油菜含MATH结构域基因BnaMT1的克隆及表达分析

利用已构建的甘蓝型油菜种子发育过程SSH文库,筛选得到1个含MATH结构域的EST序列,并以其为信息探针,经电子克隆获得了该基因的全长cDNA,命名为BnaMT-1。BnaMT-1的开放阅读框(ORF)全长1 209 bp,编码402个氨基酸,相对分子质量为46 130.7,预测的理论等电点为8.50,其结构包括信号肽、跨膜结构及2个连续的MATH结构域,为亲水性胞外分泌蛋白;进化树分析发现,该基因与拟南芥含MATH结构域基因亲缘关系较近;利用半定量RT-PCR技术对该基因在甘蓝型油菜湘油15号不同组织及种子不同发育时期的表达分析表明:BnaMT-1在叶、花和果荚中都有表达,在根和茎中没有表达;种子发育过程中,BnaMT-1均有表达,且表达量于花后30～35 d最高,之后表达量下降。推测该基因可能与种子发育及油脂合成代谢相关。     

拟南芥含双MATH结构域基因AtSb3基因表达的组织定位研究

摘要：MATH结构域即安眠蛋白与TRAF-C端同源结构域(Merprin and TRAF-C homology domain)，由7-8个反向平行的β-折叠组成。AtSb3是拟南芥中一个编码双MATH结构域蛋白的基因，其功能未知。本研究在构建AtSb3基因启动子与GUS融合载体并获得拟南芥转化子的基础上，利用半定量RT-PCR的方法和组织化学染色方法对AtSb3基因在拟南芥中的表达进行了研究。结果表明：在茎、叶、花和果荚中均检测不到AtSb3的表达，而在根中检测到AtSb3的表达。GUS组织化学染色结果显示：在刚萌动的种子中，AtSb3主要在胚根部位表达，其它部位不表达；在种子萌发后的子叶展开期，AtSb3在根尖部位表达，其它部分不表达；在4-5叶期幼苗中，AtSb3在地上部位没有表达，只在主根和各级侧根的根尖部位以及靠近根茎转换区的根中有表达。在根尖部位，AtSb3基因在根冠和分生区结合部，以及伸长区的组织染色非常深，说明表达量高，在结合部与伸长区之间的组织染色非常浅，说明表达量很低。