转G10eve基因高抗草甘膦棉花的农艺性状分析

为培育高抗草甘膦棉花,本研究以转G10eve基因棉花为试验材料,通过室内鉴定结合大田试验,筛选高抗、稳定遗传的转基因株系。结果表明,幼苗期喷施不同浓度草甘膦,转基因株系L91抗性水平高于L152,抗性表现稳定,且根、茎、叶间莽草酸积累量差异明显,在叶片中相对含量最高。不同浓度草甘膦处理后,内源EPSPS基因相对表达量呈先升高后降低的趋势,在受体Coker 312中基因相对表达量显著高于转基因株系,表明转G10eve基因可以提高棉花的草甘膦抗性水平。大田试验表明,L91和商业化品种AuR可耐受20 mL·L~(-1)草甘膦。幼苗期喷施草甘膦后,L91株系的株高、果枝数、有效铃数相对于未喷施条件下(对照组)有所增加;AuR的各农艺性状指标与对照组差异不显著;花期喷施不高于20mL·L~(-1)草甘膦,L91和AuR棉花的株高、果枝数、有效铃数均未受抑制,表明,L91株系能够满足生产要求。本研究鉴定筛选得到高抗草甘膦L91转基因株系,为培育抗除草剂棉花新品种提供了种质资源。     

转G10eve基因棉花的获得及草甘膦抗性初探

【目的】为培育高抗草甘膦棉花新品种提供种质材料。【方法】对草甘膦抗性基因G10eve进行生物信息学分析,利用农杆菌介导的方式将G10eve导入到珂字棉312中。利用PCR(Polymerase chain reaction)、qRT-PCR(Quantitative real-time PCR)方法分析G10eve的表达情况。对受体及转基因植株进行草甘膦喷施实验,测定其莽草酸含量,分析其抗性水平。【结果】最终获得28个独立的转基因阳性系,转化率及幼苗分化率分别高达49.3%、40.6%。PCR及qRT-PCR检测证明外源G10eve基因已经整合到棉花基因组中,且在不同转基因株系间表达量差异显著。在子叶期,转基因植株可耐受8 mL·L~(-1)浓度的草甘膦,而非转基因对照在2 mL·L~(-1)浓度草甘膦处理下已出现药害。草甘膦处理前后,转基因植株叶片莽草酸含量未出现明显积累,进一步说明其具有草甘膦抗性。【结论】过量表达G10eve基因能够提高受体材料对草甘膦的抗性,获得了高抗草甘膦的棉花株系。     

基因枪介导的冬小麦临汾5064遗传转化体系构建

以中国小麦优质骨干亲本临汾5064幼胚为试验材料，对诱导、分化、生根培养基中的激素浓度和基因枪轰击压力等关键参数进行对比分析，旨在总结出临汾5064的最适遗传转化体系，为山西小麦育种提供技术平台。结果表明，临汾5064幼胚在3种激素浓度的诱导培养基中均可形成愈伤组织。其中，在含2.0 mg/L 2,4-D的诱导培养基中，参试幼胚具有最高的出愈率（83.0%）。临汾5064愈伤组织在4种激素浓度的分化培养基中均有再生芽产生，当分化培养基包含0.2 mg/L 2,4-D和0.2 mg/L 6-BA时，愈伤组织具有最高的分化率（70.0%）。临汾5064分化愈伤组织在4种激素浓度的生根培养基中均有根生成，当生根培养基包含0.1 mg/L 2,4-D且不添加6-BA时，分化愈伤组织具有最多的生根率（77.5%），并且形成较多数目的根。利用上述优化激素浓度的培养基对临汾5064幼胚开展基因枪介导的遗传转化，在轰击步骤设置3个压力处理组分别导入测试质粒。结果显示，在900 psi轰击压力下获得192株再生植株，再生植株获得率为28.3%，其中有4株成功扩增出目标条带，具有最高的遗传转化率（0.50...