长春地区梅花鹿毕氏肠微孢子虫分子流行病学调查

为了掌握长春地区梅花鹿毕氏肠微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)的感染率及基因型种类的分布情况,探究其在人与动物之间传播的源由,本研究于2018年12月-2019年12月期间采集长春地区8个养殖场共计538份梅花鹿粪便样品进行毕氏肠微孢子虫的流行病学调查及基因型分析,经PCR鉴定,测序分析、序列拼接比对以及系统进化分析。试验结果表明,长春地区梅花鹿毕氏肠微孢子虫的感染率为17.84%(96/538),不同养殖场的感染率为0~47.96%;研究共发现14种基因型(BEB6、EbpC、Ⅰ、JLD-Ⅲ、JLD-Ⅸ、JLD-ⅩⅤ、JLD-ⅩⅥ、JLD-ⅩⅦ、JLD-ⅩⅧ、JLD-ⅩⅨ、JLD-ⅩⅩ、JLD-ⅩⅪ、JLD-ⅩⅫ和JLD-ⅩⅩⅢ),其中BEB6为优势基因型。应用多位点序列分型(MLST)方法,选择MS1、MS3、MS4以及MS7位点对毕氏肠微孢子虫阳性样本进行多态性和群体遗传结构分析,结果显示,在96份阳性样品中,共有16份阳性分离株在至少2个位点同时扩增成功,形成10个多位点基因型(multilocus genotypes,MLGs),相同的基因型之间存在不同亚型,表明长春地区梅花鹿毕氏肠微孢子虫具有丰富的遗传多样性。本研究应用分子生物学方法对长春地区梅花鹿毕氏肠微孢子虫的流行病情况及基因型进行分析,研究结果不仅为梅花鹿毕氏肠微孢子虫防控提供科学依据,也为防控毕氏微孢子虫在人和动物间的传播提供基础数据,对保障公共卫生与健康意义重大。     

应用两种稀释液冷冻驴精液试验报告

本试验选用两种冷冻稀释液,通过离心去除精清的方法对驴精液进行了冷冻。结果发现在试验条件相同的情况下,用配方2冷冻稀释液冷冻精液的效果好于配方1,其平衡后活率(0.700±0.038)极显著高于配方1的平衡后活率(0.605±0.040)(P<0.01);经过冷冻后,其冻后活率(0.460±0.066)也极显著高于配方1的冻后活率(0.325±0.064)(P<0.01);且其精子顶体完整率(0.800±0.031)也极显著高于配方1(0.736±0.024)(P<0.01)。这表明配方2是1个冷冻驴精液的较好配方。     

奶牛超排处理开始时卵巢上卵泡的存在对超排效果影响的研究

本试验初步研究了超排处理开始时卵巢上卵泡的存在对超排效果的影响。据直肠检查结果将超排供体奶牛分为两组：Ａ组卵巢上只有黄体存在，Ｂ组卵巢上不仅有黄体存在而且有卵泡存在。经超排处理后，Ａ组供体中２头无发情表现；Ｂ组有６头无发情表现；Ｂ组供体的不发情率２７．３％（６／２２）显著高于Ａ组６．３％（２／３２）（Ｐ〈０．０５）。两组供体在平均获卵数和平均获得用胚数二指标上差异不显著（Ｐ〉０．０５）。     

GnRH类似物(LHRH-A3)注射方案对奶牛超排效果的影响

本实验对奶牛超排时LHRH-A3注射方案分别进行了研究。结果发现在其它实验条件相同的情况下,两次输精同时都注射LHRH-A3的供体(第1次注射50μg,第2次注射25μg)的平均无精卵数(0±0)显著低于只在第1次输精同时注射LHRH-A3的(剂量为50μg)(0.222±0.183)(P<0.05),其平均黄体数、平均获胚数、平均获可用胚数都稍高,但差异不显著。这说明采用两次输精同时都注射LHRH-A3的方案可以提高奶牛的超排效果。     

牛体细胞核移植技术

对牛体细胞核移植技术中核供体细胞周期同期化处理，电融合条件及去核方法等进行了研究。结果表明，血清－饥饿组（细胞周期同期化处理组）的移核重构胚细胞融合率（83．3％），卵裂率（70％）和囊胚发育率（33．8％）与血清－选择组对应指标间无显著性差异（82．3％，69．2％，32．4％，P＞0．05）；但上述2组分别极显著高于血清－随机组（64．8％，33．8％，4．35％，P＜0．01），试验确立了场强1.025kV/cm，脉冲宽度50μs，连续2次脉冲为最佳电融合条件。摸索出的点击去核法，对卵母细胞进行去核，去核成功率达90％，极显著高地吸引法的68．3％（P＜0．01）；其囊胚发育率为34．1％，显著高于吸引法的18．0％（P＜0．05），与挤压法（20．9％）相比差异不显著（P＞0．05），移植重构胚胎移植后，产2头成活的体细胞克隆牛。     

牛胚胎玻璃化冷冻保存研究进展

1 玻璃化冷冻的基本原理 所谓的玻璃化冷冻就是在完全的玻璃化状态下冷冻保存细胞、组织或器官.为了在一定冷冻速度下形成玻璃化,需要使用高浓度的可渗透性低温保护剂. 玻璃化冷冻法是根据物理学原理,将高浓度的低温保护剂(约7 mol/L)在超低温环境下凝固,形成无规则的玻璃化固体,这种固态物质能保持液态时的正常分子与离子分布,因而在细胞内发生玻璃化起到保护作用.这种方法不仅大大简化了冷冻过程,而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤.此外,这种方法采用迅速通过临界温度区,从而减轻了一些动物胚胎冷冻中常见的冻伤现象.     

奶牛超排前卵巢状态对超排效果的影响

本试验初步研究了超排前卵巢状态对超排效果的影响。据直肠检查结果将供体奶牛分为两组 :1组供体卵巢上只有黄体存在 ;2组供体卵巢上不仅有黄体存在还有卵泡存在。经超排处理后 ,1组中 2头供体无发情表现 ;2组中 6头供体无发情表现。 2组供体的不发情率 2 7 3 %显著高于 1组的 6 3 %(P <0 0 5)。两组供体在平均获胚数和平均获可用胚数无显著差异 (P >0 0 5)。     

牛胚胎玻璃化超快速冷冻一步法移植试验

应用 30 %乙二醇 0 .3mol/ L 蔗糖 - m- PBS液 (VS1)、30 %乙二醇 0 .3m ol/ L 蔗糖 5 %葡聚糖 (T- 5 0 0 ) - m-PBS液 (VS2 )、30 %乙二醇 0 .3mol/ L蔗糖 10 %葡聚糖 (T- 5 0 0 ) - m- PBS液 (VS3)玻璃化超快速冷冻奶牛胚胎 ,一步法移植。结果显示 ,VS1、VS2、VS3组玻璃化超快速冷冻奶牛胚胎解冻后的形态正常率分别为 10 0 % (2 0 / 2 0 )、95 %(19/ 2 0 )和 5 5 .6 % (5 / 9) ;培养存活率分别为 70 % (14 / 2 0 )、75 % (15 / 2 0 )和 2 2 .2 % (2 / 9) ;囊胚孵化率分别为 0、2 0 % (4/2 0 )和 0。VS1、VS2组玻璃化冷冻奶牛胚胎解冻后的形态正常率极显著地高于 VS3组 (P<0 .0 1) ;VS1、VS2组玻璃化冷冻奶牛胚胎解冻后的培养存活率分别显著 (P<0 .0 5 )和极显著 (P<0 .0 1)地高于 VS3组。 VS1组冷冻的胚胎经一步法移植了 5头 (1枚 /头 ) ,未获得妊娠 (0 / 5 ) ;VS2组冷冻的胚胎用一步法移植了 10头 (1枚 /头 ) ,结果获得 2头妊娠(2 / 10 ) ,并产下 2头正常犊牛。     

苦碟子光合作用日变化及其与环境因子关系的研究

本文对苦碟子叶片净光合速率日变化及其与环境因子的相互关系进行了研究,为苦碟子栽培提供参考。结果表明：苦碟子净光合速率日变化呈明显的双峰曲线,峰值出现在上午10时和下午14时,分别为16．82,14．33μmol／m2／s,有轻微的光合“午休”现象。经相关性分析,净光合速率与光合有效辐射、蒸腾速率、气孔导度之间呈正相关,与胞间CO2浓度呈负相关,与空气相对湿度的相关性不显著。