牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选

为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体。结果表明:1)成功构建了库容量为4.3×10⁷的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3%,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×10⁴;2)优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG。综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立。     

超声波辅助酶法提取枇杷叶多糖工艺研究

探讨运用响应面法优化超声波辅助酶法提取枇杷叶多糖工艺条件,在单因素试验基础上,选取果胶酶用量、酶解温度、酶解p H值和料液比为影响因子,枇杷叶多糖得率为响应值进行响应面分析。结果表明,超声波时间1 h,料液比1∶15,酶解时间2 h,果胶酶用量1.9%,酶解温度52℃,酶解pH值4.5,枇杷叶多糖的得率最高为4.97%。     

马齿苋中黄酮类化合物的提取工艺研究

采用乙醇提取法,以芦丁为标准样品,研究马齿苋中黄酮类化合物的提取工艺,建立的芦丁标准工作曲线回归方程为:C=0.0883A+0.0016,相关系数R=0.9989。用正交实验研究了乙醇体积分数、料液比、提取温度和提取时间对黄酮类化合物提取率的影响。结果表明,最优提取工艺条件为:乙醇体积分数75%,料液比1∶20,提取温度80℃,提取时间2.5h,在此条件下,马齿苋中黄酮类物质的含量可达到76.0mg/g以上。     

山葡萄酒酿造工艺及其香气成分GC-MS分析

以武陵山区山葡萄为原料,研究山葡萄酒酿造工艺和酿造过程中香气成分的动态变化。采用正交试验优化山葡萄酒发酵工艺条件,即酵母菌接种量0.15%,发酵p H值3.4,发酵温度30℃,发酵时间72 h。在此条件下,山葡萄发酵液酒精度实测值为8.4%(V/V),且带有浓郁的山葡萄果酒芳香。采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术,分析山葡萄酒陈酿期间香气成分的变化情况。结果表明,山葡萄酒的主要香气成分有壬酸乙酯和3-甲基-1-丁醇,同时乙酸乙酯、癸酸乙酯、丁二酸二乙酯、苯乙醇等酯类和醇类也对其香气有重要贡献。