中草药对奶牛隐性乳房炎的体外抑菌试验

为了寻求对奶牛隐性乳房炎有良好疗效的中草药,选取具有抗菌消炎作用的13种中草药,运用水煎法提取其有效成分;从兰州周边6个奶牛场采集奶样,从中分离得到4种引起乳房炎的主要致病菌;利用提取的中草药有效成分对这4种致病菌做体外抑菌试验,运用试管稀释法测定中药单味药和复方的最小抑菌浓度.结果表明:黄连、大黄、蒲公英、鱼腥草4味中药对引起奶牛隐性乳房炎的4种病原菌的抑菌效果良好;板兰根、金银花、连翘、黄柏、大青叶、紫花地丁具一定抑菌效果,而王不留行、黄芪、天花粉抑菌效果较差.同时还发现,复方中同时含有黄连、大黄、蒲公英、鱼腥草4种药物的复方抑菌效果较好.     

奶山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析

试验分别采用组织块贴壁法和消化分离法对奶山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功建立了奶山羊胎儿成纤维细胞系,并对该细胞系进行了形态学观察、生长动力学分析、细胞活力测定、核型分析和微生物检测等多种生物学特性分析.结果表明:成纤维细胞原代培养采用贴块培养时所需时间较长,消化培养有较多死细胞;传代细胞生长情况良好,群体倍增时间(PDT)约为40.4h;生长总体趋势呈"S"型;冻存后活力为92.3%,生长状况与冻存前一致;细胞染色体中二倍体(2 n=60)占主体;细菌、真菌和支原体检测结果均为阴性,细胞系的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准.     

不同培养条件对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

通过使用不同的卵母细胞采集方法、不同的培养液、培养时间和细胞因子对绵羊卵母细胞的体外成熟培养的影响进行了研究.结果表明:切卵法和抽吸法对卵母细胞成熟的影响前者优于后者,差异极显著(P<0.01);培养液中添加FSH、LH及FBS对绵羊卵母细胞的影响显著高于添加发情羊血清的且差异极显著(P<0.01);绵羊的卵母细胞培养20h的成熟率极显著低于培养22h和24h的成熟率(P<0.01),培养22h和24h的成熟率差异不显著(P>0.05),培养24h和培养26h的成熟率差异极显著(P<0.01),培养26h卵母细胞老化对随后的体外受精不利;成熟液(培养液+FBS、LH、FSH、E2)中分别加入骨形态发生蛋白15(bone morphogenetie protein,BMP15)和成纤维细胞生长因子8b(fibroblast growth factor 8b,FGF8b)2种细胞因子,成熟液中添加BMP15组与添加FGF8b组卵母细胞的成熟率差异极显著(P<0.01),成熟液中添加BMP15和对照组卵母细胞成熟率的差异极显著(P<0.01),加入FGF8b组与对照组卵母细胞成熟率差异不显著(P>0.05).利用切卵法在培养液中加入FSH、LHE2和细胞因子BMP15,培养22~24h可以大大提高绵羊卵母细胞体外培养的成熟率.     

重离子束辐照对绵羊卵母细胞及体外受精卵早期发育的影响

试验探索重离子束辐照对绵羊卵母细胞的体外成熟及体外受精卵早期胚胎发育的影响。用不同剂量的重离子束辐照绵羊卵母细胞和精液,观察卵母细胞体外成熟率及体外受精后早起胚胎的卵裂率、桑椹胚率及囊胚率。试验结果显示:与对照组相比,1.0、1.5Gy辐射可以明显提高绵羊卵母细胞的体外成熟率(p0.01);重离子辐照绵羊精液和卵母细胞并做体外受精后,早期胚胎发育有着显著变化。当用0.5、1.0Gy剂量辐照精液时,绵羊早期胚胎的卵裂率和桑葚胚率显著升高(p0.05),囊胚率无显著变化,1.5 Gy剂量,卵裂率显著提高(p0.05),2.0 Gy剂量,卵裂率、桑葚胚率、囊胚发育率均极显著降低(p0.01);当重离子束辐照卵母细胞时,0.5、1.0Gy剂量组的卵裂率、桑葚胚率和囊胚发育率显著升高(p0.05),而2.0Gy剂量组的卵裂率和桑葚胚发育率极显著降低(p0.01),而囊胚发育率为0。结果表明低剂量的重离子辐照绵羊精液、卵母细胞,对体外受精和早期胚胎发育具有明显的促进作用,而高剂量辐照则抑制细胞的生长发育。