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传染性支气管炎病毒T株核衣壳蛋白(N)基因的克隆及部分序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
人工合成一双对应于IBV-Beaudette株N基因ORF两侧序列的引物,应用RT-PCR方法,获得肾型传染性支气管炎病毒Australia-T株核衣壳蛋白基因,长度1.23kb,利用引物设计中的EcoR I位点将其克隆至载体pSK(+)中,对该基因进行限制性酶切分析。结果与已报道的相一致。通过N基因的C端部分序列分析及与Beaudette株、M41标准株和日本分离株相比较,结果表明该部分的序列有 相似文献
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以日本血吸虫 mRNA 为模板,用 RT-PCR 法快速克隆到一大小约600bp 的 DNA 片段,DNA 序列分析证实,所扩增到的 DNA 片段中含有日本血吸虫22.6kD 膜相关蛋白(Sj-22.6(Ch))基因,将该基因重组到表达型质粒 pGEX-4T 中,表达的 GST 融合蛋白分子量约48kD,用谷胱甘肽琼脂塘凝胶亲和层析柱纯化的重组蛋白不仅纯度好,而且得率高,纯化产量可达40mg·L~(-1)培养物,免疫试验结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性,为其在血吸虫病抗感染中的免疫作用研究创造了条件. 相似文献
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沙门氏菌高分子量核DNA的提取蔡学忠,焦新安,刘慧谋,张如宽,刘秀梵(江苏农学院动物医学系,扬州225009)提取细菌核DNA常用的方法有:一种是裂解细菌、用等密度线性梯度超速离心的方法,另一种是以CTAB去除细菌多糖和蛋白质,用酚、氯仿进行抽提。但... 相似文献
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动物寄生虫病免疫预防的研究进展 总被引:4,自引:1,他引:3
动物寄生虫病的防治工作多年来以药物为主,在实际生产中确定产生了明显的效益,使得一些重大寄生虫病,如血吸虫病,牛羊肝片吸虫病球虫病等在一定程度上得到了控制。 相似文献
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为分析日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟表位,观察其免疫保护作用,利用SSj14单抗筛选富集噬菌体的随机六肽库,应用免疫印迹法确定阳性克隆并分析其核苷酸序列,采用竞争ELISA法分析阳性克隆的抗原性,用筛选的阳性噬菌体克隆免疫小鼠进行日本血吸虫病免疫保护试验,计算减虫效果,并用ELISA法检测小鼠免疫前后的特异性抗体水平。结果显示,经3轮富集筛选后,免疫印迹法鉴定到4个阳性克隆,它们对SSj14单抗的抑制率分别为20.0%、40.8%、58.6%、61.5%,并分别在小鼠中诱导了7.42%、9.43%、11.74%、22.30%的减虫率。用噬菌体克隆免疫的小鼠均产生了较高水平的特异性抗体。结果表明,筛选到的阳性噬菌体克隆和SSj14单抗有较高的亲和力,并诱导了抗小鼠日本血吸虫的部分保护效果。 相似文献