大黄鱼生长激素在毕赤酵母中的表达

为大量获得具有生物活性的大黄鱼生长激素(Pseucdosciaena crocea,Growth Hormone,pcGH),利用本实验室分离的天然大黄鱼生长激素基因在毕赤酵母表达系统中的表达进行了研究。把pcGH克隆到酵母整合型质粒载体中构建重组表达载体pPIC9K-pcGH,电击转化将pcGH转化进his4缺陷型毕赤酵母GSll5菌株染色体上,经甲醇诱导得以高效表达,SDS-PAGE证实了表达产物为大黄鱼生长激素,表达量约为62.5 mg/L。     

探寻茶学专业职业教学的重要性

我国是茶叶的故乡,也是茶文化的发源地。因此,各种形式的茶文化也就应运而生。当然,正是整个茶叶产业的传承发展,以及其浓厚的时代创新,决定了在当前时代背景下,整个茶学专业实现了内涵上的丰富,以及机制上的全新构建。本文拟从茶学专业职业教学活动的实施状况认知入手,结合茶学专业职业教学活动的重要性理解,从而具体探究做好茶叶专业职业教学活动的具体思路。     

转座子标签法对阴沟肠杆菌B8拮抗水稻白叶枯病菌相关基因片段的克隆与检测

阴沟肠杆菌B8是从水稻叶面分离获得的具有拮抗水稻白叶枯病菌等多种病原细菌的广谱拮抗菌.为研究其拮抗机理,我们应用转座子标签法对阴沟肠杆菌B8中与抗水稻白叶枯病菌拮抗活性相关的DNA片段进行了克隆.通过自杀性质粒pZJ25介导,将Tn5转座到B8的染色体上,从而筛选到2株拮抗活性丧失的菌株B8B和B8F;用Tn5片段为探针,分别对B8、B8B、B8F进行Southern杂交,结果在B8中无特异条带,而在B8B和B8F中各有一条约20kb和9kb的EcoRⅠ特异条带;分别提取二株突变菌株的基因组DNA,BamHⅠ酶切,克隆于pBS的BamHⅠ位点上,利用Tn5上的Kan抗性,分别筛选到质粒pTLB和pTLF,获得包含Tn5部分序列的B和F二个基因片段,大小约为6kb和7kb;应用pTLB全质粒和pTLF中约0.8kb的BamHⅠ+HpaⅠ外源F片段为探针,对B8、B8B、B8F进行Southern杂交,证实我们克隆到Tn5转座位点周围的二个片段,且他们分别位于B8菌株染色体DNA的二个不同位置.     

栉孔扇贝C型凝集素基因的cDNA克隆和序列分析

利用本实验室已建立的栉孔扇贝cDNA文库中已知表达序列标签(expression sequence tag,EST),采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术获得目的基因的cDNA编码全序列.利用BLAST比对分析,结果发现目的基因序列与日本鳗鲡(Anguilla japonica)C型凝集素(C-type Lectin)E值达4e-19;利用Clustalw软件将目的基因与脊椎动物和节肢动物C型凝集素的多序列比对,发现克隆片段具有C型凝集素家族的标签序列模式且有很高的同源性,在该序列中形成二硫键的4个保守的半胱氨酸,与其他物种C型凝集素的二硫键结构非常相似;同时发现在其成熟肽中含有糖识别域(carbohydrate recognition domain,CRD),且Cys的位点是保守的.分析结果表明我们克隆的目的基因极可能为栉孔扇贝(Chlamys farreri)的C型凝集素基因.     

网箱饲养大黄鱼性早熟的调查研究

于2000年12月调查了福清地区网箱饲养6月龄大黄鱼的性腺发育状况。结果表明：样本中性腺发育处于生殖细胞增殖期（Ⅰ期）的占51．63％；精巢发育处于Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期的雄鱼分别占样本总数的7．2％、9．2％和1．3％；卵巢发育处于Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期的雌鱼分别占样本总数19．6％、9．2％和2．0％。在性成熟系数方面，与1987年的资料相比，有较大程度的提高。调查结果显示，网箱饲养的大黄鱼初次性成熟个体有明显的小型化趋势；性腺的发育影响了大黄鱼的生长性能；人工饲养的大黄鱼出现性早熟现象与培养殖技术不够规范有关。