棉铃虫V-ATP酶E亚基基因克隆及表达分析

为进一步探明V-ATP酶亚基的功能,克隆了棉铃虫V-ATP酶E亚基开放阅读框;并通过荧光定量PCR,测定了V-ATP酶E亚基在棉铃虫不同发育阶段和不同组织中的基因表达量。结果表明,棉铃虫V-ATP酶E亚基开放阅读框长681 bp,编码226个氨基酸;V-ATP酶E亚基是一个保守亚基,与斜纹夜蛾的氨基酸序列一致性高达92%;V-ATP酶E亚基在棉铃虫卵、幼虫、蛹和成虫等发育阶段都有表达,以5龄幼虫表达量为最高,在触角、头、胸、腹、足、翅、外生殖器和中肠等组织中亦均有表达,其中在4龄中肠中表达量最高。说明V-ATP酶E亚基在棉铃虫的生长发育及代谢过程中发挥着重要作用。     

壳聚糖对断奶仔猪肠道菌群的影响

日粮中添加不同水平壳聚糖对断奶仔猪肠道总需氧菌、乳酸菌和大肠杆菌数的影响.试验选择180头(杜×大×长)三元杂交断奶仔猪,随机分为5个日粮处理组,每处理6个重复,每重复6头猪,试验期28 d.基础日粮中分别添加0、100、500、1000和2000 mg/kg壳聚糖.各日龄阶段壳聚糖添加组盲肠和结肠内的总需氧菌均低于对照组;乳酸菌数均高于对照组,但从回归分析结果看,与壳聚糖添加量都没有明显的剂量依赖关系.各日龄阶段壳聚糖日粮组盲肠和结肠内大肠杆菌数均低于对照组.盲肠内大肠杆菌数在14d时各组间差异趋于显著,在28 d时随壳聚糖添加剂量的增加呈显著的二次曲线降低变化.结果表明:添加壳聚糖能够有效抑制结肠内大肠杆菌数,从而在一定程度上改善断奶仔猪的肠道微生态环境.     

EM制剂对牛粪中氨气释放及微生物含量的影响

试验旨在探讨微生态制剂EM对牛粪中氨气释放及微生物含量的影响。试验设0（对照组）、0．5％、1％和2％四个EM添加水平,将200g牛粪与不同比例EM制剂混匀后置于盖有胶塞的三角瓶中恒温培养5d,测定培养过程牛粪中氨气产生量及培养结束后培养体系中氨氮、全氮和常见微生物含量。结果表明,各处理组均未检测到氨气的产生;EM处理组氨氮含量明显降低,且全氮含量明显升高,其中2％EM处理组与对照组及0．5％EM处理组差异显著（P〈0．05）;此外,2％EM处理组大肠杆菌含量显著低于对照组（P〈0．05）,乳酸茵含量则显著高于对照组和0．5％EM处理组（P〈0．05）。试验显示,EM制剂能降低牛粪中氨氮浓度及氮损失,调节微生态环境,从而减少氨的释放,改善畜舍空气质量。     

饲喂复合益生菌对奶牛粪便中氨气产生及微生物含量的影响

试验旨在研究饲喂复合益生菌对奶牛粪便中氨气产生及微生物含量的影响。试验选用18头胎次、体重、泌乳阶段及产奶量相近的澳洲荷斯坦奶牛,采用完全随机分组试验设计,分为对照组、低剂量益生菌组和高剂量益生菌组。对照组不饲喂益生菌,2个益生菌处理组分别饲喂50和100mL/d的益生菌液。试验期为60d,分为试验前期和试验后期,各30d。结果表明,在整个试验期,益生菌处理组显著降低了牛粪中氨气产量(P0.05)。此外,30d时,低剂量组和高剂量组乳酸菌含量均极显著高于对照组(P0.01);60d时,低剂量组乳酸菌含量显著高于对照组(P0.05)。试验结果提示,饲喂复合益生菌能调节奶牛肠道微生态环境,降低牛粪中氨气的产生,改善环境空气质量。     

EM制剂对牛粪中氨气释放及微生物含量的影响

试验旨在探讨微生态制剂EM对牛粪中氨气释放及微生物含量的影响。试验设0(对照组)、0.5%、1%和2%四个EM添加水平,将200g牛粪与不同比例EM制剂混匀后置于盖有胶塞的三角瓶中恒温培养5d,测定培养过程牛粪中氨气产生量及培养结束后培养体系中氨氮、全氮和常见微生物含量。结果表明,各处理组均未检测到氨气的产生;EM处理组氨氮含量明显降低,且全氮含量明显升高,其中2%EM处理组与对照组及0.5%EM处理组差异显著(P0.05);此外,2%EM处理组大肠杆菌含量显著低于对照组(P0.05),乳酸菌含量则显著高于对照组和0.5%EM处理组(P0.05)。试验显示,EM制剂能降低牛粪中氨氮浓度及氮损失,调节微生态环境,从而减少氨的释放,改善畜舍空气质量。     

基于CRISPR/Cas9系统分析草地贪夜蛾Wnt1基因的生物学功能

为明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda中Wnt1基因的生物学功能,采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术检测草地贪夜蛾胚胎发育期Wnt1基因的表达谱,利用CRISPR/Cas9系统对Wnt1基因进行定向敲除,并通过qPCR技术检测草地贪夜蛾Wnt1基因缺失突变体中与昆虫发育相关基因的表达水平。结果显示,Wnt1基因在草地贪夜蛾整个胚胎发育期均有表达,在胚胎发育早期（6 h）表达水平最高。将SfWnt1-sgRNA和Cas9蛋白混合注入草地贪夜蛾卵中,胚胎死亡率明显升高,同时获得了Wnt1基因缺失的草地贪夜蛾突变体。突变率与注射浓度相关,注射浓度越高,突变率越高;当SfWnt1-sgRNA和Cas9蛋白混合后终浓度均为300 ng/μL时,注射的724粒卵中获得体节缺陷突变体52头,附肢缺陷突变体64头,组织特化突变体20头;SfWnt1-sg RNA和Cas9蛋白混合后终浓度均为100 ng/μL时,注射的413粒卵中最终获得体节缺陷突变体14头,附肢缺陷突变体22头,组织特化突变体7头;这些突变体均无法存活至化...