内生真菌对干旱胁迫下金钗石斛生理生化特性的影响

以从野生金钗石斛内分离到的内生真菌37号、117号和120号菌株为材料,探讨在干旱胁迫下3种菌株对金钗石斛的生长、生理特性和抗氧化酶活性的影响。结果表明,随着15%PEG6000溶液胁迫时间的延长,各处理组较对照组相比生长减缓,渗透调节增加,抗氧化酶活性增强。3株内生真菌处理下能减少植株鲜重的下降,其中120号菌株能有效降低根长、提高抗氧化酶(SOD、CAT、POD)的活性;117号能增加渗透调节物质脯氨酸和可溶性糖含量;37号能增强抗氧化酶(SOD、CAT)活性。3株菌株均能增强金钗石斛抗旱能力,但作用效果各不相同,生产中混合使用效果更佳。     

内生真菌对营养亏缺下金钗石斛幼苗生长的影响

【目的】探讨营养亏缺下内生真菌对金钗石斛组培苗生长的影响。【方法】金钗石斛组培苗移栽时在其根部分别添加内生真菌37号、117号、120号菌株及无菌水,然后再分别在1倍、1/2倍、1/4倍和1/8倍Hoagland营养液中培养30 d,通过测定植株生长特征、生理特性等指标来判定内生真菌在不同稀释倍数营养液中的作用效果。【结果】随着Hoagland营养液逐渐变稀,各内生真菌处理组的植株干重、叶绿素SPAD值、总生物碱、水溶性多糖和氮磷钾含量增加量显著高于对照组,根长和根茎比增加量显著小于对照组。3株内生真菌处理间各种指标变化并不完全相同,37号菌株在增加干重和总生物碱含量上作用最为显著,而120号菌株在控制根长和根茎比、提高水溶性多糖含量、增加对磷和钾元素的吸收上效果更为突出,117号菌株在提高叶绿素SPAD值和促进植株吸收氮元素上作用最为明显。【结论】3株菌株均能促进金钗石斛幼苗在营养亏缺下的生长,但作用效果各不相同,生产中混合使用效果更佳。     

齿兰环斑病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备

 采用RT-PCR法从感染齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus, ORSV)贵州分离物的苋色藜叶片中扩增出病毒的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase, RdRp)基因保守序列。测序结果显示,该保守片段长516 bp,编码171个氨基酸残基。构建了该片段的原核表达载体pET32a-ORSV RdRp并转化BL21(DE3)菌株,在25℃以0.4 mmol·L^-1 IPTG诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为36 kDa,与预测相符合。将该重组蛋白作为抗原免疫BABL/C小鼠,制备的多克隆抗体效价达1∶102 400。间接ELISA结果表明,该多抗具有较强的特异性,能检测到ORSV感染的病叶汁液中的RdRp,而与其它感染4种同属或不同属病毒的病叶汁液不发生血清学交叉反应,本实验为进一步研究RdRp的结构和功能以及从分子水平上探讨该病毒的致病机制奠定基础。     

不同漂浮育苗基质对辣椒种子萌发及幼苗生长的影响

为了筛选合适的辣椒漂浮育苗基质,测定了3种不同基质处理下漂浮育苗中辣椒种子萌发及幼苗生长相关指标。结果表明:不同基质处理对辣椒种子萌发指标的影响差异显著,2号基质处理下3个辣椒品种发芽率、发芽势、发芽指数和发芽天数均明显高于1号、3号基质处理,甜椒的发芽率、发芽势、发芽指数和平均发芽天数分别为89%、53%、43.23和8.76,卡宴线椒为81%、48%、40.22和10.86,巨人椒为86%、50%、42.67和11.27;在4次采样中,仅在20d时2号基质处理下辣椒幼苗的株高、生物量、叶绿素SPAD值及全氮、磷、钾含量显著高于1号、3号基质,在30、40、50d的采样中上述指标在3个基质间差异不显著。综上所述,2号基质更适合在辣椒漂浮育苗中使用。     

干旱胁迫对引种辣椒生长特性的影响

以引种辣椒Jalapeno Early Hot Portugal Hot Sweet Banana 为材料利用自动灌溉系统控制基质不同含 水量,包括5%,10%,15%,20%,25%,CK研究3 个辣椒品种对干旱胁迫的响应。结果表明院随着基质含水量的减 少,3 个品种叶面积、叶绿素SPAD 值、相对含水量和水势均呈下降趋势,而根干重、根冠比和脯氨酸含量则逐渐升 高;基质相对含水量为5%时,Jalapeno Early Hot 的叶面积、叶绿素含量、相对含水量、水势分别比对照下降9.79%, 10.76%,8.03%和79.45%根干重、根冠比和脯氨酸增加19.43%,26.82%和201.85%,Sweet Banana 的叶面积、叶绿素 含量,相对含水量水势比对照分别下降18.05%、13.51%、17.70%和149.23%,根干重、根冠比和脯氨酸增加28.79%, 33.17%和115.19%说明可以通过叶片特征的调整使辣椒适应干旱胁迫其中Jalapeno Early Hot 最强Portugal Hot 居中Sweet Banana 适应能力最弱。     

干旱胁迫对白刺花种子萌发的影响

为了解白刺花抗旱性的生理效应,为其在喀斯特干旱地区的生态复原与重建提供理论和实践基础,本研究运用不相同的浓度PEG-6000(聚乙二醇)溶液(0%,5%,10%,15%,20%)模拟干旱胁迫,通过生理指标萌发率、电导率、POD、CAT、α-淀粉酶,研究干旱胁迫下对白刺花种子萌发的影响。结果显示:在不同干旱胁迫下,白刺花种子有类似的发芽势,但白刺花种子萌发率在中浓度干旱处理明显高于重浓度干旱和零干旱处理。重浓度(20%PEG)干旱胁迫处理使白刺花种子萌发起始时间比零干旱和中浓度干旱胁迫处理要迟;而抗氧化酶POD、CAT对于干旱胁迫的响应不同,与对照组相比,中度(10%PEG,15%PEG)处理使白刺花种子POD、CAT活性增强,而重浓度20%PEG干旱胁迫处理对于酶活性有明显的抑制作用。说明,在低浓度PEG胁迫下,白刺花种子具有较强的抵抗能力,提高浓度和长时间的处理能力有限。     

辣椒RWP-RK转录因子分析

RWP-RK基因家族是植物特有的转录因子家族。该家族在植物氮元素信号传导和配子体发育过程中起核心的调控作用。使用公开的中国重要栽培品种遵辣1号及其野生亲本墨西哥辣椒种"Chiltepin"的基因组序列,鉴定出辣椒基因组中含有RWP-RK结构域的基因,并进行系统进化、染色体定位、保守序列和可能功能等分析。遵辣一号基因组中与拟南芥氮代谢重要调控因子AtNLP7同源的是CaZunla01g000097、CaZunla01g004485和CaZunla00g000405。遵辣1号的2个基因Capana03g001990和Capana03g000787与拟南芥卵细胞形成相关转录因子AtRKD1、AtRKD2和AtRKD4同源。这些基因在栽培品种遵辣1号和其野生祖先品种基因组中保持了高度的保守性。此外,辣椒基因组中存在特有的RWP-RK转录因子亚家族。这一亚家族的蛋白质氨基酸序列中含有独特的保守序列。这些序列在拟南芥RWP-RK转录因子中并不存在。辣椒栽培品种遵辣1号中有在其野生祖先"Chiltepin"中不存在的RWP-RK转录因子基因。鉴定出了分别与拟南芥RWP-RK转录因子高度相似、存在重大差异以及辣椒野生种和栽培种之间存在差异的RWP-RK转录因子成员,为后期辣椒RWP-RK转录因子家族的克隆和功能研究提供了重要的信息。对这些基因进行功能研究,会极大的促进辣椒对氮元素匮乏环境响应以及辣椒配子体发育的分子机制研究。     

建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备

采用RT-PCR技术扩增出建兰花叶病毒贵州分离物(CyMV-GZ)的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因保守序列。测序结果表明:该RdRp基因序列长735 bp,编码245个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-RdRp,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃以0.3 mmol·L~(-1) IPTG诱导表达分子量约49 kDa重组蛋白。以该重组蛋白为抗原免疫小鼠,制备的抗体效价达1∶204 800。间接ELISA检测显示该多抗与CyMV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他6种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究RdRp的功能以及从分子水平上探讨该病毒的致病机制奠定了基础。     

观赏辣椒种子萌发特征研究

研究了6种美国观赏辣椒(Capsicum spp.)品种的种子萌发特征.结果表明:6种辣椒品种在发芽率、发芽势、发芽指数和平均发芽天数四项指标上均达到显著差异.其中ExplosiveEmber品种发芽率、发芽势、平均发芽天数和发芽指数分别是100%、75%、9.5、22.92,四项指标均优于其余品种.