基于酵母双杂交技术的绒山羊波形蛋白互作蛋白鉴定

为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定。结果显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1 401 bp, ACTB基因CDS区序列的长度为1 128 bp;构建了酵母表达载体;试验组共转化pGBKT7-vimentin与pGADT7-ACTB的Y2HGold菌株在二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基和四缺板SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-GaL/AbA培养基上,均能生长出淡蓝色菌落,而在对照组共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基上长出白色菌落,表明共转化的pGBKT7-vimentin与pGADT-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac被激活,共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac未被激活。提示:vimentin与ACTB两种蛋白间存在相互作用。     

熔断器熔丝管辅助拉环技术

正1选题理由目前,电力系统中在电网计划检修或事故抢修中广泛涉及到对跌落式熔断器的操作。传统老式跌落式熔断器拉环安装在熔丝管的上端和下端,一般拉环的内径尺寸在4 cm,不同厂家的制作尺寸稍有差异,其设计大小刚好能够将绝缘拉杆(令克棒)的金属横头插入。使用时操作人员需要将几节拉杆丝扣旋转连接,再将绝缘棒高高举起,将横头对准孔的位置,插入拉环内行经拉合。基本操作原理如上所述,但是整个过程确是相当     

黄河中游严重水土流失区侵蚀物粒径钻探分析

通过对黄河中游严重水土流失区侵蚀物粒径钻探分析,发现在钻探范围内存在两个明显的粗泥沙产区,即皇甫川—佳芦河区间和大理河上游一带。产沙粒径变化总趋势是由西南向东北逐渐变粗,并以窟野河到皇甫川成倒“U”形区域内泥沙粒径最粗;无定河下游部分区域泥沙粒径较粗,但平均粒径和粗泥沙比例均小于上述两区。这一研究成果为进一步确定粗泥沙集中来源区奠定了基础。     

一种配电网钢绞线塑型器

<正>在配电线路施工作业中普遍涉及到水泥电杆安装拉线,其中涉及到钢绞线与组合金具的现场制作及配合使用,传统制作拉线的做法是使用人工将钢绞线(拉线)弯曲并使用锤子辅助敲打的方法使其改变形状,以适应拉线金具的沟槽位置。这样的做法大量消耗人力,浪费时间,而且一般2个人工连     

绒山羊毛囊发育中非编码RNA的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指从基因组上转录而来,不编码蛋白质,但在RNA水平上能行使一定生物学功能的RNA。非编码RNA的种类较多,种类的不同造成功能的差异。毛囊是绒山羊皮肤特殊的附属物,位于皮肤的真皮层,发生于绒山羊胚胎期。由于真皮细胞和上皮细胞间的信号分子传递,使其发育呈周期性变化,历经生长期、退行期和休止期。近年来,有关ncRNA在绒山羊毛囊发育中作用报道较多。文章就其中的微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)及环状RNA(circRNA)的生物发生及其在绒山羊毛囊发育中的作用机制进行了归纳、总结。miRNA是真核生物中存在的一种长18~25 nt的ncRNA分子,可通过与靶信使核糖核酸mRNA特异结合,抑制转录后基因表达。在绒山羊毛囊发育中,miRNA通过抑制相关基因及相关信号通路中关键分子的表达而调控毛囊的发育周期以及毛囊的再生能力。lncRNA是长度超过200 nt的ncRNA,经过剪接,具有polyA尾巴与启动子结构,在绒山羊毛囊发育中能促进毛囊细胞增殖与分化,通过调控基因的靶向表达与多种信号通路互作调节毛囊发育及绒毛生长的周期活动。circRNA是与传统的线性RNA不同的封闭环状RNA,含有许多miRNA结合位点,在绒山羊毛囊发育与绒毛生长中起miRNA分子海绵的作用,即通过miRNA的介导,调控靶基因的表达,促进毛囊干细胞向次级毛囊分化,进而解除与毛囊发育与绒毛生长相关的miRNA对其靶基因的抑制作用提高靶基因的表达水平。笔者通过对miRNA、lncRNA及circRNA的研究进行综述,以期为构建毛囊生长发育的分子调控网络及深入探讨绒山羊毛囊发育的调控机制提供借鉴,为今后更好地利用现代分子生物学技术改善绒毛品质提供理论依据。     

基于GS-SVR的耕地面积预测及其驱动因子分析

影响耕地面积变化的驱动因子复杂多变,难以确定。为了合理选择耕地面积的驱动因子,提高耕地面积的预测精度,指导耕地资源科学分配利用,通过采用一种基于GS-SVR自变量全组合预测均方误差(Mean Squared Error,MSE)最小原则的方法确定耕地面积的驱动因子。并以湖南省耕地面积变化为例,通过SVR-CAR、LSSVM、BPNN、ARIMA和MLRR等常用的时间序列预测方法来验证所选取驱动因子的有效性。结果表明,湖南省耕地面积变化的最优驱动因子组合为城市化水平和房地产业产值指数,且常用时间序列预测方法采用GS-SVR全组合方式选取的驱动因子组合大幅度提高了耕地面积的预测精度。采用GS-SVR自变量全组合均方误差最小原则的方法选择耕地面积的驱动因子是科学合理的,在耕地面积等时间序列预测领域具有广泛的应用前景。     

基于酵母双杂交技术的绒山羊波形蛋白互作蛋白鉴定

为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定。结果显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1 401 bp, ACTB基因CDS区序列的长度为1 128 bp;构建了酵母表达载体;试验组共转化pGBKT7-vimentin与pGADT7-ACTB的Y2HGold菌株在二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基和四缺板SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-GaL/AbA培养基上,均能生长出淡蓝色菌落,而在对照组共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基上长出白色菌落,表明共转化的pGBKT7-vimentin与pGADT-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac被激活,共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac未被激活。提示:vimentin与ACTB两种蛋白间存在相互作用。     

绒山羊波形蛋白基因启动子的克隆及活性检测

以内蒙古阿尔巴斯白绒山羊基因组为模板，采用PCR方法克隆波形蛋白基因启动子，并与载体pEGFP-N1连接构建启动子荧光表达载体重组质粒，通过转染次级毛囊成纤维细胞，在荧光镜下鉴定启动子活性，应用生物软件对其序列进行信息学分析。结果表明：波形蛋白启动子区含有转录所必需的调控元件TATAbox、CAAT-box、GC-box等以及2个CPG岛；10个与启动子结合的转录因子；荧光镜下转染的成纤维细胞具有荧光蛋白表达，揭示波形蛋白启动子具有活性，它的激活可诱导下游的波形蛋白基因的转录和表达。