,做了一系列的生化试验及血清学定型,现报告如下。     

浅谈如何提高中专学校实验课程的效果

中专教育旨在为国家培养中等专业技术人才,主要向学生传授专业知识,培养专业技能,而专业技能只能在实践中获得,因此,强化实践教学,培养学生动手能力,提高实验教学质量,是对中专教育的普遍要求.目前,中专教育面临不能回避的问题:学生理论基础差,学习热情下降,专业教育停滞不前,如何改革传统的普教教育教学模式,提高实验课程的效果,增强学生的动手能力,培养学生的独立思考与动手能力,为国家输送合格的人才是全体教师所致力达到的目标,也需要我们的共同努力.作为教师其中的一员,略尽绵力,在此谈谈本人的一点浅见:     

獭兔附红细胞体病的发生与防治

獭兔附红细胞体病是由兔附红细胞体寄生于獭兔红细胞表面及血浆中引起的一种血液病。继Schilling和Dinger(1928)等首次在啮齿动物中发现附红细胞体后，世界众多国家都已相继在众多动物体内发现并报道附红细胞体的感染或发病。     

日光温室春果菜两主茬高效配套栽培技术

我市地处北纬43°52′,严冬季节气温较低(12月份～来年的2月份),外界最低气温在零下20℃～30℃之间,光照时间短,有效光照时间仅在5h(小时)左右,进行果菜抢早生产难度较大,果菜生长发育所需的两个主要条件都不适宜。经过试验我们采用了春一茬果菜(番茄、角瓜、黄瓜)进行安全抢早生产,在5月1日前拉秧,在拉秧前(4月中旬)套栽春二茬果菜(旱黄瓜、哈密瓜、豆角),而且不影响秋茬果菜正常生长,取得较好的经济效益和社会效益。第一茬果菜于2月初开始上市,平均产番茄10.3kg/m~2,平均产角瓜7.6kg/m~2,产黄瓜7.4kg/m~2,春二茬果菜于5月初上市,平均产旱黄瓜5.2km/m~2,平均产哈密瓜4.5kg/m~2,平均产豆角3.1kg/m~2,使地产果菜上市时间提早20～25d(天)。改善了市场供应,提高了经济效益。该技术可在保温条件好的日光温室内推广应用,具体技术措施如下: