非培养方法解析烟草根部内生细菌的群落结构

为了解烟草根部内生细菌多样性,采用改进的CTAB法提取烟草根部总DNA,利用细菌16 S rDNA基因通用引物对烟草根总DNA进行16 S rDNA扩增,构建烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库;挑取具有不同酶切谱型的克隆进行测序、比对并构建16 S rDNA基因系统发育树。构建的烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库中,155个克隆分属于36个不同的分类单元,Blast结果表明,大部分克隆与已知细菌的16 S rDNA序列相似性较高,分别属于变形菌门(Proteobacteria)的Alpha、Gamma、Beta亚群,放线菌门(Actinobacteria),拟杆菌门(Bacteroidetes),厚壁菌门(Fir-micutes)中的肠杆菌属(Enterobacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养食单胞菌属(Stenotrophomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、嗜甲基菌属(Methylobacillus)、食酸菌属(Acidovorax)、芽孢杆菌属(Bacillus)等16个属,其中13.5%的克隆序列与非可培养细菌(Uncultured bacteria)的相似性在93%～99%之间,假单胞菌属细菌是烟草根部内生细菌的优势种群。这些研究结果说明烟草根部存在较为丰富的内生细菌系统发育多样性,并且潜藏着未知的内生细菌资源。     

多种食用菌粗提液对烟草病原菌的抑制效果

研究了11种食用菌水提液对异丝腐霉、黑胫病菌和青枯病病菌生长的抑制作用。取红葱、香菇、木耳、块菌、黑牛肝、黄牛肝、美味牛肝菌、大红菇、奶浆菌、青头菌和虎掌菌等粉末分别与蒸馏水混合后搅拌破碎,采用0．45μm微孔滤膜过滤和真空抽滤泵进行抽滤,得到无菌提取液,对异丝腐霉、黑胫病菌和青枯病菌3种烟草病原菌的抑菌活性进行了测试。结果表明,11种食用菌提取液对3种供试菌株的菌丝生长都有一定的抑制活性。对真菌的抑制率与提取液浓度存在一定的线性相关,其中红葱10％提取液对2种真菌菌株抑制率最高,达到100％。大红菇提取液对烟草青枯病菌表现出农用链霉素相当的抑菌效果;奶浆菌提取液对异丝腐霉的毒力最强,红葱和黑牛肝提取液次之,大红菇提取液对异丝腐霉的毒力最弱;黑牛肝提取液对黑胫病菌的毒力最强,块菌和红葱提取液次之,而1．7％美味牛肝菌提取液对黑胫病菌有促进菌丝生长作用;奶浆菌提取液对黑胫病菌的毒力最弱。可见11种供试食用菌中确实存在抗植物病原菌物质,为生物抑制剂的开发提供了依据。