提高雏鸡成活率的有效措施

由于许多养鸡者缺乏科学知识,在雏鸡培育过程中饲养管理不善、消毒防疫不当,造成雏鸡的死亡率过高.因此,做好雏鸡开饮开食,有效控制温湿度、饲养密度、光照时间,适宜通风换气,控制舍内空气质量,可明显提高雏鸡成活率.     

HIV VRC01单链抗体的构建、原核表达及纯化

【目的】合成、克隆HIV单克降抗体VRC01的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达并进行纯化。【方法】根据GenBank上公布的VRC01抗体可变区的氨基酸序列合成引物,运用基因从头合成和重叠延伸PCR方法,克隆抗体VRC01的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因;用15肽Linker(Gly4Ser)3将VH和VL基因相连,得到单链抗体基因scFv-VH-Linker-VL和scFv-VL-Linker-VH,并分别将两者克隆到原核表达载体pET28a中,构建重组质粒后转入大肠杆菌BL21(DE3+)中诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;将重组蛋白进行变性处理后,利用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达产物进行初步纯化。【结果】得到了VRC01的2种单链抗体的基因scFv-VH-Linker-VL和scFv-VL-Linker-VH,其大小分别为770和768bp。SDS-PAGE电泳结果显示,scFv-VH-Linker-VL在大肠杆菌中不表达或表达量极低;而scFv-VL-Linker-VH表达量较高,蛋白质分子质量约为29ku,且主要以包涵体形式存在。Western blot检测结果证实,scFv-VL-Linker-VH可与His-Tag融合表达,并通过亲和层析法成功纯化获得了该单链抗体。【结论】成功构建、表达并纯化出了VRC01单链抗体,为进一步研究VRC01单链抗体的生物学特性奠定了基础。     

百草枯水剂防除苹果园杂草药效试验

百草枯水剂防除苹果园藜、稗草、扁蓿等田间杂草,除草效果随药剂用量增加而增加,以500g／667m^2防除效果最好,其次为300g／667m^2、人工除草、250g／667m^2、225g／667m^2（对照药剂）、200g／667m^2。但从保护环境、经济合理施用农药的角度讲,225g／667mg--300g／667m^2最为经济。     

栽培猴头菇出现畸形的原因及预防

1光秃无刺菇 1.1症状表现.菇体呈簇状分枝,个肥大,表面皱缩粗糙,无刺毛,肉质松脆,略黄色或褐色,香味正常. 1.2发生原因.主要是温度偏高,湿度偏低,常在25℃情况下子实体蒸发量过大,而湿度又没及时跟上,就不长刺毛则形成光秃菇.     

混合型鸡痘的治疗

一、发病情况２００２年８月１６日，广宗县南街吕某饲养的１０００只蛋鸡，按常规饲养，并免疫了马立克、新城疫、法氏囊病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎，但未进行鸡痘疫苗接种。饲养到４５日龄时，鸡群开始有个别鸡出现喷嚏，咳嗽甩头，张嘴，流眼泪，呼吸时有杂音，在晚上安静时较明显。以后，病鸡逐渐增多，并在鸡冠、肉垂，爪等处出现丘疹及结痂，到８月２３日，发病率升到３０％，且每天死亡由几只增到３０只左右。曾用蒽诺沙星、土霉素、红霉素、喉管散等药物治疗，均无疗效。后到我院诊治。经剖检、化验，确诊为混合性鸡痘，通…     

维生素抗冷应激的作用机制

在寒冷气候条件下,动物容易产生冷应激反应,导致其生产性能、繁殖性能、饲料消化率、免疫功能及抗氧化功能等下降,增加饲养成本,降低养殖业的经济效益。维生素具有免疫促进与抗氧化作用,能提高动物的免疫功能与抗氧化功能,调节动物自身的防御机能,改善冷应激下动物的抗氧化功能及肉品质量,提高抗应激能力,减轻冷应激的危害,使动物处于良好的生理状态,发挥最大的生产潜能。     

水稻全程机械化栽培技术研究

通过试验研究与示范,水稻全程机械化作业比常规栽培增产48kg／667m^2,节本增效168．7元／667m^2,工作效率提高30倍,整精米率达68％,空秕率仅为3．9％,可起到增产、增效、提高水稻品质的目的。     

重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究

从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因.经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204 bp,编码68个氨基酸残基.根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树.发现鸡AvBD6氨基酸序列与鸡AvBD7氨基酸序列同源性最高,为62.7%.将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,进行原核表达.SDS-PAGE电泳表明,表达的重组鸡AvBD6融合蛋白分子量约为32 ku.对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定.结果表明,重组鸡AvBD6融合蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌的抗菌活性较弱,对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性.重组鸡AvBD6蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度范围为31.25μg/mL～250 μg/mL.此外,重组鸡AvBD6蛋白对温度和酸碱度有较高的稳定性.     

鸭β-防御素2基因的克隆、表达和表达产物的生物学特性分析

 【目的】从鸭组织中克隆鸭β-防御素（AvBD）2基因,在大肠杆菌中高效表达,检测重组鸭AvBD2蛋白的生物学特性。【方法】应用RT-PCR技术从鸭胰腺组织中扩增鸭AvBD2基因,根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-2的氨基酸序列构建系统进化树,将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对该重组蛋白进行纯化,测定体外抗菌活性与理化特性。【结果】鸭胰腺组织中克隆出鸭AvBD2基因的cDNA大小为195 bp,编码64个氨基酸。同源性分析表明,鸭AvBD2与其它物种AvBD2同源性较高。凝胶电泳结果显示重组鸭AvBD2蛋白在原核高效表达（分子量约为32 kD）,对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌与猪霍乱沙门氏菌的抗菌活性较弱。重组鸭AvBD2蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度为15.25～125 μg?ml-1,对猪霍乱沙门氏菌最小抑菌浓度大于400 μg?ml-1。重组鸭AvBD2蛋白在-20～100℃或pH 3～12条件下处理30 min后仍有抗金黄色葡萄球菌作用。【结论】克隆并表达了鸭AvBD2基因,表达产物具有抗菌活性,对温度和酸碱度有较高的稳定性。     

基于TDLAS技术测定水稻种子呼吸的初步研究

对水稻种子呼吸产生的CO₂进行实时检测,探究水稻种子呼吸强度与各项活力指标的相关性,为通过呼吸强度测量进行种子活力的无损检测提供实验依据。利用自主设计的基于可调谐二极管激光吸收光谱(TDLAS)技术的种子呼吸检测系统,实时检测种子呼吸产生CO₂气体浓度的变化。选取梦两优黄莉占不同收获期的水稻种子,每个收获期的种子分成2份,一份进行发芽试验获取种子活力指标,另外一份经过消毒、浸泡等预处理后,放入种子呼吸容器中在密闭环境下进行呼吸强度检测。每次连续检测约10 h,每组样本重复测量3次取平均值。水稻种子分别经过0、12、24、36、48 h的浸泡,发现在一定浸泡时间内种子呼吸强度随着浸泡时间的增加而增强。在连续10 h检测后,呼吸强度最高的浸泡时间段是36 h,CO₂气体浓度达到10 151 mg·m^-3,未浸泡的干种子呼吸强度最弱,CO₂气体浓度为388 mg·m^-3;水稻种子呼吸强度与发芽率、发芽势、发芽指数、淹水3 d发芽率、田间出苗率均具有一定的相关性,相关指数最高可达到0.97、0.96、0.97、0.77及0.65。研究表明,梦两优黄莉占水稻种子在浸泡36 h左右可以达到较高的呼吸强度,呼吸强度随着呼吸时间的增加呈现先增长后趋缓状态,种子的呼吸强度与各项活力指标均呈现较高的正相关性。