赤羽病病毒核衣壳蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

以纯化的重组赤羽病病毒核衣壳蛋白作为诊断抗原，建立了检测牛血清特异性核衣壳蛋白抗体的间接ELISA方法，初步组装成便于现地使用的试剂盒。经对试验条件进行优化，确定最佳抗原包被量为每孔1μg（100μL），样品稀释度为1：100，兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1：8000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。应用初步研制的间接ELISA试剂盒和微量中和试验法分别对云南省的89份、内蒙古的100份牛血清样本进行了检测，以中和试验为参照，经统计学处理，得出检测临界值分别为0．411和0．303，2种方法的符合率分别为72．7％（56／77）和91．4％（85／93）。试剂盒在37℃保存3d，对敏感性无明显影响。     

光周期对人工半合成饲料饲养斜纹夜蛾的影响

在室温26（±1）℃尧相对湿度80%~85%条件下,分别采用8种不同光周期（光暗比为0：24、6：18、8：16、10：14、12：12、14：10、18：6、24：0）对利用人工半合成饲料饲养的斜纹夜蛾各虫态进行处理遥结果表明袁光周期对斜纹夜蛾的化蛹率尧羽化率尧总存活率及产卵量均有较显著的影响袁而对其发育历期无显著影响袁当光暗比为12颐12时各虫态生长发育状况最好。     

10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂的配方研制与应用

研制了一种环境友好型农药制剂10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂.通过选择润湿分散剂、黏度调节剂、防腐剂、抗冻剂和消泡剂等助剂,确定了最优配方为:SeNPV 10亿PIB/mL、农乳500# 3％、NNO 2％、白炭黑1.5％、黄原胶0.2％、硅酸铝镁1％、苯甲酸钠0.3％、乙二醇3％、有机硅消泡剂0.2％、...     

5%毒死蜱颗粒剂防治草坪蛴螬药效试验

5%毒死蜱颗粒剂对草坪主要地下害虫蛴螬的防治试验结果表明.其对蛴螬具有良好的防治效果,田间667m2撤施2.0 kg后3-10 d,试虫死亡率可达80%-95%,显著优于对照药剂3%克百威颗粒剂2.5 kg的处理效果,说明5%毒死蜱颗粒剂在草坪生产上具有良好的应用前景.     

马白细胞介素-18单克隆抗体的制备及其特性的初步鉴定

摘要：利用纯化的用原核系统表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白(pET-mEIL-18)抗原免疫BALB/c 小鼠，取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，同时以昆虫杆状病毒表达系统获得的马白细胞介素-18成熟蛋白(mEIL-18)作为抗原进行间接ELISA检测，筛选并最终得到了9株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株。利用IFA试验对9株单克隆抗体进行鉴定，结果证实所获得的9株细胞分泌的抗体都是针对mEIL-18的特异性抗体。将此9株单克隆抗体分别与用原核系统分段表达的重组马白细胞介素-18成熟蛋白pET-mEIL-18-(1)(mEIL-18 1～78位氨基酸残基)和pET-mEIL-18-(2)(mEIL-18 79～157位氨基酸残基)蛋白进行特异性ELISA检测，结果表明，9株单克隆抗体有5株识别表达的pET-mEIL-18-(1)(mEIL-18 1～78位氨基酸残基)，而另外4株单克隆抗体与pET-mEIL-18-(2)(mEIL-18 79～157位氨基酸残基)发生反应，说明所获得的9株单克隆抗体至少针对pET-mEIL-18 2个或2个以上不同的抗原表位。单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示，除M1F11、M3A11和N7D9为IgM，其余的单克隆抗体均为IgG1，而且所有单克隆抗体的轻链均为?资链。     

3种杀虫剂对荔枝蒂蛀虫的药剂敏感性和解毒酶活性影响

采用生物和生化测定方法,研究了广州市黄埔区2个荔枝蒂蛀虫田间种群对氯氰菊酯、溴氰菊酯、毒死蜱的敏感性及相关解毒酶活力。生物测定结果表明,茅岗种群(MG)对溴氰菊酯和氯氰菊酯的LC_(50)均比大椿岗种群(CG)显著增加,其敏感性倍数为1、20,二者对毒死蜱的LC_(50)未见显著差异。生化测定结果表明,茅岗种群的多功能氧化酶、细胞色素P450、羧酸酯酶、碱性磷酸酯酶的活力比大椿岗种群显著提高;谷胱甘肽-S转移酶和酸性磷酸酯酶活力未见显著差异。     

中量元素水溶肥在柑橘上的应用效果研究

为了解中量元素水溶肥在农业上的增产效果,进行了中量元素水溶肥在柑橘上的应用效果试验。结果表明,喷施中量元素水溶肥可促进柑橘果实膨大,增加柑橘果径和单果重,较清水对照增产11.0%,增产达极显著水平,产投比为3.0,经济效益显著。     

赤羽病病毒囊膜糖蛋白G1基因的截短表达、纯化及间接ELISA诊断方法的建立

为获得赤羽病病毒（Akabane Virus, AKAV）囊膜糖蛋白重组抗原作诊断应用研究,通过软件分析AKAV OBE-1株的囊膜糖蛋白G1的氨基酸序列,筛选出抗原性较好的基因片段G1-2作为目的片段,经RT-PCR扩增后,插入pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段定向亚克隆于pET-28a (+)表达载体中,转化至BL21 (DE3)感受态细胞中进行诱导表达。经SDS-PAGE和Western-blot分析,诱导表达产物以包涵体的形式存在,大小约为40ku,且具有免疫学活性。亲和纯化后的融合蛋白浓度为2mg/ml,纯度为92.6%。以该融合蛋白作为诊断抗原,建立了间接ELISA诊断方法。确定的抗原包被浓度为20g/ml,血清最佳稀释度为1:200。交叉试验表明该方法对牛常见的6种疾病阳性血清无交叉反应。应用该方法对病毒微量中和试验检测过的云南（77份）和内蒙（70份）牛血清样品进行了检测。以中和试验为参照,通过统计学处理,得出两地临界值分别为0.493和0.488,本方法的特异性为73%和86.9%,二者的符和率分别为80%和85.9%。     

荧光增白剂OB对甜菜夜蛾核型多角体病毒增效作用的研究

以甜菜夜蛾为试虫,研究荧光增白剂OB对甜菜夜蛾核型多角体病毒的增效作用.结果表明,在0.25％ ～1％的浓度范围内,随着荧光增白剂OB浓度的增加,其对甜菜夜蛾核型多角体病毒的增效作用不断升高,最高增效倍数达110.2倍.而在2～4龄幼虫范围内,荧光增白剂OB对甜菜夜蛾核型多角体病毒的增效作用随着甜菜夜蛾虫龄的增大而降低.     

10亿PIB/mL 甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治甘蓝甜菜夜蛾的效果及对天敌昆虫的影响

10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治甘蓝甜菜夜蛾的田间药效试验结果表明,该药剂对甘蓝甜菜夜蛾具有良好的防治效果.田间每667 m2用量75～100 g时,药后5d对甜菜夜蛾幼虫的防效可达80％以上,药后10 d防效仍高达70％以上,具有极好的持效性.而该药剂对菜田蜘蛛等天敌影响的统计表明,其对蜘蛛种群影响较小,当试验药剂和对照药刺用量为75 g时,药后5d和10d,百株甘蓝上蜘蛛的减退率分别为1.2％和0.5％,显著低于对照药剂3％高效氯氰菊酯·１07PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂处理区的减退率.说明该药剂具有良好的应用前景.