优质强优势晚粳恢复系申繁24的创制与利用

申繁24是上海市农业科学院以育种中间材料ZR213为母本、CR-3为父本,通过杂交、自交系统选择,结合香味基因分子标记辅助及稻瘟病鉴定选育而成的优质杂交晚粳恢复系。该恢复系抗稻瘟病、有香味、配合力强,配组育成的‘申优24’‘紫祥优24’‘申优415’分别于2015年、2016年和2017年通过上海市农作物品种审定委员会审定。     

分子标记在杂交粳稻育种上的应用现状及展望

分子标记的应用为杂交粳稻育种提供了新的技术手段,分子标记技术与传统育种技术相结合,可大大提高育种效率。本文综述了分子标记在杂交粳稻种质资源遗传多样性分析及核心种质构建、分子标记辅助选择育种、杂种优势预测以及DNA指纹图谱构建等方面的研究和应用现状,探讨了分子标记在杂交粳稻育种上应用存在的主要问题,并对其应用前景进行了展望。     

基于功能性分子标记鉴定香味杂交粳稻亲本

香稻是由于水稻种水稻甜菜碱醛脱氢酶(BADH2)基因的功能缺失突变引起的。根据香味等位基因badh2的功能性突变位点设计的功能性分子标记,为快速鉴定具有香味的水稻种质资源提供了可能。本研究利用香味等位基因badh2-E2和badh2-E7的功能性分子标记InDel-E2和InDel-E7鉴定了33个杂交粳稻不育系和35个杂交粳稻恢复系材料的基因型,获得了12个含有badh2-E2等位基因不育系和4个含有badh2-E7等位基因恢复系材料。在此基础上,分别选择了3个不育系和3个恢复系,配制了5个全香型的杂交粳稻,为香味杂交粳稻的推广应用提供了理论依据。     

猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其皮肤坏死素(DNT)粗提液的小鼠皮肤毒性试验

为更好地进行波氏菌病的防治,利用分离培养、生化实验、PCR鉴定和同源性分析对采自四川某规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状的猪鼻腔拭子进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定,参考经典的皮肤坏死素(DNT)粗提技术,将分离株DNT粗提原液及10和100倍稀释物分别注射于4~5、15~20和40~45d3组不同日龄的SPF鼠,进行毒力检测。结果分离到一株支气管败血波氏杆菌,其DNT毒力较强,0.2mL粗提原液可造成4~5d乳鼠皮下组织发生严重急性出血性炎症而死亡;15~20d乳鼠皮下出血,毛囊损伤,表皮层细胞结构模糊、紊乱,耐过乳鼠损伤处皮肤毛发生长受损;40~45d小鼠脱毛等轻微症状。本试验分离菌株皮肤毒性较强,DNT对不同日龄鼠的皮肤致病力有差异,可引起表皮层、真皮层和皮下组织同时损伤。     

~(60)Co γ射线辐照对水稻种子活力和秧苗质量的影响

为了分析辐照对水稻种子活力和秧苗质量的影响,分别利用350Gy以及5种不同剂量(250、300、350、400和600Gy)的60Coγ射线辐照了3种水稻恢复系和粳稻保持系秀水134的干种子。结果发现,水稻的辐照敏感性与水稻的籼性成分呈负相关,4种不同类型水稻品种(品系)的辐照敏感性排序为:粳稻保持系秀水134粳稻恢复系繁24籼粳交偏粳型恢复系繁31籼粳交偏籼型恢复系繁32;250Gy以上的辐照剂量对秀水134起抑制作用,随着辐照剂量的提高,秀水134种子活力和秧苗质量逐渐变弱,具体表现为发芽率、成苗率和苗高降低,假茎宽变弱,地上和地下干重减少;苗高对γ射线辐照最为敏感;秀水134的适宜辐照剂量为250~350Gy。所得结果为水稻突变体的筛选提供了理论依据。     

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测PRRSV方法的建立

根据编码PRRSV M蛋白的基因序列设计用于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR扩增的引物,通过温度梯度法优化反应体系;以不同科属常见猪致病性RNA病毒疫苗验证该检测方法的特异性,参考国内PRRSV分子流行病学特征,选择基因型代表性的2株疫苗株验证该检测方法的稳定性;以10倍梯度稀释的质粒为标准品扩增并构建标准曲线,探究该检测方法的灵敏度,随机挑取10份保存的PRRSV阳性病料和10份阴性病料同时使用农业部推荐的PRRSV RT-PCR检疫标准方法和建立的方法进行检测,以确定2种方法检测的符合率。结果显示,使用建立的方法可以在54.4℃80min内完成对PRRSV的检测,该检测方法具有特异性和稳定性;检测灵敏度为6.8×10拷贝/μL;以Ct值为横坐标,扩增序列拷贝浓度的对数值为纵坐标,得到标准曲线,方程为y=-3.411 x+39.002,R2=0.999;对随机挑取的10份PRRSV阳性病料和10份阴性病料进行检测,结果2种方法检测结果的符合率100%。结果表明,成功建立了PRRSV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR快速检测方法,为临床提供了一种很好的检测手段。     

8个稻瘟病抗性基因在三系杂交粳稻亲本中的分布

利用功能性分子标记检测了36份恢复系和42份不育系中Pi2、Pi5、Pi9、Pi54、Pia、Pib、Pit和Pita等8个稻瘟病抗性基因的分布。结果发现:这8个抗性基因在检测的品系中有不同频率的分布。在这78个品系中,不育系申11A是携带抗性基因最多的品系,检测到了6个稻瘟病抗性基因;而8527A、徐1A和016A等3个品系中未检测到抗性基因的存在。根据品系间遗传距离进行聚类分析,可将这78个品系分为5组。