动态添加FSH对绵羊卵巢皮质组织体外培养的影响

本研究旨在探索促卵泡素(FSH)对体外培养绵羊卵巢原始卵泡和组织活性的影响。通过稳定或动态方式添加不同浓度FSH(1、10、50、100ng·mL-1),用组织学和免疫组化PCNA方法来评估FSH对体外培养绵羊卵巢皮质组织中原始卵泡激活、生长、存活以及颗粒细胞增殖活性的影响;此外通过测定培养液中雌激素含量,评估卵巢组织体外培养过程中活性的保持。结果表明,先升后降动态添加FSH对于卵泡发育、存活和生长以及颗粒细胞的增殖具有全面的促进作用;同时组织分泌雌激素能力也高于其他组。以稳定方式添加时,50ng·mL-1FSH在培养1d时显示对卵泡发育的显著促进作用(P0.05),添加10ng·mL-1以上浓度的FSH可以促进卵泡存活和生长(P0.05)。在整个培养期内,各培养组中雌激素产量持续增加,说明卵巢活性在本培养体系中可以得到很好的维持。本试验结果表明FSH可能参与早期卵泡的发生,动态添加FSH更有利于体外培养卵泡的发育和组织活性的维持。     

不同保存条件对绵羊卵巢组织卵泡存活的影响

研究旨在通过组织学方法评估卵巢保存形式、温度、时间、保存液对绵羊卵巢组织短期保存以及培养后卵泡存活的影响。结果表明:碎块或整个卵巢组织39℃保存6 h或12 h后,正常卵泡比例与新鲜组织和其他组比较显著下降(P0.05)。经过6 d的组织培养后,在生理盐水中4、20℃保存6、12 h和39℃保存2 h以及在MEM中39℃保存2 h的组织碎块中正常卵泡比例显著低于整个卵巢保存后组织中正常卵泡比例(P0.05)。在MEM中4℃保存6 h或12 h,培养后卵泡存活率显著高于相同条件保存于生理盐水中的组织(P0.05)。此外保存12 h培养后正常卵泡比例显著低于保存2 h处理组(P0.05)。表明在生理盐水和MEM中整个卵巢4、20℃保存2~6 h,或者卵巢碎块20℃保存在MEM中2~6 h都可以用于卵巢体外培养的研究。     

牛粪可再生垫料（RMS）的安全制备

[目的]规模化奶牛场粪污污染问题日益突出,已成为制约奶牛养殖业可持续发展的重要因素。而将牛粪作为奶牛卧床垫料,是实现牛场粪污无害化和资源化利用的有效途径之一。[方法]对不同干物质含量（30%~35%,35%~40%,40%~50%）的固体牛粪进行堆垛发酵,通过对比不同干物质牛粪垛的温度、有害微生物的变化趋势及堆垛完成后理化性质,建立起最优的牛粪卧床垫料安全制备流程,并评估其对乳房炎发病率的影响。[结果]35%~40%干物质含量牛粪堆垛成高1.2 m,底宽1.5~2.0 m,顶宽1.2 m,长20~30 m的梯形发酵垛,发酵第4天后,发酵垛表层、中层温度达60 ℃以上;发酵温度60 ℃以上保持24 h,可以将乳房炎致病微生物100%灭杀;发酵后的牛粪经过晾晒,使其干物质含量达到45%~50%后,拌0.1%~0.2%的生石灰可用作卧床垫料。[结论]35%~40%干物质含量牛粪经过发酵,发酵温度60 ℃以上保持24 h,可将乳房炎致病微生物100%灭杀,发酵后经过晾晒使其干物质达到45%~50%后,拌0.1%~0.2%的生石灰可用作卧床垫料,牛粪垫料制备时间最短,使用效果最好。     

克百威人工抗原合成及其免疫应用

研究克百威半抗原4-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸(BFNB)的新合成方法,以避免传统三光气合成法的危害。以呋喃酚为起始物,通过酯化反应和还原反应最终合成半抗原BFNB,利用质谱和核磁进行表征,结果证明半抗原BFNB合成成功。利用活性酯法将BFNB分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联得到免疫原和包被原,紫外扫描计算偶联比分别为17∶1和8∶1;将免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,间接竞争酶免疫检测方法(icELISA)表明其半数抑制质量浓度(IC_(50))为0.096μg/mL,定量检测线性(IC_(20)~IC_(80))为0.023~0.403μg/mL。该研究所制备的抗原为进一步研制抗克百威单克隆抗体奠定基础。