重组质粒pACYC184-hok/sok的构建及稳定性研究

以低拷贝质粒pACYC184为载体,将hok/sok基因插入到载体BamH Ⅰ位点,构建重组质粒pACYC184-hok/sok稳定系统,同时构建hok/sok基因缺失突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M).通过对构建的重组菌进行连续传代和对不同代次的重组质粒进行SphⅠ酶切,分析hok/sok基因的引入对宿主细胞生长的影响.结果表明,重组质粒pACYC184-hok/sok在无抗生素筛选压力下连续传代,传至第135代时质粒稳定率仍是100%,且传代前后的质粒SphⅠ酶切图谱没有发生变化,DNA序列测定表明,插入的hok/sok基因没有发生任何突变.突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)传代前后的质粒SphⅠ酶切结果虽没有发生变化,但其相应的重组菌传至第15代,质粒几乎完全丢失.生长曲线的测定结果表明,与舍pACYC184重组菌生长曲线相似,pACYC184-hok/sok重组菌生长较快,而pACYC184-hok/sok(M)重组菌生长缓慢.以上结果表明,含hok/sok稳定系统,其稳定性明显高于无hok/sok稳定系统的质粒pACYC184以及突变质粒pACYC084-hok/sok(M).重组质粒pAqCYC184-hok/sok具有良好的结构稳定性和分离稳定性.     

油松移植与栽培管理技术

为了不断提高油松栽培水平,要有效分析油松移植技术。本文基于工作实践,从油松的林龄选择、起苗、运输及栽培管理等多方面进行实践探索,总结科学的栽培技术措施。技术人员要深入工作实际,不断运用更加高效的技术措施,以进一步保证油松栽培质量。     

奶油生菜水培营养液配方筛选

为筛选出适合西安地区奶油生菜漂浮培栽培模式的水培配方,以荷兰瑞克斯旺公司奶油生菜品种Flandria(富兰德里)为试验材料,以Hoagland和Arnon通用配方、日本园试通用配方、日本山崎莴苣配方、华南农业大学农化室叶菜A配方为试验处理,以北京某公司生产的商业水培叶菜肥为对照,研究不同营养液肥对水培奶油生菜生长的影响。结果表明,就产量的因素,日本园试通用配方、华南农业大学农化室叶菜A配方均可用于西安地区水培奶油生菜,日本山崎莴苣配方次之;就观赏品质因素,日本山崎莴苣配方为最优配方。本文为奶油生菜水培规模化生产提供营养液配方参考。     

细菌hok/sok解离后致死系统研究进展

由于编码特定基因的重组质粒增加了细胞本身的代谢负担,因此,含有质粒的重组菌通常不稳定。质粒不稳定性(Plasnid instability),包括分离不稳定性(Segregational instability)和结构不稳定性(Structural instability)两个方面,其中质粒的分离不稳定性是质粒不稳定性的主要因素。一旦丢失外源质粒,细胞将迅速增长,在数量上很快超