激活素A和胰岛素样生长因子-I对冷冻保存后小鼠腔前卵泡体外培养的影响

为了探讨激活素A和胰岛素样生长因子-I对冷冻保存后小鼠腔前卵泡体外发育的影响,试验分别在培养液中加入激活素A和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对小鼠腔前卵泡进行体外培养.结果表明:激活素A组和激活素A+IGF-I组的成活率显著高于未添加因子的冷冻对照组和IGF-I组(P<0.05);激活素A组、IGF-I组、激活素A...     

腺病毒介导的神经生长因子对小鼠宫颈癌的作用

为观察腺病毒介导的神经生长因子对宫颈癌小鼠的作用效果,采用U14细胞注射建立宫颈癌小鼠模型,腺病毒介导的人神经生长因子瘤周注射2次,每周1次。结果表明,体外试验表明腺病毒介导的神经生长因子对癌细胞有一定的抑制作用,能引起细胞凋亡。体内试验表明腺病毒介导的神经生长因子的用量低于1×107PFU时,对宫颈癌的抑制率和免疫器官指数的影响均呈线性升高趋势;在用量为1×107PFU时,抑瘤率最高,达到50.89%;而当腺病毒介导的神经生长因子用量达到1×108PFU时,抑瘤率降低为-0.13%。     

成年兔睾丸支持细胞的分离纯化

简化睾丸支持细胞的分离纯化方法,提高支持细胞的获取量和活率。取5月龄公兔,去除睾丸被膜及血管,分离出完整的曲精细管后用0.5%胰蛋白酶和0.1%胶原酶消化并进行低渗处理,将制成的细胞悬液植入25cm2的培养瓶,于38.7℃5%CO2条件下培养,此期间每天用倒置显微镜进行观察。结果表明,经1/3组低渗处理后,离体支持纯度和活率分别达到72.04%和84.5%(P<0.05),极大地提高了离体支持细胞的获取量和活率。     

成年兔睾丸支持细胞的分离纯化研究

本试验以5月龄公兔为试验动物,去除睾丸被膜及血管,分离出完整的曲精细管后 用0．5％胰蛋白酶和0．1％胶原酶消化并进行低渗处理,将制成的细胞悬液植入25 cm2的培 养瓶,于38．7℃、5％CO2条件下培养,结果表明:经1:3Hanks超纯水低渗处理后,离体支持 细胞纯度和活率分别达到72．04％和84．5％,显著提高了离体支持细胞的获取量和活率。     

麝研究现状与展望

麝是我国珍贵的药用野生动物资源 ,保护和利用好我国的麝资源 ,进行科学人工养殖 ,实现麝资源可持续利用是一条利国利民的正确道路。本文就 40年来有关麝在驯化饲养、食性、生态习性、繁殖、疾病防治等方面的研究历史及现状作一评述 ,并对麝的人工繁育方面提出自己的见解 ,期望对我国麝类研究的进一步深入有所启示     

人乳铁蛋白腺病毒载体的构建及细胞表达

将人乳铁蛋白基因与腺病毒基因组骨架质粒重组,在293细胞中包装重组腺病毒颗粒,获得真核细胞表达的栽体pAd-hLTF.以pcDNA3X为模板,PCR扩增hLTF基因,腺病毒穿梭栽体pshuttle-cmv与hLTF重组为pshuttle-cmv-hLTF:再与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组为pAd-hLTF质粒:脂质体法将重组pAd-hLTF质粒转染HEK 293细胞.包装成重组腺病毒颗粒.Western blot和ELISA法测定细胞中hLTF基因的表达.结果表明,pAd-hLTT质粒转染293细胞后,7～10 d后,获得细胞裂解液,将细胞裂解产物再次接种新鲜的293细胞,3～5 d后,80%以上的细胞变圆、膨胀、漂浮.Westem blot和ELISA结果显示,上清液中有hLTF基因的表达,为重组人乳铁蛋白的体外表达及其功能分析奠定了基础.     

林麝生殖生理和繁殖性能观察研究

在上海新杨养麝实验场,对1998～2003年饲养繁殖的林麝进行繁殖生理和繁殖性能的观察研究。结果表明,人工饲养条件下,林麝15～18月龄可达性成熟,性成熟时体重5～6kg,雌性性成熟比雄性早1～2个月;30～36月龄时可达体成熟,成龄林麝体重7～8kg。雌雄林麝繁殖特点均具有明显季节性,每年9月下旬开始发情,至次年3月下旬后逐渐进入休情期,雄林麝繁殖季节略早于雌林麝;雌林麝1个发情周期为18～23d,发情持续期32～48h,1年1胎,每胎1～3仔,妊娠期为178～183d,饲养林麝年平均繁殖率为152.05%,年断乳仔麝平均成活率为74.04%。     

重组人神经生长因子β腺病毒的构建及鉴定

[目的]克隆带有His标签的人神经生长因子β基因(human nerve growth factor beta,hNGF"β),并构建hNGF"β与EGFP基因复制缺陷型腺病毒载体,为hNGF蛋白的表达、纯化及对其进行神经损伤的应用研究奠定基础。[方法]用Trizol试剂提取人胎肝总RNA,应用RT-PCR方法以自行设计的带有His标签的引物来扩增NGF"β基因;将所扩增的NGF"β基因经酶切、纯化,与IRES-EGFP片段共同插入到Pshuttle-cmv载体中,测序后,利用基因同源重组技术构建hNGF基因的复制缺陷型腺病毒载体AdNGF"β,经鉴定,转染HEK293细胞,观察EGFP表达并检测重组腺病毒的病毒滴度。[结果]克隆的hNGF基因序列与GenBank中的hNGF基因序列完全一致并在3′端携带上His标签;重组腺病毒载体AdNGF-β经PacⅠ酶切得到大于23.0和4.5或2.9kb大小的2个片段,表明同源重组成功。2种重组腺病毒经脂质体介导转染293细胞后,均可观察到绿色荧光蛋白。收获病毒并测定感染滴度分别为1.00×109和0.99×109pfu/ml。[结论]克隆了带有His标签的hNGF"β基因,并成功构建了重组腺病毒载体,为hNGF蛋白的表达、纯化及对其进行神经损伤研究奠定基础。     

猪卵母细胞冷冻损伤的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精、核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径。在此,综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理及冷冻保存对卵母细胞超微结构和发育潜力的影响,以期为猪卵母细胞的冷冻保存研究提供一定的理论参考,从而提高猪卵母细胞冷冻后的成活率和体外受精生产效率。