犬急性肾毒性肾损伤标志物的筛选

为筛选出特异性强、灵敏度高的犬急性肾毒性肾损伤标志物,建立急性肾毒性肾损伤模型,检测肾脏不同损伤程度下试验犬尿液和血液中4种肾损伤标志物浓度的动态变化,并通过病理学验证此变化与肾脏损伤是否具有相关性;通过血清肌酐、尿素氮检查验证此变化是否能快速、灵敏地反映肾脏损伤。结果表明,尿液中4种肾损伤标志物浓度动态变化与肾脏损伤具有良好相关性,在肾脏损伤早期浓度即开始显著升高,且时间均早于肌酐和尿素氮,因此均可作为犬急性肾毒性肾损伤早期诊断敏感标志物。血液中4种肾损伤标志物浓度动态变化与肾脏损伤具有良好相关性,其中N-乙酰-β氨基葡萄糖苷酶(NAG)和肾损伤分子(KIM-1)均在肾脏受损早期显著升高,时间均早于肌酐和尿素氮。说明NAG和KIM-1可以作为犬急性肾毒性肾损伤标志物。     

喷施废菌棒木醋液对小白菜生长和品质的影响

为研究废菌棒所制木醋液对蔬菜生长和品质的影响,以稀释100、300、500、700倍木醋液进行小白菜叶面喷施试验,测定不同处理对小白菜及土壤各项指标的影响。结果表明:不同稀释倍数的废菌棒木醋液均能提高小白菜株高和鲜重,提高Vc含量,促进还原性糖的积累和降低硝酸盐含量;稀释500倍木醋液对小白菜品质效果最显著,Vc和可溶性糖含量分别提高31.56%、31.55%,硝酸盐降低37.77%;喷施稀释100倍木醋液对土壤pH值、速效钾、有效磷和碱解氮均有显著效果;废菌棒木醋液中主要有机成分有37种,分别是有机酸类、酮类、酚类、醇类等。     

CRISPR/Cas9介导的猪IPEC-J2细胞CD13基因敲除细胞系的建立

旨在利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术制备CD13基因敲除的IPEC-J2(猪空肠上皮细胞系)细胞,揭示细胞表面分化抗原13(cluster of differentiation 13, CD13)在肠道病原微生物感染肠道细胞中所起的作用。本研究在猪CD13基因第2外显子区域设计2个向导RNA(guide RNA, gRNA),命名为g3、g5,然后分别将g3和g5克隆到pX330-GFP和pX330-RFP载体骨架上,电转染IPEC-J2细胞,48 h后通过流式细胞术分选具有双荧光标记的细胞,培养并获得单克隆细胞,PCR扩增、测序,从而获得CD13基因纯合敲除的阳性细胞系。对获得的20个细胞单克隆进行PCR,并挑取部分克隆PCR产物测序,发现共有7个克隆发生了基因片段缺失,其中1个克隆为单等位基因片段缺失,3个克隆为双等位基因杂合片段缺失,3个克隆为双等位基因纯合片段敲除。本研究检测双等位基因纯合片段敲除细胞的蛋白表达水平,其结果显示,在该纯合敲除细胞中CD13蛋白几乎不表达,表明成功构建了CD13敲除的IPEC-J2细胞系。本研究获得的CD13基因敲除细胞系为探究CD13在猪肠道病原微生物感染肠道细胞中所起的作用奠定了基础。