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1.
【目的】基因拷贝数变异是一种常见又重要的基因结构变异,往往影响个体表型。低分子量麦谷蛋白(low-molecular-weight glutenin subunit,LMW-GS)是小麦贮藏蛋白的主要组成部分,位于Glu-3位点。小麦作为异源六倍体,其庞大且复杂的基因组结构导致难以利用传统方法检测目的基因的拷贝数,针对小麦基因组,筛选可靠稳定的内参基因和体系,探索适合复杂基因组的拷贝数变异测定技术,测定Glu-3位点LWM-GS基因拷贝数。【方法】以Acc1为内参基因,根据基因序列设计内参引物和探针,通过定性和定量PCR测定内参基因在12个普通小麦品种中的拷贝数,分析该基因拷贝数在不同品种间的稳定性;又以小麦品种篙优2018的5个稀释浓度的基因组DNA为模板,利用qRT-PCR验证Acc1内参系统的重复性和准确性;根据Glu-A3位点LMW-GS基因序列设计特异性引物及探针,利用qRT-PCR和ddPCR 2种方法检测8个小麦品种Glu-A3位点基因拷贝数,比较后选择更优的高通量基因拷贝数检测方法;再根据Glu-B3Glu-D3位点LMW-GS基因序列设计相应的特异性引物及探针,并利用ddPCR技术检测和分析了231份小麦品种的Glu-A3Glu-B3Glu-D3位点上LMW-GS基因拷贝数。【结果】Acc1在12个普通小麦品种间、同一品种5个DNA稀释浓度间的拷贝数测定结果一致,技术重复间的变异系数仅为0.07%—0.77%,所构建的Acc1内参系统稳定;比较qRT-PCR和ddPCR 2种拷贝数检测方法,8个品种所测的Glu-A3位点拷贝数结果一致,分别为3、5、3、4、3、3、3和3;且ddPCR检测重复间的变异系数为0.30%—1.67%,远低于qRT-PCR的3.14%—12.72%,更加可靠;利用ddPCR对231份普通小麦品种的Glu-A3Glu-B3Glu-D3位点上LMW-GS基因拷贝检测后分析发现,大多数小麦品种在3个位点上的拷贝数为4,所占频率分别为51.95%、32.03%和28.57%,Glu-3位点总拷贝数变异范围为10—21,变异系数为16.12%。【结论】Acc1内参系统具有良好的稳定性和重复性,可以用作小麦Glu-3位点和其他目的基因拷贝数检测的内参;qRT-PCR和ddPCR均可用于小麦基因拷贝数的检测,但后者更稳定、可靠,且操作简单、检测通量高。  相似文献   
2.
司冰 《种业导刊》2021,(2):12-13
玉米是世界上三大粮食作物之一,目前,玉米产量和品质的提高较大程度依靠基因工程技术。而玉米的农杆菌转化是对玉米基因组进行遗传修饰的有效手段。综述了玉米农杆菌转化的受体、影响农杆菌转化效率的因素,以有效地提高转化效率。  相似文献   
3.
为评估四川省兽医系统实验室检测能力和水平,2018—2020年四川省动物疫病预防控制中心组织全省21个地市(州)级兽医实验室开展了检测能力比对。结果显示:2018—2020年全省整体平均正确率分别为95.59%、97.09%和97.88%,说明四川省地市(州)级兽医实验室检测能力处于较高水平,能满足非洲猪瘟、禽流感等重大动物疫病检测需要。同时,部分实验室也反映出一些问题,如设备差、检测水平不高、检测报告不规范等。建议加大兽医实验室建设力度,更新完善检测设施设备;加强实验室技术人员培训,提升其检测能力和水平;同时继续推进兽医系统实验室考核工作,加强比对考核。  相似文献   
4.
数控立式双主轴车床作为机械加工体系之一,其几何精度直接影响数控加工产品综合质量。文章通过对数控立式双主轴车床几何精度进行探究,以期为提升该数控体系加工成效,提供行之有效的理论参考依据。  相似文献   
5.
本文分析黄花菜的生理特性,生长习性及在不同生长期的需水要求,运用合理的灌溉模式,进行适时、适量地科学灌溉,提高黄花菜的产量,以达到合理高效的节水效应及高产量的目的。并对黄花菜的节水灌溉研究进展作了总结,对发展前景提出构想与展望。  相似文献   
6.
采用大田裂区试验,研究了施用锌肥和不同遮阴程度互作对花生生长发育、抗病性及产量的影响。结果表明,与不施锌肥相比,施用锌肥能提高花生不同部位锌含量、增加叶片SPAD值,提高花生叶片中可溶性糖、蛋白质和生长素含量,减少花生病害的发生,平均降低7.1个百分点,花生产量平均增加19.4%。相同施锌水平下,随着遮阴程度的增加,花生不同部位锌的含量和不同生育期叶片SPAD值以及花生叶片中可溶性糖、蛋白质和生长素含量呈增加趋势,花生的发病率比不遮阴对照增加4.8、10.2个百分点,花生产量平均降低16.5%、10.0%。在30%、70%的遮阴条件下,施用锌肥的花生产量比不施锌的分别提高21.1%、25.0%。本试验条件下,施用七水硫酸锌30 kg/hm2,使花生具有较强的抗低温寡照能力及抗病性能,增产显著,可在花生产区推广应用。  相似文献   
7.
本文介绍了山东省各级农业农村部门在农药管理的机构体系建设、行政许可落实、技术支撑强化等工作的改革进展变化;分析了农药管理与行业发展面临的新形势与新问题,研究探讨了农药管理的创新与经验。  相似文献   
8.
为了解决三水区雪梨瓜种植面积的不断扩大、复种指数不断提高,品质退化、产量降低、病虫害严重的现象越来越突出的问题,佛山市农业科学研究所申请并开展了"蔬菜嫁接栽培技术研究及示范推广"课题研究,从2013—2015年,摸索出了一套适合本地生产雪梨瓜嫁接苗的技术和方法,即通过选择砧木、选择播期、营养土配方、高效嫁接、苗期管理、成苗运输等措施,缓解了嫁接操作不规范、生产管理不统一、苗木质量差异大、产量品质不理想的难题,初步实现雪梨瓜嫁接苗的工厂化、规模化生产,为三水雪梨瓜种植业的可持续发展提供了有力保障。  相似文献   
9.
正1以设施蔬菜为主导目前,我国的设施蔬菜栽培,主要通过日光温室和塑料拱棚进行,种植面积达到478万hm2,居世界第一位。在我国城市周边区域,蔬菜设施栽培技术得到广泛应用,种植面积几乎达到田园面积的10%,有的地区占比甚至更多。设施园艺平均产值已经达到20.2元/m2,其净值也维持在15.7元/m2,投入与产出比维持在1∶4左右,产量要比露地高出3~5倍。产值已经突  相似文献   
10.
响应面优化超声波辅助复合酶法提取杏鲍菇黄酮   总被引:1,自引:1,他引:0  
研究了利用超声波辅助复合酶法提取杏鲍菇黄酮的最优条件。在单因素试验的基础上,固定其他影响因素,选择料液比、超声时间和酶解pH进行三因素三水平的Box-Behnken试验,利用Design-expert 8.0.6软件进行响应面分析。结果表明,在料液比为1∶50(g∶m L),超声时间为6 min,酶解pH为5.4条件下获得的黄酮提取率最高,可达3.352%。  相似文献   
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