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为拓宽十字花科蔬菜育种种质资源,以大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)、青花菜(B. oleracea L. var. varitalica)和叶用芥菜(B. juncea L. Czern)的子叶、下胚轴为材料,分离、纯化原生质体,采用40% 聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)融合法进行原生质体融合。融合细胞在附加0.2 mg · L-1 2,4-D + 0.5 mg · L-1 6-BA + 0.1 mg · L-1 NAA + 0.1 mg · L-1 激动素(kinetin)的改良K8p培养基中液体培养,当细胞分裂至8 ~ 10细胞期时,将分裂的细胞包埋于0.15%琼脂糖,然后在添加0.3 mol · L-1蔗糖和2 mg · L-1 6-BA + 2 mg · L-1 玉米素(zeatin)+ 1 mg · L-1 NAA + 0.5 mg · L-1 kinetin的Kao培养基中诱导愈伤组织。将培养获得的936个愈伤组织转到3种不定芽诱导培养基MS + 5 mg ? L-1 zeatin + 2 mg · L-1 IAA;MS + 2 mg · L-1 zeatin + 2 mg · L-1 IAA;MS + 0.5 mg · L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 NAA上诱导芽分化,当芽长3 cm左右时,转到1/2 MS + 0.2 mg · L-1 NAA的生根培养基上诱导生根,共获得了96株再生植株,对其进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。形态学观察显示再生植株表型变化大,包括3个亲本的中间型或两个亲本的中间型;PCR技术鉴定结果显示96株杂种植株中93株为细胞质雄性不育特性;染色体计数显示,再生的植株染色体数变化范围广(2n = 38 ~ 64),但未发现染色体数总和与3种融合亲本染色体数总数(2n = 74)相一致的个体。基因组原位杂交(Genomic in situ hybridization,GISH)和扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)分析结果表明,再生植株基因组中分别检测出大白菜、青花菜、叶用芥菜的DNA片段,证实了大白菜、青花菜、叶用芥菜种间体细胞杂交种的真实性。 相似文献
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为了了解高温和利巴韦林处理对马铃薯(Solanum tuberosum L.)卷叶病毒(Potato leave-roll virus,PLRV)和马铃薯Y病毒(Potato Y virus,PYV)脱毒的影响,以宝塔百利、红王和"803"为材料,采用高温和化学处理结合茎尖培养技术对上述马铃薯进行处理,采用RT-PCR方法检测病毒基因。结果表明,长时间的高温处理抑制马铃薯组培苗的生长,"803"的存活率最高为80.1%,宝塔百利的存活率最低为41.1%;利巴韦林对马铃薯生长的抑制作用较明显,其浓度超过75 mg/L时生根效果差,到125 mg/L时对马铃薯生长抑制效果最明显;RT-PCR结果显示,高温处理结合利巴韦林的处理上均未检测到病毒。 相似文献
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马铃薯大西洋组培苗的生根诱导及移栽 总被引:2,自引:0,他引:2
对马铃薯大西洋组培苗进行壮苗,在1/2M S培养基中添加不同浓度IAA、IBA对大西洋进行生根诱导和移栽研究。结果表明,大西洋组培苗壮苗后,在生根诱导培养时添加IBA的效果较好;最低生根培养浓度为0.4mg/L IBA;以东北土∶(花土 炉渣)=2∶1为移栽基质,在灭菌条件下,1/2M S 0.6mg/L IBA培养基中组培苗移栽的成活率最高,可达87.61%,而1/2M S 0.4mg/L IAA的移栽成活率仅为41.23%。因此,在生产中,推荐使用0.6mg/L IBA,有利于大西洋组培苗生根诱导和移栽。 相似文献
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以朝鲜白头翁幼嫩叶片诱导产生的不定根为材料诱导分生结节。采取Epon 812 树脂和石蜡
包埋切片技术分别对诱导初期的单个分生结节和培养5 ~ 6 周的组织进行组织切片研究。结果显示:(1)
不定根在诱导培养基上分化形成独立的表面光滑的球形分生结节。(2)单个分生结节顶端为3 ~ 4 层分生
细胞,其表皮和皮层上也观察到分生细胞。(3)分生结节分化后,结构上存在两种类型,一种为由分生
细胞、维管束、薄壁细胞和分化形成的小芽原基组成的结构,芽原基基部由排列整齐的表皮细胞组成,
不定芽之间结合较松散,与母体结合不紧密,易脱离,为独立的个体;另一种结构由排列规则的表皮细
胞环绕而成,其表皮细胞上广泛分布染色较深的球形、椭圆形或心形的体细胞胚状体,整个结构细胞大
小一致,无内部结构。结果证实,朝鲜白头翁不定根来源的分生结节上同时发生器官分化和直接体细胞
胚分化,分生结节也可分化形成胚性愈伤组织,通过愈伤组织间接再生体细胞胚。 相似文献
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朝鲜白头翁的组织培养与快繁技术 总被引:3,自引:0,他引:3
以朝鲜白头翁的叶片、叶柄和花梗为材料,研究了细胞分裂素zeatin、kinetin、6-BA 和生长素IAA 组合对诱导不定芽的影响;以不定芽为材料研究了植物生长调节剂对不定芽的增殖和生根的影响;研究了不同基质配比对组培苗移栽成活的影响。结果表明: 1)叶柄和花梗接种在MS + 0.5 mg · L-1 zeatin +0.05 mg · L-1 IAA 培养基培养6 周后不定芽再生率为100%。2)不定芽切成小块或单株带类似愈伤的组织块转到MS + 0.5 mg · L-1 zeatin + 0.05 mg · L-1 IAA 或MS + 1.0 mg · L-1 6-BA + 0.05 mg · L-1 IAA 的培养基时不定芽的增殖与生长良好。 3)在增殖培养基中长至3 cm 以上的小植株转入到1/2 MS + 1.5 mg · L-1NAA的生根培养基中培养42 d 后,生根率高达93%,平均根长12.3 cm,每株平均根数11 条,且可缩短生根时间。4)组培苗移栽到东北山土和珍珠岩比例为2︰1 的混合基质时,成活率高达66.7%。 相似文献
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IBA浓度对马铃薯大西洋和Bora组培苗生根移栽的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
研究了不同浓度的IBA对马铃薯大西洋和Bora组培苗生根和移栽成活率的影响。结果表明:诱导大西洋生根的最低培养基为1/2 MS+0.4 mg/L IBA,诱导Bora生根的最低培养基为1/2 MS+0.6 mg/L IBA;两者的最高移栽成活率分别为87.61%和93.58%,诱导此成活率的IBA浓度均为0.6 mg/L。 相似文献
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本文从分析晒烟早熟性和丰产性的矛盾中找出相关遗体参数,选择既早熟又丰产的晒烟新品种,增强预见性,提高选择效果,加速晒烟育种进程. 相似文献
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