铜砷单一污染对蚯蚓体腔细胞的影响

蚯蚓是土壤污染的重要指示者.本实验的主要目标就是要研究重金属对蚯蚓以及参与防御反应的体腔细胞的影响.人工土壤用4个浓度的铜与砷染毒,然后把成熟的赤子爱胜蚓在其中分别放置2、7与14 d.结果表明,随着金属离子浓度的增大与时间的增加,蚯蚓的生长率不断降低.中性红保持时间与重金属的剂量有一定的联系,浓度越高,中性红保持时间越短,随着时间的增加甚至会减少为0.黏附细胞吞噬活性与细胞吞饮作用也受到重金属的影响而减弱,这也说明重金属对蚯蚓中与免疫相关的体腔细胞影响较大.或许,免疫功能的破坏导致蚯蚓在重金属污染的土壤中生存活力较差.     

镉诱导的蚯蚓全长cDNA文库的构建与初步鉴定

采用人工土壤法，研究重金属镉(Cd2+)对成熟赤子爱胜蚓（Eisenia fetida）的急性毒性,表明蚯蚓对镉具有较强的耐受性。Trizol法提取蚯蚓RNA后，采用Clontech公司的CreatorTM SMARTTM cDNA文库构建试剂盒，成功构建了低剂量Cd2+（200 mg•kg-1）诱导的蚯蚓cDNA文库，其库容量为3.02×105 pfu/mL,扩增后滴度为8.67×109 pfu/mL，重组率为97.3％, 绝大多数的cDNA插入片段≥0•5 kb,平均长度≈1•0 kb。所够建的cDNA质粒文库容量及插入片段大小符合合格文库要求, 为进一步筛选蚯蚓体内解毒、免疫相关基因，寻找生物标志物奠定了基础。