切花非洲菊多倍体诱变初报

 以非洲菊‘阳光海岸’和‘白马王子’ (2n=2x=50) 品种为供试材料, 采用秋水仙素对其组培丛生芽进行离体诱导, 成功获得了四倍体植株。秋水仙素处理浓度和处理时间分别为0.02%、0.05%、0.10%和24、36、48 h。试验结果表明, 以0.10%的秋水仙素处理48 h诱导效果最佳, ‘阳光海岸’和‘白马王子’的丛生芽变异率分别为16%和10%。总体上看, 非洲菊对秋水仙素的敏感性较低。经气孔鉴定、染色体计数和形态学观察, 变异材料染色体数加倍(2n=4x=100) 。与二倍体相比, 变异材料气孔面积增大, 花序变大, 叶色变深, 叶尖变钝圆, 叶片质感变厚, 花梗直径变粗, 花梗基部花青素着色变深。最终分别获得稳定的‘阳光海岸’和‘白马王子’多倍体植株200余株和300余株。     

农杆枪法基因遗传转化技术初报

为提高遗传转化的效率,克服受体范围的限制,采用农杆枪法进行基因的遗传转化。根据已报导的VirD1和VirD2基因的序列设计特异引物,以农杆菌C58菌株的质粒为模板进行PCR扩增．对VirD1和VirD2基因进行克隆。将序列正确的VirD1和VirD2基因连接到植物表达载体PBI121启动子CaMV35S和终止子nos之间,构建VirDl和VirD2基因的表达载体pB-VirD1及pB-VirD2。经PCR及酶切鉴定,基因已成功构建到表达载体上,为农杆枪法进行目的基因转化的研究奠定了基础。     

香石竹ACC氧化酶基因的克隆及其正义反义表达载体的构建

利用在Genebank上已报道的香石竹ACC氧化酶(ACO)基因的CDNA序列设计特异引物,以香石竹品种'MASTER'的eDNA为模板进行PCR扩增,克隆香石竹ACC氧化酶(AC0)基因.测序结果显示,克隆基因的序列与报道序列完全一致.将克隆的ACC氧化酶(AC0)基因分别连接到植物表达载体PBI121启动子CaMV 35S的上游及下游,构建香石竹ACC氧化酶(Aco)基因的正义表达栽体PBI121-ACO及反义表达载体PBI121-anti ACO.经PCR鉴定,基因已成功构建到表达裁体上.为香石竹抗衰老基因工程育种奠定了基础.     

云南箭竹3种变型的叶解剖结构与生理特性

为探明云南箭竹不同变异类型的叶解剖结构与生理特性,选择云南箭竹3种变型(云南箭竹原变型、“香笋竹”“脱毛昆明实心竹”)的叶片为实验材料,采用石蜡切片技术观察叶片解剖结构,利用苯酚硫酸比色法测定相关生理指标及其光合参数。结果表明,3种变型的竹叶,在叶长、叶宽、长宽比及叶面积等方面差异显著,“香笋竹”的叶片更宽、更大;在叶片表皮层、角质层厚度、泡状细胞复合体和梭形细胞面积、维管束面积和叶脉间距离、气孔密度等方面,均表现为“香笋竹”>原变型>“脱毛昆明实心竹”;叶净光合速率和蒸腾速率中,“香笋竹”要显著高于原变型和“脱毛昆明实心竹”;在竹叶可溶性糖含量和淀粉含量方面,表现为“香笋竹”>原变型>“脱毛昆明实心竹”。云南箭竹3种变型的竹叶,在叶解剖指标上差异显著,其叶片的形态和解剖结构特征在讨论种下分类阶元水平上具有一定的分类价值。3种云南箭竹变型中,鉴于“香笋竹”的光合能力和抗逆性较强,更适合推广种植。     

利用卡那霉素筛选非洲菊转基因植株的技术研究

为了能够更高效地得到非洲菊转基因植株,将非洲菊的植株接种于含有不同浓度卡那霉素的分化培养基中,当卡那霉素浓度达到25 mg/L时,外植体的生长分化完全受抑制,苗白化.将非洲菊通过愈伤组织诱导,农杆菌介导得到转基因植株,把共培养3 d的外植体进行3种不同处理.结果表明,处理3较好,即先在培养基中直接加羧苄霉素不加卡那霉素,待苗长势较佳时,再用卡那霉素筛选,PCR检测,得到7棵阳性植株,再生率为43.75 %.既保证了芽诱导苗的成活率,又节省了大量提取DNA的时间和贵重药品的使用量.     

利用卡那霉素筛选非洲菊转基因植株的技术研究

为了能够更高效地得到非洲菊转基因植株,将非洲菊的植株接种于含有不同浓度卡那霉素的分化培养基中。当卡那霉素浓度达到25mg／L时,外植体的生长分化完全受抑制,苗白化。将非洲菊通过愈伤组织诱导,农杆菌介导得到转基因植株,把共培养3d的外植体进行3种不同处理。结果表明,处理3较好,即先在培养基中直接加羧苄霉素不加卡那霉素,待苗长势较佳时,再用卡那霉素筛选,PCR检测,得到7棵阳性植株,再生率为43．75％。既保证了芽诱导苗的成活率,又节省了大量提取DNA的时间和贵重药品的使用量。     

菜豆几丁质酶、烟草葡聚糖酶基因的分离克隆及双价表达载体的构建*

 几丁质酶基因（Chitinase,Chi）和葡聚糖酶基因（β-1,3-glucanase,Glu）具有协同抗真菌作用,根据GenBank号M13968,X53600分别设计引物,经RT PCR扩增,克隆菜豆Chi基因和烟草Glu基因, 将两个目的基因分别连上CaMV 35S启动子和终止子Nos,然后串联在一起共同组建于一个表达载体pBI121中,重组表达质粒经过限制性酶切分析鉴定,结果表明含有双价抗真菌基因的植物重组表达载体已构建成功。为非洲菊、香石竹等花卉抗真菌基因工程育种奠定了基础。     

菜豆几丁质酶、烟草葡聚糖酶基因的分离克隆及双价表达载体的构建

几丁质酶基因(Chitinase,Chi)和葡聚糖酶基因(β-1,3-glucanase,Glu)具有协同抗真菌作用,根据GenBank号M13968,X53600分别设计引物,经RT-PCR扩增,克隆菜豆Chi基因和烟草Glu基因,将两个目的基因分别连上CaMV35S启动子和终止子Nos,然后串联在一起共同组建于一个表达载体pBI121中,重组表达质粒经过限制性酶切分析鉴定,结果表明含有双价抗真菌基因的植物重组表达载体已构建成功。为非洲菊、香石竹等花卉抗真菌基因工程育种奠定了基础。     

农杆枪法基因遗传转化技术初报

为提高遗传转化的效率,克服受体范围的限制,采用农杆枪法进行基因的遗传转化.根据已报导的VirD1和VirD2基因的序列设计特异引物,以农杆菌C58菌株的质粒为模板进行PCR扩增,对VirD1和VirD2基因进行克隆.将序列正确的VirD1和VirD2基因连接到植物表达栽体PBI121启动子CaMV 35S和终止子nos之间,构建VirD1和VirD2基因的表达载体pB-VirD1及pB-VirD2.经PCR及酶切鉴定,基因已成功构建到表达载体上,为农杆枪法进行目的基因转化的研究奠定了基础.     

秋菜花高产高效栽培技术

近年来,故城县农民利用麦茬地种植秋菜花面积已发展到2000多亩,亩产250-3000公斤,亩收入2000多元。产品销往周边大中城市,农民收入显著提高,为了提高秋菜花的市场占有率,实现高产高效,现将秋菜花栽培技术介绍如下：