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【目的】从富士苹果幼果果实中克隆多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因,并进行原核表达,为进一步研究PGIP的生物学功能奠定基础。【方法】根据Genbank中已经发表的苹果PGIP基因序列设计引物,采用RT-PCR从苹果果实中扩增PGIP基因cDNA,回收目的基因片段并连接到pMD18-T载体,鉴定后进行测序。然后将PGIP全长cDNA和去信号肽的cDNA导入到pET-32a(+)表达载体中,分别获得融合表达质粒pET-PGIP和pET-PGIP-X,将其分别转化大肠杆菌BL21感受态细胞,用不同终浓度IPTG进行诱导表达,收集表达产物并进行SDS-PAGE电泳。对pET-PGIP-X基因工程菌表达产物的可溶性进行检测。【结果】苹果PGIP cDNA序列长为1 091 bp,编码区为993 bp,可编码330个氨基酸残基,将其命名为MdPGIP;重组表达质粒pET-PGIP和pET-PGIP-X在宿主大肠杆菌中分别表达出分子质量约49.6和46.1 ku的融合蛋白,pET-PGIP-X表达产物以包涵体的形式存在。【结论】成功克隆了苹果PGIP基因,并在大肠杆菌中获得高效表达。 相似文献
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生长延缓剂对忍冬枝条生长和花蕾产量与品质的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究能否用抑制枝叶生长的方法提高花类药材的产量和品质,用不同浓度的3种植物生长延缓剂(矮壮素,缩节胺,烯效唑),在花前和开花初对忍冬植株进行喷施。结果表明:适宜浓度的生长延缓剂可以明显抑制忍冬枝条的生长而不影响花蕾的生长,还可以通过增强花芽分化,提高花蕾数量而提高加产量;其中以100和200 mg/L的缩节胺增产效果最佳,花蕾产量增幅达45%以上;150~200 mg/L的烯效唑也有较显著的效果;不同浓度的缩节胺处理可使花蕾中绿原酸和总黄酮含量增加,二者增幅最高可达14.3%和27.5%;其它两种延缓剂处理不能明显提高金银花品质。综合来看,100~150 mg/L的缩节胺对金银花的产量和品质提高效果最佳,说明通过适宜的处理控制忍冬枝条的生长以提高花蕾产量和质量是可行的。 相似文献
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