飞机草总黄酮提取工艺及其急性毒性研究

[目的]优化飞机草总黄酮提取工艺,并研究飞机草总黄酮提取物对小鼠的急性毒性。[方法]以飞机草总黄酮提取率为关键指标,采用超声波辅助乙醇溶剂提取法,通过单因素试验和正交试验设计,对提取时间、提取温度、料液比、乙醇浓度等提取条件进行优化,筛选飞机草总黄酮提取的最佳工艺;以昆明种小鼠为试验动物,进行飞机草总黄酮提取物口服急性毒性试验,测定半数致死LD50和最大耐受量。[结果]飞机草总黄酮的最佳提取工艺为提取时间5 h、提取温度70℃、料液比1∶60(g∶m L)、乙醇浓度70%,飞机草总黄酮提取率为7.13%;飞机草总黄酮提取物对昆明种小鼠的口服LD50未测得,其小鼠口服最大耐受量为80 000 mg/kg。[结论]飞机草总黄酮属于实际无毒物质。     

猪骨髓源树突状细胞体外诱导培养与鉴定

树突状细胞(DC)是机体主要的抗原递呈细胞,在固有免疫及适应性免疫中发挥重要作用。为进一步探究DC功能及诱导其分化的方法,本研究采用硬膜外腔麻醉法麻醉受试猪,以骨髓采集针从髋骨处抽取骨髓,裂解红细胞后,差速贴壁法获得前体细胞后,添加重组猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组猪白细胞介素4诱导其分化,以形态学方法和流式细胞术鉴定其特征。结果显示,骨髓前体细胞经诱导分化后具有典型的DC形态,其标记分子分化抗原簇1在第6 d和8 d阳性率分别达65.13%(p0.01)和56.5%(p0.01),标记分子二型猪白细胞抗原(SLA-IL-DR)在诱导后第6 d和8 d阳性率分别为86.87%(p0.01)和84.60%(p0.01)。本研究建立了活体猪骨髓源DC的体外分离培养和诱导分化方法,为基于DC的疾病防控研究提供依据。