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猪繁殖-呼吸综合征病毒上海株的分离鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
从上海地区5个发病猪场的病料中,分离到3株致Marc-145细胞病变的病毒:SH1、SH2和SH3,理化特性研究表明,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热(56℃)、酸(pH6以下)、碱(pH8以上)敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形粒子为主,囊膜上有纤突,直径为60 ̄100nm;超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为45 ̄80nm。间接免疫荧光试验表明,3株分离毒均与PRRSV高免血清呈强阳性反应,而与HCV、PPV、PRV、TGEV高免血清的反应均呈阴性。综上可见,所分离的病毒为PRRSV。 相似文献
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运用随机扩增多态性和质粒指纹图谱法进行大肠杆菌O157的分子多态性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为了解大肠杆菌O157分离菌株的分子特征,建立了随机扩增多态性和质粒指纹图谱2种分型方法,对10株从粪便和动物组织分离的大肠杆菌O157进行了分型研究,结合主要毒力基因的检测和药敏试验,以进一步验证分离菌株之间的亲缘关系.随机扩增多态性分析分别在遗传距离为0.89、0.973处将所有细菌分类:其中有2株菌株具有相似的扩增图谱,可以聚为同一类,亲缘关系较近,其余8株细菌类聚为两大类.质粒图谱分析在不同的进化距离处将所有细菌分类,形成具有复杂分枝的树状图.毒力因子检测结果显示:10株分离菌株均含有hly、eae、uid、flich7基因.药敏试验幸明:其中2株细菌具有不同于其他8株细菌的耐药谱,与随机扩增多态性分析和质粒图谱分析相一致.比较随机扩增多态性和质粒指纹图谱2种分型方法发现:它们虽具有相似的结果,但质粒图谱法分析更能反映出菌株之间的亲缘关系. 相似文献
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从两例突然死亡的鹿科动物中都分离到大肠杆菌和变形杆菌,其中变形杆菌为奇异变形杆菌和普通变形杆菌2个种.奇异变形杆菌的毒力很强,且对多种药物不敏感.通过病原分离与鉴定以及毒力试验,结合病理剖检,证实这两例鹿科动物出血性肠炎的病原是大肠杆菌和变形杆菌. 相似文献
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采用自制的抗伏马毒素B1(FB1)多克隆抗体,建立定量检测玉米中FB1的化学发光间接竞争ELISA方法。通过化学偶联分别获得免疫抗原钥孔血蓝蛋白(KLH)-FB1和包被抗原卵清蛋白(OVA)-FB1。用KLH-FB1免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。以OVA-FB1为包被抗原,FB1为竞争抗原,建立检测FB1的间接竞争化学发光ELISA方法,并对该方法进行了条件优化。该方法对FB1标品进行检测,得到回归方程为Y=0.602 5-0.370 7 X,相关系数R2为0.986 2,检测限为0.14ng/mL,线性关系良好的检测范围为0.14~33.3ng/mL,玉米样品加标回收率83.5%~102%。表明建立的化学发光ELISA法敏感性好、特异性高,能用于玉米中FB1毒素的检测。 相似文献
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大肠杆菌VT噬菌体受体基因重组质粒的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
取含有卡那霉素抗性(Kan^R)基因的自杀性质粒pJP55603和含vpr全长基因的pUC19phiΦRID质粒,分别采用粘性末端及平末端两种连接法,2种质粒Hinc II单酶切后进行平末端连接,经鉴定未得到重组质粒,pJP5603用Hinc II和Xma I消化,回收3kb的载体质粒,pUC19ΦRID用Hinc Ⅱ和Age I消化,回收778bp vpr目的基因,通过粘性末端连接,转化到感受态细菌CC118λpir,利用Kan^R进行筛选,获得的克隆经Acc I酶切鉴定和PCR检测,确定得到重质粒,即pYYvpr,将重组质粒的DNA转化到含有全长vpr基因的感受态细胞MC1061,筛选到的克隆经PCR检测,得到一株克隆既扩增出vpr基因,又扩增出Kan^R基因,初步鉴定该克隆为MC1061的vpr同源基因突变株,暂定名为MC1061Δvpr,从而为研究vpr基因的功能提供了重要的试验材料。 相似文献
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本试验通过筛选抗原性较好的多杀性巴氏杆菌,经禽胚培养增殖细菌,灭活后加入免疫增强剂左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E,制成油乳剂强化苗。试验表明,每头份含抗原量100亿,左旋咪唑和亚硒酸钠维生素E合用组免疫效果最佳。注射本苗后,鸡群第4天产生免疫应答,第7天即可产生坚强的免疫力,试管凝集抗体效价达到1:86,攻毒保护率达83.3%,第14天即可达100%,免疫期6个月。免疫期内攻毒保护率为97.6%,当试管凝集抗体效价为1:40时,80%的试验鸡能抵御C_(48-1)的攻击。临床上免疫接种4个鸡场12批商品蛋鸡共14.5万羽,有效地控制了该病的流行。 相似文献
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末端酶(terminase)是dsDNA病毒包装过程中的必要功能蛋白,其大亚基单位在包装过程中往往行使全酶的作用,一般具有ATP酶活性和限制性内切酶活性。噬菌体SMP是猪链球菌2型的烈性噬菌体,本研究以SMP基因组为模板,扩增SMP末端酶大亚基单位基因(TlsSMP),构建pEASY-E1-Tls重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达,并对TlsSMP融合蛋白进行活性检测。结果显示,末端酶大亚基单位在大肠杆菌中呈可溶性表达,具有ATP酶生物学活性,在pH7、23℃和Mg2+存在的条件下,其活性最强,其他金属离子如Ca2+、Mn2+和Co2+都对其有不同程度的抑制作用。本研究为进一步研究猪链球菌噬菌体的包装机制奠定基础。 相似文献
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本试验利用猪的繁殖与呼吸综合征病毒美洲株和上海分离株 S H1 建立了 I F、 I P M A 和 Dot - E L I S A三种抗体检测方法, 对120 份随机抽样猪血清检测表明, 美洲株抗原组 I F A 的阳性率为30 .8 % 、 I P M A 的阳性率为30 % 、 Dot - E L I S A 的阳性率为32 .5 % , S H1 分离株抗原组 I F A 的阳性率为37 .5 % 、 I P M A 阳性率为37 .5 % 、 Dot - E L I S A 的阳性率为40 % 。进口 E L I S A 试剂盒的检测阳性率为26 .7 % 。 相似文献