基于基因组重测序数据高效筛选梨SSR标记多态性引物

【目的】基于重测序数据开发一种快速筛选样品间SSR标记多态性的方法。【方法】通过基因组重测序技术对2个砂梨品种'早生新水’和'秋水’、1个西洋梨栽培品种'早红考密斯’以及3个梨属野生种豆梨、川梨和杜梨进行重测序,对已报道的446对梨SSR引物和新开发16对引物进行多态性测试,使用Magicblast匹配测序产生的Reads到上述SSR位点序列,获得SSR两侧保守序列之间的长度,筛选出多态性的引物。使用荧光PCR对部分筛选出的多态性引物进行验证。【结果】单个SSR位点在不同样品间获得匹配的平均Reads数能够超过16条,每个样品均获得了220个以上位点的信息,380对引物在不同样品间能够获得多态性的片段。精确分析了梨LG3早熟候选区域29个SSR位点在'早生新水’和'秋水’中的扩增情况,共鉴定出9个多态性表现好的位点。荧光PCR验证结果显示,通过预备筛选的引物表现出良好的多态性。【结论】本研究的方法一次能够筛选多对SSR引物,在常规PCR前可以预先获得不同引物的多态性信息,从而提高引物筛选效率。本方法不仅能应用于梨重测序数据快速筛选SSR引物,对其他动植物上的类似研究同样适用。     

不同留果量对翠冠梨果实外观及内在品质的影响

翠冠梨早熟,肉质细嫩而脆,糖酸适口,内在品质优秀,但近年来果农一味地追求产量,果实品质有变劣趋势。为此,确定合适的留果量,既确保产量,又保证品质,成为生产上亟待解决的问题。本试验初探了套袋与不套袋及不同留果量对果实外观及内在品     

一种利用流式细胞术鉴定梨倍性的方法

流式细胞术鉴定植物染色体倍性的方法广泛应用于果树多倍体育种中,然而相关流式细胞术鉴定梨染色体倍性的方法还没有系统的研究。以梨树叶片为试材系统优化了各个流式细胞术关键实验节点,结果表明：实验材料选取当年春季新梢第3~5 片梨树嫩叶,尤其是大棚新梢嫩叶最好;叶片前处理时用蒸馏水、去离子水依次洗净叶片表面后,再用去离子水浸泡10 min;使用WPB解离液对梨叶片细胞核进行提取后,用500 目滤膜过滤2 次,离心1 次后用流式细胞仪进行检测可得到理想的实验结果。该方法步骤简单、结果可靠,是一种快速、高效的梨染色体倍性鉴定的方法,可广泛用于梨树多倍体鉴定。     

2008～2010年大棚与露地梨花粉生活力的比较

以砂梨品种'早生新水'、'翠冠'、'黄花'、'圆黄'和'沪1号'为试材,对2008～2010年大棚与露地梨花粉量、花粉萌发率及花粉管长度进行了研究.结果表明:3年中,2008年和2010年大棚比露地梨花粉量少,2009年则稍多;大棚比露地梨花粉萌发率低,花粉管短.大棚栽培下梨花粉量2009年>2008年>2010年(早生新水除外),梨花粉萌发率2009年比2008年稍高(黄花除外),2010年最低,甚至大棚翠冠不萌发,梨花粉管长度2009年最长.露地梨花粉量和花粉萌发率2008年最高,梨花粉管长度2009年较长.3年中大棚早生新水花粉量相对最少,花粉萌发率最低;露地黄花和圆黄花粉萌发率高,其中2008年露地黄花花粉萌发率最高,为81.01%,且两者不但花粉萌发率高,花粉量也多,花粉管较长.温度在花粉活力及座果率中起关键作用.生产上应选择亲和力好、花粉量大和花粉生活力强的花粉作授粉用.     

高温对大棚‘早生新水’梨花蕾期不同阶段花粉活力的影响

以大棚‘早生新水’露白期和白蕾期的花枝为试材,在25、35、40℃下分别处理不同时间来模拟高温对花粉量和花粉活力的影响。结果表明:露白期,25℃时花粉量没有明显变化,花粉萌发率增加53%以上;35℃高温下花粉量增加多达46%,每花药为5 000粒,花粉萌发率也较高;40℃高温下花粉量、花粉萌发率处理2h之后就显著下降。白蕾期比露白期的花粉量多,25℃时花粉量没有明显变化,而花粉萌发率处理6h后升高;35℃高温下花粉量明显减少,每花药为2 000粒,花粉萌发率在处理6h后急剧下降;40℃高温下花粉量和花粉萌发率均显著下降。不同温度处理后,将花枝在25℃进行修复试验(处理4h)。不同处理修复前和修复后的花粉萌发率变化不明显,因此高温对不同时期花粉活力的影响均不可逆转。与花粉量、花粉萌发率相比,高温对花粉管生长影响小。因此,在设施栽培过程中应严格管控花期的温度,尽量避免35℃以上高温长时间出现。     

上海'翠冠'梨园土壤和叶片养分状况调查分析

为了摸清上海'翠冠'梨园土壤养分状况,为合理施肥提供理论依据,对上海地区从北到南5个有代表性的'翠冠'梨园土壤养分状况及叶片矿质营养状况进行了调查,结合相关土壤、叶片养分适宜值,分析了'翠冠'梨园土壤、叶片养分存在的问题。结果表明:上海梨园土壤的有机质含量都在适宜标准上限左右,枫泾、仓桥的土壤有机质含量丰富,近3%。梨园土壤碱解氮、有效磷和速效钾含量在适宜标准内。徐泾、仓桥梨园的土壤呈中性,枫泾的偏酸性,pH均值分别为7.16、7.05和6.72,庄行的偏碱性,庙镇的呈碱性,pH均值分别为7_46和8.04,显著高于标准上限值7.0。土壤呈碱性,其碱解氮和速效钾含量较低,利用率低,当土壤pH回落,土壤碱解氮和速效钾含量增加,利用率高。庙镇和枫泾'翠冠'梨叶片N含量波动大,N肥施用不合理,徐泾则叶片N含量施用均衡,仓桥、庄行施N肥较多。叶片P含量整个生长期都有超标的发生,有的高出标准上限值约50%。叶片K含量多为7 g/kg上下,明显低于标准的下限值13 g/kg。综上所述,上海'翠冠'梨园土壤以中性或偏酸性为佳,尽管土壤有机质和主要营养物质含量适宜;但是梨树叶片中N含量不稳,P含量过多,而K含量严重缺乏;因此生产上应合理施用N肥,控制P肥,多增施K肥。     

上海地区15个猕猴桃品种引种适应性比较

通过对引种上海的包括2个种的15个猕猴桃品种进行了连续3年的物候期、适应性及果实品质评价,结果表明,最早成熟的‘金早’与最晚成熟的‘布鲁诺’成熟期差异达到71d;适应性评价,湖北、江西、江苏、安徽育成的一些品种成活率较高,均在75%以上;‘金魁’的成活率最高,达到100%;‘81-5’的抗褐斑病能力最强。果实品质的评价,其中‘81-5’果形最大,达到单果重160g;中华猕猴桃与美味猕猴桃相比,中华猕猴桃属于小果形(≤90g)品种数量较多。‘金阳’可溶性固形物含量最高,为19.50%;‘金魁’可滴定酸含量最高,为1.71%;‘红阳’可滴定酸最低,为0.58%;‘金阳’、‘红阳’、‘金农’和‘徐香’4个品种风味最佳;供试品种之间维生素C含量差异极大,维生素C含量最高的品种为‘布鲁诺’,为387.32mg/100g,含量最低为‘桂海4号’,为57mg/100g;‘徐香’香气最为浓郁。上海地区筛选出优良的猕猴桃品种有:金魁、徐香、米良1号;中华猕猴桃品种有:金阳、81-5、武植3号、金农。     

花蕾期高温对大棚与露地‘早生新水’梨花粉活力的影响

以大棚、露地‘早生新水’梨露白期花枝为材料,分别在25℃、35℃处理2 h、4 h和6 h,以及40℃处理1 h、2 h和3 h,模拟高温对梨花粉活力的影响。结果表明:大棚‘早生新水’梨露白期花蕾耐高温低于35℃,尽管花粉量较多,但花粉萌发率低,花粉有效数量低;露地‘早生新水’梨露白期花蕾也不耐35℃高温。35℃高温持续时间越长,花粉萌发率越低,40℃高温显著降低花粉萌发率。35℃高温处理后,露地‘早生新水’梨花粉活力较大棚梨的修复能力强,但不耐受40℃长时间高温。高温对花粉管长度影响小。可见,温度对花粉萌发率影响大,对花粉活力起关键作用,大棚栽培应避免35℃以上的高温长时间出现。     

套袋对翠冠果实外果皮褐斑形成结构及生理影响

套袋技术是提高梨果实外观品质的有效手段,为了探明梨果实发育期到成熟期套袋对锈斑发生的抑制机理,以半锈砂梨翠冠为试材,套袋果实为处理,不套袋果实为对照,观测果实发育期到成熟期锈斑的发生进程、测定不同时期果实外果皮果锈指数、木质素含量及相关合成代谢酶PAL酶、4CL酶、C4H酶、CAD酶、POD酶的活性。结果表明:套袋后梨果实外果皮锈斑发生进程明显减缓且程度轻,套袋果实锈斑发生在盛花后50 d,比不套袋(对照)晚20 d;果实迅速膨大期(盛花后70 d),套袋果实与不套袋(对照)果锈指数差异最大,套袋果锈指数减少41.67%;不套袋的翠冠褐斑严重,外果皮中木质素单体含量以及木质素合成代谢关键酶(PAL酶、4CL酶、CAD酶、C4H酶)活性普遍高于套袋翠冠果实外果皮。     

梨树专用肥对翠冠梨树体营养水平及土壤微生物群落的影响

为探明梨树专用肥对梨树营养水平和土壤环境的影响,研究了施用梨有机无机专用平衡肥(SBF)、常规化肥(CF)对翠冠梨树营养水平、产量、品质,土壤养分及微生物环境的影响.结果表明:与化肥(CF)对照相比,SBF处理的翠冠梨果实单果重和可溶性固形物的含量显著提高,增幅分别为7.8％和9.65％;SBF处理后翠冠梨叶片中的N、Zn、Mn、Fe等元素的含量显著升高,但B元素含量显著低于CF;SBF处理后的土壤pH值显著下降,而速效钾含量和有机质含量显著升高,平均有机质含量达3.05％,比CF土壤有机质含量显著增高8.54％.与CF相比,SBF处理土壤中Gaiella菌的相对丰度与土壤有机质、有效氮、有效磷、速效钾呈显著负相关,与电导率EC值呈正相关;纤维弧菌属(Cellvibrio)的相对丰度则与Gaiella菌的表现相反.研究表明,梨树专用平衡肥有助于提高果实品质,减轻果园土壤盐碱化,提高土壤有机质含量并改善土壤微生物环境.