拟南芥SWR1复合体亚单位编码基因ARP6和SWC6的水稻同源基因功能研究

用RT-PCR的方法分别克隆出拟南芥SWR1复合体亚单位编码基因ARP6和SWC6在水稻中的同源基因OsARP6和OsSWC6,对其组织表达特异性进行了分析。构建这两个基因的表达载体,分别转化拟南芥突变体arp6和swc6,它们在阳性植株表达后均能在一定程度上使突变性状回复,表明在拟南芥和水稻之间,这些基因在功能上具有一定的保守性。本研究结果为水稻中存在SWR1功能复合体提供了重要的证据,也有助于探明该复合体调控基因表达的分子机制。     

高羊茅悬浮细胞系的建立及绿色植株的高频再生

将5个高羊茅品种的成熟种子经灭菌后，接种于含有不同浓度2，4—D和ABA的N4培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明，不同浓度2，4—D和ABA对5个品种的愈伤组织诱导率有显著影响，以培养基中附加9mg/L 2，4—D和2mg/L ABA的诱导率最高。将经过数次继代改造后获得的高质量胚性愈伤置于AA液体培养基中进行悬浮培养，建立起来自3个品种的8个悬浮细胞系，其中6个悬浮细胞系经高渗预处理后能高频再生出绿色植株，基本克服了以往研究中再生白化植株的现象。     

转反义PEP基因油菜超油1号菜籽油毒理性评价

为评价转反义PEP基因油菜超油1号菜籽油的食用安全性,对该样品进行了急性毒性试验和致突变试验.结果表明,转反义PEP基因超高油油菜菜籽油属无毒级,无致突变作用.大鼠90d喂养试验结果显示,各试验组大鼠体重、进食量、食物利用率、血常规、脏体比及病理组织学观察等各项指标与阴性对照均无显著性差异,无作用剂量为10.0ml/kg体重.     

影响大豆基因枪转化的几个参数

利用基因枪转化大豆愈伤组织,研究了基因枪不同参数对转化效率的影响。试验表明,ＣａＣｌ２浓度、拟气压力、受体状态对转化频率有重要影响。在基因枪轰击前２４ｈ,用５Ｇｙ辐照处理愈伤组织转化效率提高明显。获得了大量经ＧＵＳ染色为蓝色的抗生愈伤组织。     

水稻原生质体电融合适宜条件的研究

水稻原生体电融合适宜条件为：交流电场强度２５０Ｖ／ｃｍ；交频率５００ｋＨｚ；脉冲强度１．６ＫＶ／ｃｍ；脉冲宽度５０ｕｓ；脉冲个数为２。此时的１对１融合率为１４．９％，总融合率达２４．９％。在此条件下，电场处理对原生质 体活力无明显的影响。     

农杆菌介导的水稻转化及bar基因稳定遗传

以秀水11、072和ZH9905的胚性愈伤组织为受体，通过农杆菌介导法将抗除草剂基因bar导入水稻基因组，经PCR、Southern杂交分析获得大量转基因植株。除草剂喷洒试验表明，转基因水稻对除草剂Basta具有高度的抗性。对R1代植株分析表明外源基因已遗传给后代，部分株系的分离比率符合3：1。对部分转基因水稻植株考察结果表明，部分转基因植株的农艺性状与亲本相似，但育性下降。     

栽培稻与野生稻体细胞杂种的同工酶鉴定

对栽培稻０２４２８与药用野生稻的原生质体融合再生植株ｐｆ９２５２，ｐｆ９２７９，ｐｆ９２１００进行酯酶和过氧化酶同工酶鉴定，其中ｐｆ２５２和ｐｆ９２７９的同工酶具有双亲的条带，表出现明显的杂合性，ｐｆ９２７９还出现新的酶带，表明它们的确是体细胞杂种，而且它们中包含的药用时取生稻的基因各不相同，而ｐｆ９２１００的酶谱与药用野生稻的酶谱基体相同，尚不能确定它是体细胞杂种。     

百慕大成熟胚的组织培养及植株再生

百慕大是一种难以培养的草坪草。本研究首次以百慕大成熟胚为外植体，通过对胚性愈伤组织的发生进行植株再生。结果表明，百慕大成熟种子的出愈能力很强，且不同的基本培养基诱导效果相近，但初生愈伤组织呈无定型棉絮状，不能再生成株。采用提高培养基中蔗糖和琼脂浓度以及在培养基中附加适宜浓度ABA，CH和一定比例的生长素与细胞分裂素的方法，对初生愈组织实施继代改造，高频诱导出致密颗粒状的，具有高度再生能力的胚性愈伤组织，此类胚性愈伤组织在含有2.0mg/L 6－BA，1.0mg/LK和0.5mg/L NAA的分化培养基上再生频率较高。     

甘蓝型油菜下胚轴原生质体培养再生植株

油菜是重要的油料作物,我国的油菜种植面积和油菜籽产量均居世界首位。提高油菜籽粒含油量是育种的主要目标之一。我们利用拥有自主知识产权的反义PEP(phosphoenolpyruvate carboxylse）技术获得了超高含油量油菜＾[1]。将超高含油量特性与油菜杂种优势结合是使超高油油菜尽快应用于生产,实现产业化生产的重要途径。而超高含油量不育系的选育是杂种优势利用的前提之一。通过不对称体细胞杂交能“一步法”快速选育不育系＾[2]。为此,建立重演性好、再生额率高的原生质体培养系统十分必要。甘蓝型油菜原生质体的培养已有一些成功的报道＾[3-6],但愈伤组织分化频率都不高。本文以甘蓝型油菜下胚轴为材料,通过琼脂糖包埋法,建立了原生质体高频分裂及植株再生体系,为通过不对称体细胞杂交快速选育超高含油量不育系提供一些科学依据。