海绵共附生放线菌Streptomyces sp. A01059抗稻瘟病活性物质的分离研究

对海绵共附生放线菌Streptomyces sp.A01059的发酵液进行研究,以获得有抗稻瘟病活性的化合物;用乙酸乙酯对发酵液进行萃取,然后用活性追踪的方法对乙酸乙酯萃取物进行分析,最后使用制备液相获得相应的活性部位;结果获得分子量为508和522的两个活性化合物;实验首次对放线菌Streptomyces sp.A01059的代谢产物进行分离研究.为稻瘟病的防治提供了新的途径.     

食线虫真菌的筛选及菌株DF09002的鉴定与产酶特性分析

从海南五指山原始森林、定安雷鸣发病胡椒园采集土壤样品及死亡线虫尸体,分离得到126株菌落形态有差异的真菌。以离体培养的南方根结线虫为靶标线虫对126株真菌进行筛选,获得7株对根结线虫校正死亡率在70%以上的菌株。菌株DF09002抗线虫活性最强,校正死亡率达100%;经5次继代培养,仍具有稳定产生杀线虫活性物质的能力。通过形态学和rDNA ITS序列分析,将该菌株归类为曲霉属黑色组曲霉黑曲霉集合体。酶系分析试验表明,菌株能产生在线虫侵染过程中起重要作用的几丁质酶和胞外蛋白酶,酶活力分别达到0.67、41.63 U/mL。     

海南岛胡椒地穿刺巴斯德芽菌鉴定与多样性分析

穿刺巴斯德芽菌(Pasteuria penetrans)是根结线虫(Meloidogyne spp.)的专性寄生菌,且是研究最多的线虫天敌细菌之一.胡椒作为海南的主要经济作物之一,根结线虫发病率较高.前期的研究发现,在海南岛胡椒中较易分离到P.penetrans.结合形态学和16S rRNA序列分析的方法,着重对海南岛6个市县共13个胡椒园进行P.penetrans资源鉴定发现,在经筛选获得的33个具代表性巴斯德芽菌克隆中,32个克隆子被鉴定为P.penetrans,而克隆子tf-1与P.penetransT(AF077672)的相似性仅为97.7％,且在发育树上处于独立分支,可能为巴斯德芽菌属的一个新种.聚类分析结果发现,海南岛存在较丰富的P.penetrans资源,但在不同的地理区域内没有发现明显的种内地域特异性.     

海南岛胡椒地穿刺巴斯德芽菌鉴定与多样性分析

穿刺巴斯德芽菌（Pasteuria penetrans）是根结线虫（Meloidogyne spp.）的专性寄生菌,且是研究最多的线虫天敌细菌之一。胡椒作为海南的主要经济作物之一,根结线虫发病率较高。前期的研究发现,在海南岛胡椒中较易分离到P. penetrans。结合形态学和16S rRNA 序列分析的方法,着重对海南岛6 个市县共13 个胡椒园进行P.penetrans 资源鉴定发现,在经筛选获得的33 个具代表性巴斯德芽菌克隆中,32 个克隆子被鉴定为P. penetrans,而克隆子tf-1 与P. penetransT（AF077672）的相似性仅为97.7%,且在发育树上处于独立分支,可能为巴斯德芽菌属的一个新种。聚类分析结果发现,海南岛存在较丰富的P. penetrans 资源,但在不同的地理区域内没有发现明显的种内地域特异性。     

海南省穿刺巴斯德芽茵资源调查及其系统发育分析

穿刺巴斯德芽菌Pasteuriapenetrans是根结线虫的专性寄生菌,是最有潜力的根结线虫生防因子。为了解海南省穿刺巴斯德芽菌资源,本文首次对海南省根结线虫病区进行调查,发现穿刺巴斯德芽菌的分布与土壤类型、寄主植物、气温等因素相关。在获得的27个巴斯德芽菌16SrDNA克隆中,均与穿刺巴斯德芽菌具有较高同源性。其中,菌株wf2与穿刺巴斯德芽菌P．penetrans16SrDNA同源性为95．8％,在发育树上处于独立的分支,为巴斯德芽菌属的1个新种;菌株dal、da2、qh和th与P.penetrans16SrDNA同源性为97．5％~97．8％,在发育树上也处于独立的分支,很可能是巴斯德芽菌属的新种;另22株可归属为穿刺巴斯德芽菌。调查结果反映出海南省具有丰富的巴斯德芽菌资源。     

海绵共附生放线菌Streptomyces sp. A01059抗稻瘟病活性物质的分离研究

摘要：目的 对海绵共附生放线菌Streptomyces sp. A01059的发酵液进行研究,以获得有抗稻瘟病活性的化合物;方法 用乙酸乙酯对发酵液进行萃取,然后用活性追踪的方法对乙酸乙酯萃取物进行分析,最后使用制备液相获得相应的活性部位;结果 获得分子量为508和522的两个活性化合物;结论 本实验首次对放线菌Streptomyces sp. A01059的代谢产物进行分离研究,为稻瘟病的防治提供了新的途径。     

穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对番茄根结线虫病防效研究

为了探讨穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对番茄根结线虫病的防效,对种植在含有根结线虫土壤中的番茄根系周围接种不同量的穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3,在接种后的30、45、60 d分别测定番茄的株高、茎粗、根重、地上部重、根冠比、根系活力、病情指数,并在结果期测定单果重和3穗果的单株产量。结果表明：根结线虫侵染会造成番茄株高、产量、地上重显著降低,茎粗明显变细,根重、根冠比显著增加,根重、根系活力先升高后降低。接种穿刺巴斯德芽菌后,各处理的株高、产量、地上部重、茎粗均较只施线虫对照增加,而根重、根冠比则降低,接种穿刺巴斯德芽菌量最多的处理,株高比只接种根结线虫的处理增加6.55％,茎粗增加了16.99％,地上重增加了34.26％,根重减少了13.98％,病情指数降低了64％,果实产量增加了61.56％,与接种根结线虫的处理存在显著差异。这说明穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对根结线虫具有防治效果,而高接种量的穿刺巴斯德芽菌对番茄根结线虫病的防治效果最好。     

穿刺巴斯德芽菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用

以穿刺巴斯德芽菌16S rDNA片段为靶标,通过对荧光定量PCR反应条件的摸索,建立该菌的荧光定量PCR检测方法.所选靶点最适退火温度60℃,正、反向引物的最佳浓度搭配为900、300 nmol/L;以Ct值和质粒拷贝浓度对数为坐标轴建立标准曲线,回归方程为y=-3.200×logx+ 34.43,R2值为0.998,PCR扩增效率为105.4％,对含穿刺巴斯德芽菌芽胞的土壤样品检测阈值为2×103个/g土壤.该方法敏感度高、特异性好,能够运用于穿刺巴斯德芽菌的定性、定量检测.     

香蕉镰刀菌枯萎病拮抗放线菌的筛选及菌株Da03047的鉴定

通过分离和筛选,从海南原始森林尖峰岭采集的土样中获得10株对香蕉镰刀菌枯萎病病源菌具有抑制作用的拮抗放线菌,其中菌株Da03047活性最强且遗传稳定,通过形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列测定及其系统发育分析研究,鉴定为灰肉色链霉菌。     

莺歌海盐场30%盐度晒盐池底泥中可培养芽胞杆菌资源遗传多样性研究

采用80℃水浴处理与稀释涂布法从莺歌海盐场30%盐度晒盐池底泥中分离获得215株芽胞杆菌。采用16S rDNA PCR-RFLP与16S rDNA序列分析技术,对分离的菌株进行遗传多样性分析。16S rDNA PCR-RFLP酶切图谱UPGMA聚类分析结果表明,在100%的相似性水平上,分离菌株归属到9种酶切类型。16S rDNA测序结果显示,这些菌株主要分布在Pontibacillus、Halobacillus、Oceanobacillus和Bacillus等4个属,其中Pontibacillus为优势属。有7株芽胞杆菌的16S rDNA序列与数据库中相应模式菌的最大相似性在97.4%~99.0%之间,有可能为芽胞杆菌新种资源。