农杆菌介导法获得匍匐翦股颖转GO基因植株

以匍匐翦股颖2个品种Pent A-4和L-93的成熟种子为外植体材料,附加2,4-D 4.0 mg/L和KT 0.05 mg/L的稍作修改的MS培养基为愈伤组织诱导和继代培养基.琼脂条的用量为16 g/L时,50%以上的愈伤组织呈浅黄色或白色、干燥、颗粒状结构.颗粒状愈伤组织经过连续3次继代培养后,其绿苗分化率保持在60%以上.以颗粒状胚性愈伤组织为受体材料,用农杆菌介导法将含有葡萄糖氧化酶(GO)基因和新霉素磷酸转移酶基因(NPT II)的重组质粒导入匍匐翦股颖.愈伤组织经农杆菌LBA4404/pBGO感染和共培养后,在附加G-418 60 mg/L的愈伤组织继代培养基上选择到具有卡那霉素抗性的愈伤组织.抗性愈伤组织分化的绿苗在附加G-418 30 mg/L的绿苗分化培养基上进行筛选,获得了抗性再生植株.试管植株的叶片经淀粉-碘化钾显色反应,检测到转GO基因植株产生的过氧化氢.PCR分子检测结果证明,GO基因已整合到转化植株的基因组中.抗病性鉴定结果显示,转GO基因植株抗水稻纹枯病.     

结球白菜种质遗传多样性和亲缘关系的AFLP分析

利用AFLP标记和UPGMA聚类分析,对76份结球白菜品种自交系及不结球白菜上海青和日本水菜千筋菜共78份材料的亲缘关系进行分析.从64个AFLP引物组合中筛选出8对多态性好、条带清晰的引物组合对78份材料的基因组DNA进行扩增,共检测到301个谱带,平均每个引物扩增出37.6个条带,其中存在多态性的条带数为273.结果显示,78份材料之间的遗传相似系数(GS)的变化范围为0.63～0.98;其中76份结球白菜的GS为0.72～0.98,千筋菜与上海青的GS为0.74;取相似系数0.80,可将78份自交系分成8个类群,第一至第六类群均为结球白菜,第七类群为千筋菜,第八类群为不结球白菜上海青.结球白菜类群的划分与传统上按叶球类型的划分结果具有一定的相似性.