四氯联苯对鸡胚性腺原始生殖细胞的毒性影响

采用四氯联苯处理发育至Ⅹ期的白来航鸡种蛋,孵化5.5天后取出胚胎进行全固定,用石蜡切片和PAS染色(高碘酸希夫试剂)研究四氯联苯对鸡胚性腺原始生殖细胞(PGCs)的影响.结果表明,四氯联苯对发育至5.5日胚龄的鸡胚性腺PGCs数量和结构有明显影响,但雌二醇处理的5.5日胚龄鸡胚PGCs数量变化不显著,其结构无明显变化.表明四氯联苯对5.5日胚龄的鸡胚性腺PGCs的影响主要来自于其毒性作用.     

禁食对生长期北京鸭腺胃ghrelin免疫阳性细胞的影响

本研究旨在观察禁食是否对生长期北京鸭腺胃ghrelin免疫阳性细胞生成有影响。用免疫组织化学的方法检测25、35、50日龄的北京鸭(已经禁食72 h)单位面积(mm2)腺胃组织中ghrelin阳性细胞数目。研究发现在这3个时期,不管是禁食组还是自由采食组,大量ghrelin阳性细胞多分布于腺胃深层复管状腺中;禁食组腺胃中gh-relin阳性细胞数目比自由采食组极显著增加(P0.01)。结果提示:禁食是影响腺胃产生有活性ghrelin的重要因素。     

四氯联苯对鸡胚生殖新月原始生殖细胞分布的影响

为了探索四氯联苯(2,2′,5,5′)对鸡胚生殖新月原始生殖细胞(PGCs)分布的影响,本试验将四氯联苯注入种蛋的胚盘(第X期)处,在38℃,相对湿度60%,每2h45度转蛋的条件下孵化至原条期,通过不同方法检测原条期生殖新月明区、暗区及血液循环中的PGCs,探讨四氯联苯对胚盘生殖新月区PGCs分布的影响。结果表明,四氯联苯明显降低了原条期明区和血液中PGSs的数量(P<0.01),但对暗区PGCs的数量影响不明显。这说明四氯联苯对血液中PGCs的影响是由于降低了生殖新月明区PGCs的缘故,和暗区的PGCs无相关性。     

鸡输卵管组织特异性分泌表达载体的构建和表达

摘要：为了实现外源基因在鸡(Gallus gallus )输卵管上皮细胞内的特异性分泌表达，采用RT-PCR的方法扩增了鸡溶菌酶基因的450 bp的cDNA片段，该片段保留了5ˊ端信号肽编码序列。将该片段插入到含有1.2 kb卵清蛋白5ˊ调控序列的特异性表达载体pOVA-GFP中，与绿色荧光蛋白基因形成融合基因，使融合蛋白具有分泌功能。新构建的分泌表达载体pOVALG转染鸡胚成纤维细胞和大鼠乳腺上皮细胞系SHZ-88后，成功地检测到了绿色荧光蛋白的表达。     

供体PGCs在鸡-鸭嵌合体胚胎性腺外的发育

通过微注射法将鸡原始生殖细胞 (PGCs)注入到鸭的胚盘下腔中 ,用鸡 W染色体 DNA探针通过原位杂交的方法对供体 PGCs在嵌合体胚胎性腺外的发育作了研究。结果表明 ,所取的 4 8枚胚胎中 ,有 18.8%的脑内和 2 3.9%的神经管周围出现了阳性信号     

鸡胚原始生殖细胞的分离和鸡鸭嵌合体的制备研究

探索了 12～ 17期鸡胚血液中的原始生殖细胞 (PGCs)迁移数量变化规律 ,将其在液氮中冷冻保存。并以Fi coll密度梯度离心、MiniMACS磁气分离、滤膜 3种方法对PGCs进行分离 ,结果发现 ,12～ 17期血液中均有PGCs存在 ,13期达到高峰 (4 7 1± 10 5 )个·μL-1,在血液中比例为 0 0 12 6 %。冷冻保存 3个月后解冻成活率达 80 %以上。3种分离方法所得的分离效果分别为 95 7%、39 2 %、6 3 0 % ;纯度为 2 7 5 %、8 4%、3 1%。将分离的原始生殖细胞以微注射法转移至 14～ 15期麻鸭胚胎中制备了鸡鸭种间嵌合体 ,获得 8只雏鸭 (8/ 110 )。以鸡W特异性DNA探针原位杂交法在早期鸭胚性腺中检测到鸡原始生殖细胞 ,嵌合率达 84 2 % (16 / 19)。表明鸡原始生殖细胞能够迁移定居到鸭胚性腺中 ,并有可能增殖分化成有功能的配子     

模拟微重力对鹌鹑胚胎原始生殖细胞及内脏器官发育的影响

本实验利用回转器旋转模拟微重力的生物效应，以鹌鹑胚胎作为实验材料，研究了鹌鹑胚胎生殖腺内原始生殖细胞的数目及内脏器官的组织学变化。结果表明，回转器旋转可使早期胚胎血液和生殖腺内的原始生殖细胞数减少;生殖腺、心脏、肝脏的组织学结构发生不同程度的损伤，但对肺脏，肾脏没有太大影响。     

PMSG对鸡卵子受精及发育能力的影响

本实验研究了禽类超数排卵中使用的PMSG对鸡卵子受精及发育能力的影响.首先通过超数排卵、体外受精和体外培养的方法比较超排卵和自然排出卵子的受精和发育能力.PMSG处理鸡注射鸡垂体前叶提取物诱导超数排卵,超排卵体外受精后,在含有20%卵清蛋白的DME-F12中培养24h,观察发育情况;并研究了注射PMSG母鸡所产种蛋的受精率和孵化率.产蛋母鸡人工受精后,连续3～8注射1000IU的PMSG抑制排卵,收集种蛋孵化.通过体内和体外的途径比较超数排卵所用的PMSG对卵子受精和发育能力的影响.研究表明:PMSG对超排卵的受精和发育没有影响.     

白来航鸡不同来源间充质干细胞的比较研究

【目的】以禽类间充质干细胞(MSCs)为研究对象,探讨不同来源MSCs生物学特性上的差异及其临床应用潜力。【方法】培养白来航鸡4种不同组织器官骨髓(BM)、脂肪(AT)、脐带(UC)和脾脏(S)衍生的MSCs,通过实时荧光定量PCR技术检测细胞表面标记物的表达,采用细胞生长曲线观察种群倍增时间变化,利用噻唑蓝细胞毒性检测法(MTT)确定基质细胞衍生因子1(SDF-1)对不同来源MSCs的细胞毒性,并选用细胞小室检测MSCs体外迁移情况,通过蛋白质印迹法方法确定MSCs体外迁移影响因素,最后选用成骨分化和成脂分化观察不同来源MSCs的体外分化情况。【结果】不同来源的MSCs细胞形态基本一致;细胞表面标记物CD29、CD44、CD71、CD90和CD105等基因呈阳性表达;不同来源的MSCs表面标记物的相对表达量不同,CD29基因的相对表达量基本相同,CD44基因在AT-MSCs中的相对表达量显著高于BM-MSCs(P<0.05),CD71基因在UC-MSCs中的相对表达量显著低于BM-MSCs(P<0.05),CD90基因在UC-MSCs和S-MSCs中的相对表达量极显著低于...     

在代用蛋壳中培养的鸡胚血浆碱性磷酸酶（ALP）的测定

将正常孵化７２ｈ的鸡胚转移到代用蛋壳内培养。鸡胚在非己的代用蛋壳中生长发育直至孵化。一部分表现出不同程度的缺钙症状。本实验测定了孵化至１７ｄ的鸡胚血浆ＡＬＰ活性，经ｔ检验，对照组和实验组的ＡＬＰ活性差异极显著（Ｐ＜０．０１）。说明在代用蛋壳中培养的鸡胚体内缺钙引起ＡＬＰ代偿性增加。