黄沙鳖β-防御素基因克隆及其表达分析

[目的]明确β-防御素在黄沙鳖先天免疫中的潜在作用,为开展黄沙鳖绿色病害防治及促进其养殖业健康发展打下基础.[方法]运用RACE克隆黄沙鳖β-防御素基因(Hs-BD1)cDNA序列,采用SignalP-5.0、PredictProtein、PSIPRED、Robetta和Clustal X等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR检测Hs-BD1基因在黄沙鳖不同组织中的表达特征及细菌感染前后的表达变化.[结果]Hs-BD1基因cDNA序列全长493 bp,包括72 bp的5'非编码区(5'-UTR)、201 bp的开放阅读框(ORF)及220 bp的3'非编码区(3'-UTR).Hs-BD1基因编码66个氨基酸残基,包括22个氨基酸残基组成的信号肽区、3个氨基酸残基组成的前肽区和41个氨基酸组成的成熟肽区.其中,成熟肽区具有6个保守的半胱氨酸残基(31Cys、58Cys、38Cys、52Cys、42Cys和59Cys)及位于C1和C2间的甘氨酸残基(Gly),即Hs-BD1基因属于β-防御素家族.Hs-BD1氨基酸序列与中华鳖β-防御素16的相似性最高(93.9%),基于β-防御素序列相似性构建的系统发育进化树也显示黄沙鳖与中华鳖和西部锦龟聚为一支,其亲缘关系相对较近.6个保守的半胱氨酸残基分别以C1-C5、C2-C4和C3-C6的连接方式形成3个二硫键;Hs-BD1成熟蛋白三级结构是由α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲组成.Hs-BD1基因在黄沙鳖肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的相对表达量较高,在心脏、肠道、肌肉、脑组织和表皮中的相对表达量均较低;以温和气单胞菌攻毒后,Hs-BD1基因在黄沙鳖脾脏中的相对表达量呈上升—下降—上升—下降的变化趋势,在攻毒后第3和36 h共出现2个表达峰值,对应的相对表达量分别是攻毒前(0 h)的20.8和10.6倍,差异均极显著(P<0.01).[结论]Hs-BD1基因在黄沙鳖的多个组织中均有表达,尤其在肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的相对表达量较高,且可被温和气单胞菌感染诱导表达,说明Hs-BD1基因在黄沙鳖抵抗病原感染的过程中发挥调控作用.     

浅谈拖拉机在农业中的应用及故障排除方法

在现代农业生产当中,拖拉机的应用范围极为广泛,能够进行土地开垦、化肥运输、收获农作物、携带喷雾机进行田间管理以及带动发电机组进行发电。拖拉机在农业生产中的普及,有效提升了我国农业生产效率。其中,为最大限度延长拖拉机使用寿命,确保拖拉机的性能最大化发挥以及减少不必要的维修费用,需要时刻提醒广大农机手对拖拉机的保养技术有所了解,并且在日常维护中做到合理保养,掌握一定的维修技巧,才能够保证拖拉机更好地为农业生产服务。     

干旱半干旱生态农牧业发展展望

我国干旱半干旱地区经济落后,环境恶化,水资源匮乏是关键所在。水资源问题是限制该区经济发展和生态恢复重建的制约因子,也是摆在各级领导和专家面前的首要问题。本文重点。论述干旱半干旱地区如何解决好取(集)水、畜水、调水、用水的方法,强调在将有限的水资源充分合理利用的同时,兼顾生态环境的恢复重建以及经济效益和社会效益,协调好集水工程、农艺工程、农业管理工程和现代农村社会管理之间的关系,构建好保证各项措施实施和收效的政策和法律体系。     

播期播量对小麦中麦895产量和品质的影响

为给小麦新品种中麦895的推广提供技术支撑，2013-2015在关中中部灌区，采用二次D饱和最优设计方法研究了播期与播量对中麦895产量及品质的效应。结果表明，播期和播量显著影响中麦895的产量，其高产适宜的播期为10月12日-19日，适宜的播量为170.2 kg·hm^-2～206.5 kg·hm^-2。不同处理之间成穗数、千粒重和产量差异极显著，穗粒数差异显著。播量为185.5 kg·hm^-2时，达到最高产量的适宜播期为10月14日-22日；播期为10月14日时，达到最高产量适宜的播量为130.5 kg·hm^-2～207.3 kg·hm^-2。播期和播量可显著影响中麦895的蛋白质含量和容重，对加工品质和拉伸品质没有显著影响；适期偏晚播种有利于提高中麦895的成穗数和千粒重以获得高产。     

种植密度和肥料施用量对半夏繁殖产量的影响

为半夏生产提供种源保障和技术支撑，以半夏品种黒麻芋为供试材料，以种植密度、有机肥、氮肥和磷肥施用量为试验因子，采用4因子5水平二次回归旋转组合设计试验，研究种植密度和肥料施用量对半夏黒麻芋繁殖产量的影响。结果表明，获得半夏块茎产量≥10 500 kg/hm2的优化栽培方案为种植密度889.5万～941.9万粒/hm2、有机肥施用量28.0～32.0 t/hm2、N肥施用量97.5～109.5 kg/hm2、P肥（P2O5）施用量214.7～365.6 kg/hm2；以半夏块茎产量≥11 250 kg/hm2为目标，相应的农艺措施为种植密度885.9万～947.8万粒/hm2、有机肥施用量27.9～32.1t/hm2、N肥施用量97.4～109.6 kg/ hm2、P肥（P2O5）施用量217.4～378.1kg/ hm2；在半夏繁殖过程中，密度0水平（750万株/hm2）时能获得最高的经济效益；4个试验因子对半夏繁殖产量影响的重要程度依次为栽培密度>氮肥>有机肥>磷肥。     

一种简易检测6-磷酸葡萄糖的方法

6-磷酸葡萄糖(G6P)是多种代谢途径的关键中间产物,一种简易高效的G6P测定法建立将有利于深入了解其在有机体中的代谢状态。前期研究发现,基于离子排斥色谱柱Bio-Rad Aminex HPX-87H与示差折光检测器的高效液相色谱分析无法有效地将这一化合物与1,6-二磷酸果糖、3-磷酸甘油酸区分开来。因而,拟建立一种简便、专一且灵敏,检测浓度范围为0.2～10μmol/L的G6P的酶学荧光检测法。同时,我们以模式真核生物酵母为材料,对G6P的提取方法进行改进,以使样本的测定更加稳定。     

陕西设施蔬菜冬季管理措施

正1调控优化棚室环境1.1温度管理1)注意保温。随着气温的降低,草帘或保温被可适当晚揭早盖。时间掌握在上午拉开草帘或保温被后,室内温度不下降为宜。下午当室内温度降至20℃左右时及时盖帘,以尽量多保存热量,防止夜间的热量散失。2)多膜覆盖。深冬季节,为了保证棚室温度,可在棚内加设"二膜"、"三膜"或"四膜",棚     

原子吸收石墨炉法测定甘蔗中镉、铅方法探索

采用美国热电原子吸收光谱(ICE3500)石墨炉法检测甘蔗中的有害元素镉、铅含量,结果表明该方法仪器灵敏度高、数据准确可靠,适用于检测甘蔗中镉和铅重金属元素含量。     

云南高黎贡山国家级自然保护区羚牛生境选择

生境选择是动物对环境行为适应的重要内容,生境丧失或片段化是目前大多数濒于灭绝的脊椎动物所面临的基本威胁。目前,针对高黎贡山地区羚牛的生态研究仍然较少,以云南高黎贡山国家级自然保护区独龙江流域的羚牛为研究对象,对其生境选择进行初步研究。结果表明:1)羚牛对硝塘的利用强度最高,其次为针阔混交林、竹林、草甸和落叶阔叶林;2)离硝塘的距离是影响羚牛生境利用强度的重要因子,其次为海拔梯度和平均海拔,离公路、水源和人便道的距离对羚牛生境利用强度影响不显著;3)研究区域设置的红外相机在硝塘中拍摄到的照片和视频最多,其次为针阔混交林,竹林、草甸和落叶阔叶林,再次验证了直接观察和痕迹观察的结果。因此,保护好独龙江流域的羚牛关键在于保护好硝塘以及附近连片的森林植被。