华南三省(自治区)部分西番莲种植区花叶病病原检测及EAPV多聚蛋白基因序列分析

<正>西番莲(Passiflora edulis Sims.)是热带亚热带地区重要经济作物,我国福建、广东、广西、海南等地广泛种植[1]。调查发现,我国南方多地西番莲花叶病为害严重,症状表现为叶片花叶、黄化、斑驳、畸形,甚至整株褪绿,严重影响西番莲的产量和品质。已报道能引起西番莲花叶症状的病毒有：黄瓜花叶病毒属(Cucumovirus)的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus, CMV),     

SPF级小鼠肺支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为了建立及应用SPF级小鼠肺支原体实时荧光定量PCR检测方法,试验根据GenBank中肺支原体16S rRNA基因序列的高度保守区域设计引物,建立了可快速、准确检测肺支原体的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性、重复性以及疑似支原体感染样本检测,并评论其可行性。结果表明:所建立的qPCR方法具有良好的线性关系,标准曲线的相关系数R~2=0.999;5种相关的细菌检测结果均为阴性,特异性好;其检测灵敏度为10 copies/μL;组间样本的变异系数均小于3%,重复性好;对60份疑似支原体感染的小鼠咽拭子样本检测结果比采用ELISA方法以及常规PCR更灵敏。说明SPF级小鼠肺支原体的qPCR方法较之于ELISA方法及常规PCR具有快速、灵敏性高、特异性强、稳定性好等特点,能更好地进行小鼠肺支原体的快速检测和诊断。     

蓖麻粗毒蛋白的提取及其杀鼠活性初步研究

[目的]探讨蓖麻粗毒蛋白作为灭鼠药的可行性以及不同溶剂脱脂对蓖麻粗毒蛋白的生物活性的影响。[方法]用石油醚、乙醚、二氯甲烷3种溶剂分别对蓖麻粗籽进行脱脂后,用醋酸水溶液从脱脂的蓖麻饼中提取蓖麻毒蛋白,通过杀鼠活性试验比较3种蓖麻粗毒蛋白的杀鼠活性。[结果]3种蓖麻粗毒蛋白均有明显的杀鼠活性,小鼠死亡率均达100%。采用不同溶剂脱脂对蓖麻毒蛋白的活性没有影响,但二氯甲烷脱脂的蓖麻粗毒蛋白平均致死速度相对较慢。[结论]该研究为进一步分离和提纯杀鼠活性成分提供了线索,也为开发蓖麻作为植物源灭鼠剂提供了依据。     

蓖麻籽水提物对小鼠的毒杀试验

[目的]了解蓖麻籽水提物对小鼠的毒杀效果。[方法]用蒸馏水提取得到未经脱脂的和经乙醚脱脂的2种蓖麻籽水提物,研究2种水提物对小鼠的毒杀效果。[结果]2种蓖麻籽水提物对小鼠均有毒杀作用,效果很好,死亡率均达100%,对小鼠毒杀的平均时间1～2d,最长死亡时间3d,且雌性死亡较早。2种蓖麻籽水提物对小鼠致死时间与用药剂量有一定的相关性,用药剂量大,致鼠死亡时间相对缩短,但总体上均属于慢性致死。[结论]未脱脂的和经乙醚脱脂的蓖麻籽水提物对小鼠均有毒杀作用,小鼠死亡率达100%,致死平均时间1～2d,最快死亡时间26h。该研究为蓖麻籽作为植物源灭鼠剂提供了理论依据。     

龟板浸膏甲酯化GC-MS干细胞活性指纹图谱的研究与应用

[目的]为了确定运用生物活性指纹图谱预测中药的干细胞活性的可靠性而进行了该试验。[方法]试验中,依次用石油醚、乙醚、二氯甲烷提取龟板浸膏,得到溶剂提取物,将一部分溶剂提取物甲酯化,并用MTT比色法及流式细胞仪研究了甲酯化产物的干细胞活性;采用GC-MS技术研究每一个甲酯化产物,根据总离子流色谱图的相同保留时间和相应峰面积,获得龟板浸膏甲酯化GC-MS生物活性(干细胞活性)指纹图谱。结果表明:甲酯化产物均能促进干细胞的体外增殖,用龟板浸膏甲酯化GC-MS生物活性指纹图谱来预测中药"四物汤"的干细胞活性,平均预测准确率达87.5%。[结论]因此,用这种方法来预测未知中药样品的干细胞活性,有一定的可靠性。