烟草曲叶病病原的鉴定及其细胞病理

应用电镜技术，结合粉虱传双生病毒的多抗血清和单克隆抗体采用免疫电镜（ISEM）和三抗体夹心酶联免疫吸附测定（TAS－ELISA），对云南烤烟、香料烟和白肋烟3种类型烟草上的曲叶病病原进行了检测鉴定，其病原为粉虱传双生病毒（WTG）；根据单克隆抗体分析表位抗原，可分为3组，其中香料烟曲叶病分离物中三者皆有，烤烟和白肋烟曲叶病分离物与香料烟曲叶病的一个分离物同属一组表位抗原类型；对3种烟草曲叶病的病原细胞进行了观察，在核内观察到典型的纤维环，细胞核和细胞质内都含大量的双生病毒颗粒，在细胞质中有病毒颗粒的聚集块，在胞间连丝中观察到病毒颗粒。     

番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒在云南的发生分布研究初报

应用电子显微镜观察形态学及细胞病理特征,间接酶联免疫吸附测定(I-ELISA)和双抗体夹心EUSA(DAS-ELISA),部分样品经番茄斑萎病毒(TSWW)核壳体蛋白基因(N-gene)的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,以及部分样品的生物学回接测定的方法,对采自云南不同地区20种寄主植物上204份疑似Tospovirus侵染的病株样品进行了检测.结果表明,共有20种寄主作物139份样品中含有Tospovirus分离物,从检出样品的分布看,云南全省均有分布,但在海拔2400m以上的地区其症状表现不明显.Tospovirus云南分离物在血清型、细胞病理特征以及寄主范围方面与国内外报道的同属病毒有共同的特征,同时也有较明显的差异,即云南存在有Tospovirus新的株系或种类.     

抗水稻矮缩病毒转基因水稻的农艺性状分析

水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)是引起水稻矮缩病的病原,造成多种水稻品种的矮化和减产,在我国南方稻区曾暴发流行危害,引起重大的经济损失[1]。为防止水稻矮缩病的再度发生危害,我国北京大学从20世纪90年代中期起,加强了对RDV的分子遗传进化研究,并从RDV中克隆了全部基因     

TSWV与TMV复合侵染大花蕙兰的细胞病理

应用超薄切片法制样电子显微镜观察,对番茄斑萎病毒(TSWV)和烟草花叶病毒(TMV)复合侵染的大花蕙兰同一病叶的细胞病理进行了研究.结果表明无症的叶部其亚细胞结构较完整,在叶绿体旁及细胞质中有少量的TWV聚集块;在表现为花叶的部位亚细胞器不同程度病变,TMV粒体聚集或散布于细胞质中;在表现为黄化的叶部亚细胞大部分崩解,有的细胞中大量聚集或散布TMV粒体,有的细胞中则散布或聚集TSWW粒体,且在细胞质中出现病毒基质或空泡囊状结构,TSWV被膜粒体散布或聚集于细胞壁中,有的韧皮部细胞中充满纤维状内含体.     

粉虱传双生病毒在云南的发生分布

粉虱传双生病毒 (ｗｈｉｔｅｆｌｙｔｒａｍｓｍｉｔｔｅｄ ,Ｇｅｍｉ ｎｉｖｉｒｕｓＷＴＧ)属于双生病毒科 (Ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｉｄａｅ)菜豆金色花叶病毒属 (Ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓ) ,是单链环状ＤＮＡ病毒 ,基因组有 2个组份 ,即ＤＮＡ -Ａ和ＤＮＡ - β .该属病毒在热带和亚热带地区为害多种作物 ,引起烟草、番茄等曲叶病 ,辣椒和甜椒曲叶皱缩病 ,葫芦科植物花叶病等。由于ＷＴＧ株系变异快 ,易发生突变和重组 ,造成病毒病的突发流行 ,近年来 ,本项目对云南的ＷＴＧ发生和分布开展了研究。1　材料与方法1 1　病害调查与样品采集根据…     

导致云南马铃薯品种中甸红退化的PVX分离物提纯及鉴定

对引起云南马铃薯品种中甸红退化的病毒分离物进行了纯化，应用酶联免疫吸附测定（ELISA）和免疫电镜技术（ISEM）检测鉴定了分离纯化的病毒样品，鉴定为马铃薯X病毒（Potato virus X,PVX)的分离株。经ELISA和ISEM复合检测筛选，用组织培养法得到了侵染中甸红的PVX分离物标准毒株。应用电镜技术检测了PVX在寄主植株中的分布，结果呈系统侵染。     

云南马铃薯病毒种类及脱病毒种苗筛选技术体系

应用电子显微镜(负染色观察、免疫电镜、细胞病理)、血清学(DAS-ELISA、TAS—ELISA)的方法,对采自云南省马铃薯产区的2 000多份马铃薯病毒病样品及试管苗、微型薯样品进行了检测鉴定。检出的病毒种类有马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)、番茄斑萎病毒(TSWV)、类烟草脆裂病毒(TRV like)、类马铃薯帚顶病毒(PMTV like)7种,其中PVX、PVY、PLRV是主要毒源。研究了PVY对合作88、PVX对中甸红产量的影响,随着种薯带毒率增加,产量显著下降。应用电子显微镜、TAS—ELISA技术建立了脱病毒核心种苗的检测筛选技术体系。制备了PVY的TAS—ELISA快速检测试剂盒,应用于生产用种苗、种薯的检测。     

云南澳洲坚果苗木感染番茄斑萎病毒属病毒初报

 在云南省临沧市永德县海拔约800 m 的澳洲坚果（Macadamia sp.）种苗繁育基地发现叶片 褪绿、黄化、叶脉间呈现近似圆形或不规则褐色枯斑的植株。为了确认植株病因,采集典型病株,应用 电子显微镜负染色法、超薄切片和DAS-ELISA 进行检测,在澳洲坚果苗木病叶分离物Maca-LC 的粗汁 液和病叶超薄切片中均观察到有类似番茄斑萎病毒属（Tospovirus）病毒粒体。该病毒粒子为球形,直径 80 ~ 85 nm。进一步应用DAS-ELISA 方法鉴定,病叶与Tospovirus 的西瓜银色斑驳病毒（Watermelon silver mottle virus,WSMoV）/花生芽坏死病毒（Groundnut bud necrosis virus,GBNV）复合抗血清呈阳性反应。 通过病症典型症状、病毒形态学观察及血清学方法检测表明,侵染云南澳洲坚果种苗的病毒分离物 Maca-LC 为番茄斑萎病毒属Tospovirus 病毒。