非洲菊胚性愈伤组织悬浮培养方法建立及其诱变条件研究

以紫罗兰绿心、洋红黑心、绿心黄瓣、鹅黄黑心的花托和花梗，白色黑心的叶片为外植体，在pH值为5．8、蔗糖30g／L和琼脂8g／L的条件下诱导愈伤组织，筛选出的最佳愈伤组织诱导培养基配方是MS＋6B—A1．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋2，4-D1．0mg／L诱导出的愈伤转到MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L。适合非洲菊固体和液体培养基上愈伤增长的配方是MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L。20Cy的Co^60辐射剂量和0．1％（V／V）的EMS浓度是较适合的诱变剂量．可以作为半致死剂量进行下一步大批量愈伤组织的诱变处理，从中筛选耐寒或花色特异等突变体。     

组培获得大花蕙兰叶色突变体的RAPD分析

从大花蕙兰的组培苗中获得了白色条纹和黄色条纹两种叶色突变体,突变发生的总频率约为0.12%。利用100条UBC随机引物将它们与对照进行RAPD分析和对比。引物P17或P31可在对照和黄色条纹突变体间检测出多态性,黄色条纹突变体具有大小分别约为995bp或1320bp的多态性片段;而引物P84或P86则可在对照和白色条纹突变体间揭示出多态性,白色条纹突变体具有大小分别约为1120bp或1315bp的特异性条带。RAPD分析结果表明这两种突变体的基因组DNA都发生了变化,但发生突变的位点不同。