条件性敲除D1133L基因的重组非洲猪瘟病毒的构建及增殖特性

前期研究初步表明非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L基因对ASFV复制至关重要,本研究拟进一步探究D1133L在ASFV复制中的作用。利用同源重组技术结合大肠杆菌lac阻遏操作系统实现条件性敲除D1133L基因,以pUC118为骨架重组转移载体ASFVΔi130,将重组转移载体转染骨髓源巨噬细胞(BMDMs),以ASFV CN/GS/2018为亲本毒株感染BMDM,在β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,经绿色荧光和PCR鉴定,获得条件性敲除D1133L重组毒株vD1133Li。利用荧光显微镜观察该重组毒株与亲本毒株在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制差异,利用qPCR技术比较重组病毒与亲本毒株的复制差异,分析vD1133Li在无IPTG情况下回补D1133L蛋白后与在IPTG诱导情况下的复制差异。结果显示：本研究成功构建了条件性敲除D1133L的ASFV重组病毒vD1133Li,重组毒株不表达D1133L,在IPTG诱导下复制能力显著低于亲本毒株;在稳定表达D1133L的MA-104细胞系中,vD1133Li复制能力恢复。综上所述,D1133L基因对于ASFV复制至关重...     

减少联合收割机作业损失的途径

用联合收割机收获小麦虽能减轻劳动强度、提高收割效率、抢收抢种.但作业时由于机手调整和使用不当就会增加不必要的损失。为减少这种损失,机手必须详细了解机具结构和工作性能、对机具进行正确凋整,使机具保持在最佳技术状态下作业、现分析各种损失产生的原因,提出减少这些损失的途径供调整和使用联合收割机时参考。     

无公害蔬菜生产技术

一、建立绿色蔬菜生产基地 1.无污染的生态环境蔬菜生产基地,首先是大环境洁净,空气清新,大气环境质量好,菜田周围的大气、地下水、土壤中的有害物质低于国家规定的标准.基地远离主干公路40米以上,菜田中施用微生物发酵肥料和充分腐熟的有机肥,要求土壤中的pH值呈微酸性或中性.     

TTNJ-16蔬菜农药残留检测仪使用及注意事项

鉴于目前出现的农产品安全问题以农药残留最为常见和严重的现象,监控农药的合理使用,杜绝农药残留超标产品上市销售成为农产品质量安全工作的重中之重。控制农产品中农药残留量的关键环节之一就是对农产品中的农药残留量进行及时、准确地分析检测,因此,在生产、流通领域中加强对农残的快速检测已成为十分必要的监管措施。     

冬小麦耐盐幼穗无性系变异分析

本文采用两种培养方法筛选耐盐变异体，结果表明，在高盐份培养基础上诱导出愈伤组织后，采用直接转化分法和逐渐提高盐浓度并经低盐浓度长期继代法都可获得耐盐植株。采用前一种方法获得了冀早１５、沧县红和沧县红麦三个材料的再生植株共３４株。经盐池鉴定和水培鉴定其中沧县红和沧县红麦的再生植株后代中有１０株的耐盐性可在Ｒ２和Ｒ３代遗传。采用后一种方法获得了耐２．５％ＮａＣｌ的沧县红麦愈伤组织，其两重植株的Ｒ２代有     

翘嘴红鮊池塘养殖试验

翘嘴红鱼白，俗称“鱼白鱼”，是远近闻名的“太湖三白”之一，其个体大、生长快、抗病力强，肉味为鱼中上品，酷似鲥鱼，为肉食性名贵鱼类，市场前景广阔。由于捕捞强度及各种因素，太湖野生资源日益减少，目前仍以捕捞为主，不能满足市场需要。国内仅有对人工繁殖与苗种培育的技术研究，其苗种最终在湖泊、水库等大水面进行了增殖放流应用。池塘养成商品鱼尚为空白，因此开展太湖鱼白鱼人工养殖对于渔农增收，满足市场，保护天然鱼白鱼资源都十分有益。２００１年，我们开展了翘嘴红鱼白池塘商品鱼养殖试验，突破池塘人工养殖技术难关，为…     

主要秋菜常发性病害及防治

主要秋菜常发性病害及防治王志琴纪淑绢董修才（吉林省蔬菜花卉科学研究所·１３００３１）秋菜的种类很多,主要为秋白菜、萝卜、甘蓝、大葱等蔬菜作物。秋菜在生育过程中常因品种抗病性、栽培条件、自然环境等因素的影响,发生多种病害,最终导致减产、品质下降或绝收。...     

生物炭对黄淮麦区土壤温度的影响

为了降低低温冻害发生时土壤温度对小麦植株的危害,通过2010、2011年生物炭在麦田应用,研究了生物炭对黄淮麦区土壤温度的影响。结果表明,施炭与不施炭相比,施炭可以提高冻害天气下最低温度,降低最高土壤温度,增加土壤积温,对小麦提高抗霜性具有一定积极的作用。     

猪源组织蛋白酶S抑制O型口蹄疫病毒在PK-15细胞复制

前期研究数据表明组织蛋白酶S（cathepsin S，CTSS）在猪初乳中表达水平显著高于常乳，且CTSS有抑制病毒复制的作用，本研究旨在探究猪源CTSS对O型口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus serotype O，FMDV-O）复制及对FMDV诱导的抗病毒细胞因子的影响。FMDV-O感染PK-15细胞，利用RT-qPCR和Western blot分别在转录和翻译水平探究FMDV-O感染对内源性CTSS表达的影响；使用CTSS活性检测试剂盒测定FMDV-O感染对CTSS酶活性的影响；根据GenBank公布的CTSS基因序列（XM_021089893.1）构建CTSS真核表达质粒，利用脂质体方法转染PK-15细胞，通过Western blot检测CTSS表达情况，并在此基础上通过Western blot和RT-qPCR检测过表达CTSS对FMDV-O复制及FMDV-O诱导的抗病毒细胞因子mRNA水平的影响；进一步针对CTSS设计合成3对特异性siRNA，利用Western blot和RT-qPCR检测CTSS和FMDV-O的变化。结果表明，FMDV-O感染PK-15细胞能显著上调猪源CTSS表达并增强CTSS酶活性；过表达CTSS能抑制FMDV-O在PK-15细胞中复制，这种抑制作用可能是通过促进FMDV-O诱导的抗病毒细胞因子产生而发挥功能的；干扰序列siRNA-2947下调内源性CTSS表达进而促进FMDV-O的复制。猪源CTSS促进宿主抗病毒细胞因子产生可能是抑制FMDV-O复制的原因之一，本研究为深入探究宿主CTSS在抗FMDV天然免疫应答中的作用及机制提供依据。     

铁皮石斛栽培基质的筛选研究

[目的]筛选铁皮石斛出瓶炼苗时适宜的栽培基质。[方法]以珍珠岩、细陶粒、腐殖土、泥炭、椰糠、刨花6种基质配制不同的混合基质进行炼苗筛选,在几种不同的基质中,结合生根数、茎节数、叶片数、植株高度试验指标进行综合对比分析。[结果]细陶粒∶腐殖土=1∶3的混合基质最适合铁皮石斛组培苗练苗;其次细陶粒∶珍珠岩∶腐殖土=2∶1∶1和细陶粒∶刨花=1∶2的混合基质也比较适合练苗。[结论]适宜的栽培基质为提高移栽成活率、培育高产量、高品质的铁皮石斛以及发展产业化、规模化种植提供扎实的理论依据。