水牛SND1基因克隆及生物信息学分析

试验旨在利用电子克隆法对水牛SND1（staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1）基因进行克隆和序列分析，为探究该基因对水牛泌乳性能的作用机制奠定基础。以奶牛SND1基因（GenBank登录号：NM_205784.1）作为种子序列，利用Primer Premier 5.0设计3对引物，以水牛基因组DNA为模板，PCR扩增水牛SND1基因mRNA序列，扩增获得序列连接pMD18-T载体，通过测序拼接获得水牛SND1基因mRNA全序列，并对其进行生物信息学分析。结果显示，水牛SND1基因完整编码序列长为3 503 bp，包含长为2 733 bp CDS序列，编码910个氨基酸，蛋白分子式为C₄₅₂₃H₇₁₈₃N₁₂₈₁O₁₃₅₄S₂₆，分子质量为102.01 ku，理论等电点（pI）为6.74，不稳定系数为42.07，平均亲水性为-0.419，属可溶酸性蛋白。二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主，其中α-螺旋占37.80%，无规则卷曲占34.18%。结合Protfun 2.2在线软件对SND1的功能进行预测分析表明，该蛋白在嘌呤和嘧啶、中央中间代谢、能量代谢、氨基酸生物合成发挥功能的可能性分别为0.449、0.401、0.303和0.262。SND1基因编码区序列与黄牛、绵羊、山羊、猪、马、人的同源性分别为98.7%、97.8%、97.8%、93.8%、93.1%和91.7%，物种之间同源性较高，系统进化情况与其亲缘关系远近一致。利用SMART在线软件预测蛋白结构域，结果显示，水牛SND1蛋白包含有4个SN区域，说明SND1基因编码区在进化过程中较为保守。     

细粒棘球蚴GST-mu2基因的克隆、表达及重组蛋白反应原性研究

为了研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶mu 2(GST-mu 2)蛋白的反应原性,根据GenBank中Eg GST-mu2基因cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,测序验证后,将GST-mu2基因亚克隆至表达载体pET-28a中,构建pET-GST-mu2原核表达载体,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达蛋白进行反应原性分析。结果表明,GST-mu2cDNA全长660个核苷酸,编码219个氨基酸,该多肽含有2个N端酰基化位点,2个PKC磷酸化位点,3个CKⅡ磷酸化位点,1个TYR磷酸化位点,抗原表位区集中在28~70、147~219位;SDS-PAGE可以检测到32kDa的蛋白特异性条带;Western blot分析显示,表达的pET-GST-mu2重组蛋白能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有较强的反应原性,为进一步利用GST-mu2蛋白作为Eg感染诊断的候选抗原奠定了基础。     

高效氯氰菊酯对小鼠卵巢生殖功能的影响及维生素E的干预作用

为探究高效氯氰菊酯 (beta-cypermethrin, β-CP) 对雌性小鼠卵巢生殖功能的影响及维生素E (vitamin E, VE) 的干预作用，将雌性昆白小鼠随机分为6 组:空白对照组 (花生油处理)、β-CP不同剂量 (10、20、40 mg/kg) 处理组、VE保护组 (20 mg/kg β-CP+20 mg/kg VE) 和VE组 (20 mg/kg VE)，连续灌胃10 d。灌胃结束后取小鼠卵巢组织，观察组织结构的病理变化，采用免疫组化法、蛋白免疫印迹试验及RT-PCR方法检测卵巢中StAR蛋白含量及casp-3、casp-8、INHα和INHβB 基因mRNA表达的变化。结果显示:与对照相比，10、20和40 mg/kg的β-CP处理均使小鼠卵巢组织结构发生了损伤，使组织中StAR蛋白的浓度分别降低了18.8%、36.3%和40.3%，casp-3基因的表达分别升高了16.0%、26.7%和52.9%，INHα基因的表达分别升高了34.5%、83.6%和228.7%，INHβB基因的表达分别升高了7.5%、39.2%和52.7%；20和40 mg/kg的β-CP处理使得casp-8基因的表达分别升高了27.1%和36.7%。上述处理组与对照组的差异均达显著水平 (P＜0.05)。与 20 mg/kg β-CP处理组相比，VE 保护组的StAR蛋白含量也显著增多 (P＜0.05)。研究表明，β-CP对小鼠卵巢具有毒性作用，这与β-CP抑制StAR蛋白的合成，上调casp-3、casp-8、INHα及INHβB基因的表达有关；添加VE对小鼠卵巢有一定的保护作用，这与VE可减弱β-CP对StAR蛋白合成的抑制作用有关。     

工程教育认证背景下农业高校中工科专业实验教学示范中心建设研究

结合国际工程教育认证要求,以沈阳农业大学食品科学与工程实验教学中心为例,重点研究农业高校中的食品科学与工程类专业实验教学示范中心建设的指导思想、建设目标、实验教学内容调整、实验教学体系完善、工程人才培养方案改革等具体实施方法,为建设国家级实验教学示范中心进行探索与实践。     

毛木耳红油风味休闲即食食品杀菌防腐技术研究

毛木耳作为药食同源真菌,具有易栽培、产量高的优点,是我国食用菌产业发展的主要品种之一。课题组前期优化了毛木耳红油风味休闲即食食品加工工艺,本研究以开发的毛木耳红油风味休闲即食食品为原料,对其杀菌防腐技术进行研究,为毛木耳精深加工提供理论依据。结果表明,辐照防腐杀菌效果最好,但感官接收度低;化学防腐和生物防腐是毛木耳红油风味休闲即食食品防腐的首选方式,产品在常温下货架期为1年。     

6种杀菌剂对马铃薯早疫病菌的室内毒力测定

采用组织分离法对采自河北省、内蒙古和黑龙江省的马铃薯早疫病叶片进行分离,通过观察孢子形态确定得到菌株为茄链格孢(Alternaria solani).为了筛选出能够高效防治马铃薯早疫病的杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定6种杀菌剂对不同地区马铃薯早疫病菌的室内毒力.结果表明:6种药剂中抑菌效果较好的是80％代森锰锌WP和30％霜脲氰WG,EC50值范围分别为4.20～10.77 mg/L和3.02～17.45 mg/L;抑菌效果最差的药剂是72％百菌清SC,EC50值范围为550.91～1 888.40 mg/L.供试药剂对不同地区菌株间的毒力存在一定差异,针对不同地区菌株筛选毒力较强的药剂,对河北省围场地区菌株毒力较强的药剂为80％代森锰锌WP和30％霜脲氰WG;内蒙古地区为80％代森锰锌WP和30％霜脲氰WG;黑龙江省齐齐哈尔地区为80％代森锰锌WP和25％嘧菌酯SC.     

薄竹材缠绕技术与加工工艺

<正>我国是一个木材资源相对贫乏,竹材资源较丰富的国家~([1])。我国竹材工业经历了20多年的发展已取得积极成效,无论是产品种类、技术水平等方面均居世界领先水平~([2])。由于竹材生长速度快、成材早、产量高、强度高、弹性好、硬度大、加工容易,以及胶合后低毒甚至无毒的优良特点,因而被视为可以替代木材的工程材料的理想原料,一种良好的可持续发展资源。由于市场竞争激烈,原料价格大幅度上涨,因此,竹材资源的开发利用应向着深加工、精加