环氧丙烯酰胺对睾丸间质细胞R2C活性及孕酮合成功能的影响

[目的]研究环氧丙烯酰胺（ GA）对体外培养的 R2C细胞生长及孕酮合成的影响。[方法]用0.25、0.5、0.75、1、2、4、6 mmol/L 浓度的GA作用于细胞48 h,MTT法获得 GA作用浓度的IC25,IC50及 IC75。用以上3种浓度的GA刺激细胞48 h,观察细胞形态。GA作用于细胞4 h后,通过彗星试验（Comet Assay）检测细胞 DNA的损伤程度;放射免疫法（ RIA）测定 GA刺激细胞24 h后的孕酮合成量。[结果] GA能抑制 R2C细胞活性,其 IC25、IC50、IC75分别为0.635、0.872及1.198 mmol/L;3种浓度的 GA能不同程度的影响细胞生长形态;作用4 h对 R2C细胞 DNA有损伤作用;各浓度组作用24 h后均能降低孕酮的合成量。[结论] GA能抑制 R2C细胞增长及孕酮合成能力。     

种子特异启动子的克隆及植物表达载体构建

[目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8s球蛋白a亚基基因8SGα的启动子区域,基因组步移使用的引物根据绿豆8SGα的cDNA序列设计。[结果]通过3轮PCR的扩增,得到了472bp的上游序列片段,构建了植物双元表达载体pBI－8SGα-GUS。[结论]研究结果可用于转化植物,并于转基因植物中分析启动表达的时空特异性及表达强度,并为植物种子生物反应器提供重要元件。