拟南芥SWR1复合体亚单位编码基因ARP6和SWC6的水稻同源基因功能研究

用RT-PCR的方法分别克隆出拟南芥SWR1复合体亚单位编码基因ARP6和SWC6在水稻中的同源基因OsARP6和OsSWC6,对其组织表达特异性进行了分析。构建这两个基因的表达载体,分别转化拟南芥突变体arp6和swc6,它们在阳性植株表达后均能在一定程度上使突变性状回复,表明在拟南芥和水稻之间,这些基因在功能上具有一定的保守性。本研究结果为水稻中存在SWR1功能复合体提供了重要的证据,也有助于探明该复合体调控基因表达的分子机制。     

高羊茅悬浮细胞系的建立及绿色植株的高频再生

将5个高羊茅品种的成熟种子经灭菌后，接种于含有不同浓度2，4—D和ABA的N4培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明，不同浓度2，4—D和ABA对5个品种的愈伤组织诱导率有显著影响，以培养基中附加9mg/L 2，4—D和2mg/L ABA的诱导率最高。将经过数次继代改造后获得的高质量胚性愈伤置于AA液体培养基中进行悬浮培养，建立起来自3个品种的8个悬浮细胞系，其中6个悬浮细胞系经高渗预处理后能高频再生出绿色植株，基本克服了以往研究中再生白化植株的现象。     

转反义PEP基因油菜超油1号菜籽油毒理性评价

为评价转反义PEP基因油菜超油1号菜籽油的食用安全性,对该样品进行了急性毒性试验和致突变试验.结果表明,转反义PEP基因超高油油菜菜籽油属无毒级,无致突变作用.大鼠90d喂养试验结果显示,各试验组大鼠体重、进食量、食物利用率、血常规、脏体比及病理组织学观察等各项指标与阴性对照均无显著性差异,无作用剂量为10.0ml/kg体重.     

影响大豆基因枪转化的几个参数

利用基因枪转化大豆愈伤组织,研究了基因枪不同参数对转化效率的影响。试验表明,ＣａＣｌ２浓度、拟气压力、受体状态对转化频率有重要影响。在基因枪轰击前２４ｈ,用５Ｇｙ辐照处理愈伤组织转化效率提高明显。获得了大量经ＧＵＳ染色为蓝色的抗生愈伤组织。     

农杆菌介导的水稻转化及bar基因稳定遗传

以秀水11、072和ZH9905的胚性愈伤组织为受体，通过农杆菌介导法将抗除草剂基因bar导入水稻基因组，经PCR、Southern杂交分析获得大量转基因植株。除草剂喷洒试验表明，转基因水稻对除草剂Basta具有高度的抗性。对R1代植株分析表明外源基因已遗传给后代，部分株系的分离比率符合3：1。对部分转基因水稻植株考察结果表明，部分转基因植株的农艺性状与亲本相似，但育性下降。     

百慕大成熟胚的组织培养及植株再生

百慕大是一种难以培养的草坪草。本研究首次以百慕大成熟胚为外植体，通过对胚性愈伤组织的发生进行植株再生。结果表明，百慕大成熟种子的出愈能力很强，且不同的基本培养基诱导效果相近，但初生愈伤组织呈无定型棉絮状，不能再生成株。采用提高培养基中蔗糖和琼脂浓度以及在培养基中附加适宜浓度ABA，CH和一定比例的生长素与细胞分裂素的方法，对初生愈组织实施继代改造，高频诱导出致密颗粒状的，具有高度再生能力的胚性愈伤组织，此类胚性愈伤组织在含有2.0mg/L 6－BA，1.0mg/LK和0.5mg/L NAA的分化培养基上再生频率较高。     

栽培稻与野生稻体细胞杂种的同工酶鉴定

对栽培稻０２４２８与药用野生稻的原生质体融合再生植株ｐｆ９２５２，ｐｆ９２７９，ｐｆ９２１００进行酯酶和过氧化酶同工酶鉴定，其中ｐｆ２５２和ｐｆ９２７９的同工酶具有双亲的条带，表出现明显的杂合性，ｐｆ９２７９还出现新的酶带，表明它们的确是体细胞杂种，而且它们中包含的药用时取生稻的基因各不相同，而ｐｆ９２１００的酶谱与药用野生稻的酶谱基体相同，尚不能确定它是体细胞杂种。     

水稻原生质体电融合适宜条件的研究

水稻原生体电融合适宜条件为：交流电场强度２５０Ｖ／ｃｍ；交频率５００ｋＨｚ；脉冲强度１．６ＫＶ／ｃｍ；脉冲宽度５０ｕｓ；脉冲个数为２。此时的１对１融合率为１４．９％，总融合率达２４．９％。在此条件下，电场处理对原生质 体活力无明显的影响。     

低磷条件下过表达OsPHF1基因对粳稻农艺性状的影响

【目的】 磷酸盐转运体运输协助因子(PHF1)通过转录后调节特定磷转运蛋白,影响磷酸盐的利用效率。本研究通过培育过表达OsPHF1的无选择标记转基因粳稻空育131,研究在不同磷浓度环境中OsPHF1的过表达对粳稻空育131产量的影响,为培育可商品化的磷高效转基因水稻品种提供依据。方法 利用双T-DNA方法构建OsPHF1的过表达载体,通过农杆菌侵染法和后续筛选获得了无选择标记的转基因空育131纯合株系,通过对T₃和T₄代转基因植株的田间试验,研究转基因品系在低磷浓度(75或112.5 kg/hm²过磷酸钙)、中低磷浓度(225或300 kg/hm²过磷酸钙)和正常磷浓度(450 kg/hm²过磷酸钙)下的农艺性状。结果 获得了3个无筛选标记的纯合OsPHF1过表达转基因空育131株系F18-18、F22-32和F25-6。其中,F22-32和F25-6的OsPHF1的表达量远高于野生型。大田试验显示,F22-32和F25-6株系的T₃代在中低磷(300 kg/hm²过磷酸钙)环境中,分蘖数比对照分别增加了55%和25%,增产幅度分别为38%和34%;F22-32和F25-6株系T₄代在低磷条件下(112.5 kg/hm²过磷酸钙)产量的增幅最大,增产了30%~35%;在中低磷条件下(225 kg/hm²过磷酸钙)分蘖数和产量也有明显增加。结论 双T-DNA法能用于培育过表达OsPHF1的无筛选标记转基因水稻。田间试验显示,高表达OsPHF1的转基因株系在中低磷条件下(112.5、225或300 kg/hm²过磷酸钙)分蘖数和产量稳定增加。