苋菜amaARF6基因克隆及其外源激素处理下在幼苗中响应分析

以‘大红’苋菜(Amaranthus tricolor L.‘Dahong’)为材料,根据实验室构建的苋菜转录组数据库(SRA:SSR924089~SSR924092),采用RT-PCR结合RACE技术克隆获得1条生长素响应因子ARF6基因c DNA全长序列,命名为amaARF6(登录号为MG581459)。苋菜amaARF6基因c DNA全长3 758 bp,含一个2 697 bp开放阅读框,编码898个氨基酸。生物信息学分析表明,amaARF6包括生长素响应因子结构域和生长素功能位点,有ARF基因家族特有序列特征;系统进化树分析发现,amaARF6蛋白与同为石竹目甜菜Bv ARF6蛋白进化距离最近,相似度高达100%。荧光定量PCR分析表明,苋菜幼苗在不同浓度2,4-D、IAA、IBA等生长素及不同浓度GA3和PP333处理下,amaARF6基因均受调控,且在2,4-D、IAA、IBA等生长素处理后表达上调,经GA3和PP333处理后表达下调。研究还发现,苋菜中甜菜红素累积受GA3和2,4-D抑制,PP333促进甜菜红素合成,amaARF6基因表达量在GA3和PP333处理下呈相反变化趋势。研究结果表明,amaARF6基因可能具备ARF家族正调控因子表达特征和功能,可能参与调控苋菜幼苗生长和甜菜红素合成。研究结果为揭示amaARF6基因在苋菜幼苗生长中作用奠定基础,为苋菜育种提供线索。     

浅谈多设备、软件配合使用在森林经营规划中的应用

介绍了方正智绘绘图软件与GPS工具和地图软件（MapSource）的配合使用方法及步骤。     

利用Excel2000绘制林业专业用图的方法

介绍利用Excel2000绘制林业专业用图的方法、步骤和图面的修饰,并说明该绘图方法的优点和适用性。其中着重介绍了各种线型图形的绘制方法和具体步骤。     

农户耕地保护意愿及影响因素研究——以甘肃省会宁县翟家所乡为例

合理利用和保护耕地是我国经济社会和谐发展的重要基础。农户是耕地利用的组织者和耕地保护的执行者,他们的保护意愿和行为选择是影响耕地保护的重要因素。以甘肃省会宁县翟家所乡为例,从农户角度出发,通过相关性分析,运用Logistic回归模型分析法对影响该乡农户耕地保护意愿的因素进行了分析与研究,最后结合回归系数分析得出,农户成员的年龄、文化水平、非农就业技能,以及耕地的社会效益和耕地的破碎度5个因素对农户的耕地保护意愿呈现不同程度的正影响,家庭人口数、农户对耕地产权的认知和耕地附近的道路状况这3个因素对农户的耕地保护意愿呈现不同程度的负影响。基于此提出如下建议:开展有关耕地利用和保护的宣传活动,增强农户保护耕地的主动性和积极性;大力发展农村服务业,为农户养老提供保障,也为农户参与耕地保护提供强大的经济支撑;做好区域内的土地利用规划,改善农业基础设施,提高耕作的机械化水平和耕地利用集约度,减轻区位因素对农户耕地保护意愿的制约。     

苋菜AtGAI基因密码子偏好性与进化分析

为明确苋菜AtGAI基因密码子的使用特性,采用CodonW、SPSS软件及EMBOSS在线程序分析苋菜AtGAI基因密码子的偏好性,通过中性绘图、ENc绘图和偏倚分析GAI基因密码子偏好性形成的可能原因。结果表明:1)苋菜AtGAI基因的有效密码子数(ENc)、密码子适应指数(CAI)和GC含量分别为50.75、0.195和41.91%,表明其密码子偏好性较弱,偏好使用A/T结尾的密码子;2)CDS序列及RSCU聚类分析表明,苋菜AtGAI基因与双子叶植物中石竹目含甜菜色素的植物偏好性最相近;3)密码子碱基成分和相关性分析发现,GAI基因的密码子偏好性主要受碱基突变的影响;4)密码子使用频率比较分析发现,酵母真核表达系统更适合苋菜AtGAI异源表达,模式植物拟南芥、烟草、番茄和甜菜均可做为苋菜AtGAI基因的遗传转化受体,其中甜菜是其最理想的遗传转化受体。突变压力是GAI基因密码子偏好性形成的主要因素,苋菜AtGAI基因外源表达和遗传转化时需要根据宿主基因偏好性进行密码子优化和改造。     

昼夜温差处理下铁皮石斛原球茎松柏苷和紫丁香苷含量的测定

研究不同昼夜温差对铁皮石斛原球茎松柏苷、紫丁香苷含量的影响,为开发铁皮石斛原球茎作为药材提供研究基础。采用光照培养箱设置不同温差处理,采用超高效液相色谱法测定松柏苷、紫丁香苷含量变化。建立同时测定松柏苷和紫丁香苷的超高效液相色谱法,以ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）为分析柱;流动相：1%乙酸水溶液（A）和甲醇（C）。正交试验研究提取方法,结果表明用纯水提取,料液比1∶40,提取1 h（每0.5 h震荡一次）,2种物质提取率最高。采用此方法测定4个昼夜温差处理的铁皮石斛原球茎样品,结果表明,对照0 ℃温差松柏苷、紫丁香苷整体变化趋于平缓,8 ℃温差处理下,松柏苷和紫丁香苷在10 d的处理周期下都表现出含量增加,且明显优于其他处理。4 ℃温差处理两物质含量在第15天达到最高,12 ℃温差处理两物质含量前期高于对照处理,处理后期低于对照处理,且低于4 ℃、8 ℃温差处理。昼夜温差影响铁皮石斛原球茎松柏苷、紫丁香苷含量,一定范围内的温差呈现促进作用,温差过大则出现抑制作用。     

外源物质对苋菜种子萌发及幼苗生长的影响

试验通过使用不同浓度的ABA、GA3、壳聚糖、硫酸铜和Fe-EDTA 5种外源物质对苋菜种子进行培养,研究了外源物质对苋菜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:ABA以及高浓度的硫酸铜溶液对苋菜种子的萌发和生长有抑制作用,并且表现为浓度越高抑制越强的趋势。适宜浓度的GA3、壳聚糖和Fe-EDTA对苋菜种子萌发及幼苗生长有促进作用,其中GA3对苋菜幼苗的生长促进作用最强,而壳聚糖可以明显促进苋菜种子发芽。     

苋菜中甜菜红素代谢相关基因AmMYB2的表达与功能分析

为了研究AmMYB2基因在苋菜(Amaranthus tricolor)甜菜红素合成中的作用,对红色苋菜品种‘大红’AmMYB2(登录号为KY814751.1)进行生物信息、基因表达及功能分析。结果表明:AmMYB2的开放阅读框(ORF)全长为678 bp,编码蛋白分子质量为25.96 kD,该蛋白具有R2R3型MYB结构域,属于R2R3型MYB转录因子。核酸序列分析结果显示,AmMYB2与甜菜红素合成相关的甜菜BvMYB1和苋菜AmMYB1的相似度分别达到62.11%和49.93%。亚细胞观察显示,AmMYB2蛋白定位于细胞核。实时荧光定量(qPCR)分析发现,AmMYB2在红色苋菜品种的表达量高于绿色苋菜品种;在‘大红’苋菜中,不同组织以及叶片不同部位中AmMYB2的表达量与甜菜红素含量成正比。构建AmMYB2过表达载体,将其转入烟草和拟南芥中,发现该基因能够在这两种植物中高水平表达,但不会引起颜色变化,揭示AmMYB2可能是苋菜中甜菜红素合成的正调控因子,可能不参与花青素的合成。