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为提高乙酸肉桂酯的酶促合成效果,在柱形玻璃瓶中,将脂肪酶(Pseudomonas cepacia lipase)固定在脱脂棉上,形成一种简易的生物反应器,用于催化肉桂醇与乙酸乙烯酯发生转酯反应。结果表明:在37℃、160 r/min条件下,12 h后,反应器中的固定化酶可使92%的底物转化,而酶粉仅能转化35%的底物。在静置条件下,分别在37、25和4℃保温12 h,底物转化率分别为88%、84%和44%。在每次6 h的重复催化试验中,固定化酶和酶粉转化底物能力每小时降低率分别为0.3%、0.5%。可见,反应器中的固定化酶相对于酶粉,其催化活性和非水稳定性明显提高,即使在室温和静置条件下,这种固定化酶反应器也表现出较高的催化活性,是一种低碳、高效的固定化酶反应器。 相似文献
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农杆菌介导慈竹4CL基因遗传转化梁山慈竹 总被引:4,自引:0,他引:4
以梁山慈竹2种类型成熟胚的愈伤组织为材料,采用农杆菌遗传介导的方法,将已构建好的具有降低木质素含量的PBI121-4CL-RNAi表达载体导入愈伤组织,探讨愈伤组织预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间和温度对遗传转化的影响。研究结果表明,淡黄色、颗粒状、疏松易碎的胚性愈伤组织是较好的遗传转化材料。以在愈伤组织培养基上预培养8天的淡黄色、颗粒状、疏松易碎的胚性愈伤组织为转化受体,在菌液浓度为OD600=0.05的EHA105中侵染20min后,在25℃、黑暗条件下共培养2天(共培养基表面加一层无菌滤纸),在含有卡那霉素为55mg.L-1的抗性筛选培养基上筛选30天,抗性愈伤组织率为90%,经PCR检测,慈竹4CL基因已导入梁山慈竹愈伤组织中。抗性愈伤组织在芽诱导培养基上诱导30天,可获得丛生芽,待丛生芽长至3~5cm后,在生根培养基上经过20~30天的诱导,可产生1~8条根,获得再生植株。经PCR检测,慈竹4CL基因已导入梁山慈竹再生植株中,获得了转基因植株,转化效率为9%。RT-PCR检测结果表明,转4CL基因的梁山慈竹愈伤组织和植株的内源4CL基因的表达受到抑制,且表达量比对照明显降低。 相似文献
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