基于转基因产品成分低水平混杂问题探究我国转基因阈值制度

随着全球经济贸易一体化发展,转基因产品商业化为多边国际贸易带来无限的机遇和挑战。随之而来的转基因低水平混杂（LLP）问题作为不可规避的现实问题,成为国际贸易中的前沿议题。转基因阈值制度作为国际社会缓解转基因低水平混杂问题的重要因素,逐渐引起各国政府关注。以转基因低水平混杂问题现状为立足点,从技术和政策层面分析了建立转基因阈值制度对于我国完善转基因低水平混杂法律制度及配套长效机制的必要性,从标识制度和LLP阈值制度两个角度概述了转基因阈值制度在维护本国生物安全和贸易顺畅等方面的双重作用,旨在为我国完善转基因低水平混杂法律制度和开展定量检测标准制定工作提供参考。     

一种测定转基因作物中CaMV35S启动子甲基化水平的方法

来源于花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus)的CaMV35S启动子是目前商业化转基因作物中最常用的启动子,对其甲基化水平的测定是研究转基因沉默的重要内容之一。本研究通过甲基化敏感内切酶HpyCH4Ⅳ酶切和实时荧光定量PCR扩增技术,建立了CaMV35S启动子甲基化水平的快速测定方法。利用建立的方法分析了我国安徽省2017年市场的棉花(Gossypium hirsutum)种子,发现部分种子中CaMV35S启动子甲基化处于较高水平。本研究为实现转基因材料中CaMV35S启动子甲基化的快速高通量筛查提供了检测方法。基于相同的原理也可以建立其他转基因元件和DNA序列甲基化水平的快速检测方法。     

环介导等温扩增技术在转基因作物成分检测中的应用

转基因作物成分检测为农业转基因生物安全管理提供了重要技术支撑。环介导等温扩增（Loop-mediat⁃ ed isothermal amplification，LAMP）技术操作简便、灵敏度高、特异性强，在转基因作物成分检测中得到了广泛应用。 本文针对近年来LAMP技术在转基因大豆、玉米和油菜成分检测中的应用情况进行了分析和总结，以期为LAMP技 术在转基因作物成分检测中的应用和标准化提供科学参考。     

转cry1Aa基因抗虫棉整合结构解析及转化体特异性检测方法的建立

【目的】cry1Aa基因是2011年本实验室在我国棉花商品种子中发现的1种未经批准的转基因成分,本研究旨在通过整合结构解析,建立特异性检测方法,对市售棉种进行初测,明确该外源基因在我国棉种中的存在情况。【方法】通过Genome walking、长链PCR分离获得了转cry1Aa基因棉花转化体(定名为NN6转化体,简称NN6)的外源基因整合结构,同时基于插入位点基因组及外源DNA连接区,建立了NN6转化体特异性的定性聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法和实时荧光定量PCR方法。【结果】NN6整合结构主要包括cry1Aa、aad和Npt II基因,插入棉花基因组7号染色体37 169 450位,产生91 bp基因组缺失;所构建的定性PCR检测方法能特异、快速地对棉花单株和种子单粒中NN6转化体的纯/杂合状态进行鉴定,实时荧光定量PCR检测限为44拷贝,能满足国内外对转基因标识的需要;对含有cry1Aa基因的3个市售棉种进行检测,其纯合度分别为1.51%,5.21%和21.09%。【结论】本研究解析了NN6的整合结构,并建立特异性检测方法,为我国转基因棉花新品种选育及转基因安全管理提供技术手段。