丽格海棠再生体系的建立

[目的]研究丽格海棠组织培养再生植株的最佳培养基配方条件,为其快速繁殖提供技术参考。[方法]以丽格海棠幼嫩叶片为外植体,对其进行诱导、增殖和生根培养,确定其再生体系。[结果]以1 cm2左右带叶脉的幼嫩叶片为外植体,诱导愈伤和丛生芽的培养基为MS＋6-BA 0.50 mg/L＋NAA 0.50 mg/L＋4%芦荟原汁,诱导率分别为94.44%和66.67%;生根培养基为1/2MS＋NAA 0.10 mg/L,生根率为100%。[结论]该研究建立了丽格海棠离体再生体系。     

W6基因的过表达提高转基因烟草的耐盐性

W6基因是由普通小麦地方品种小白麦cDNA文库中克隆获得的ERF类转录因子, 属于ERF IV家族。将W6基因构建在由组成型CaMV35S强启动子控制的双子叶转化载体pBI121上, 通过农杆菌介导法将其转入烟草新华1号。利用RT-PCR技术分析W6基因的过量表达对下游抗性基因表达水平的影响, 并测定高盐胁迫下转基因烟草的SOD酶活性和叶绿素含量。结果显示, 所检测的转基因烟草阳性株中W6基因均有不同程度的表达, 其耐盐性明显提高。W6基因的表达诱导并增强了含有GCC box的PR(pathogenesis-related)基因和含有DRE/CRT元件的COR/RD基因的表达。在高盐胁迫下, 转基因烟草的SOD酶活性和叶绿素含量明显高于对照。W6基因既能诱导抗病相关的PR基因表达又能诱导与提高非生物胁迫能力的COR/RD基因表达, 可能与生物胁迫和非生物胁迫相关, 证实转录因子W6参与了耐盐胁迫相关基因的调节, W6基因的过表达提高了转基因烟草的耐盐性。     

W6基因的过表达提高转基因烟草的耐盐性

W6基因是由普通小麦地方品种小白麦cDNA文库中克隆获得的ERF类转录因子, 属于ERF IV家族。将W6基因构建在由组成型CaMV35S强启动子控制的双子叶转化载体pBI121上, 通过农杆菌介导法将其转入烟草新华1号。利用RT-PCR技术分析W6基因的过量表达对下游抗性基因表达水平的影响, 并测定高盐胁迫下转基因烟草的SOD酶活性和叶绿素含量。结果显示, 所检测的转基因烟草阳性株中W6基因均有不同程度的表达, 其耐盐性明显提高。W6基因的表达诱导并增强了含有GCC box的PR(pathogenesis-related)基因和含有DRE/CRT元件的COR/RD基因的表达。在高盐胁迫下, 转基因烟草的SOD酶活性和叶绿素含量明显高于对照。W6基因既能诱导抗病相关的PR基因表达又能诱导与提高非生物胁迫能力的COR/RD基因表达, 可能与生物胁迫和非生物胁迫相关, 证实转录因子W6参与了耐盐胁迫相关基因的调节, W6基因的过表达提高了转基因烟草的耐盐性。     

一个新的小麦非生物胁迫诱导基因的克隆及表达特性

 【目的】水分胁迫和低温是制约植物生长发育的重要限制因子，研究植物感知、传递胁迫信号，并对重要的基因进行克隆对改良作物的抗性有重要意义。本试验的目的是克隆与水分胁迫相关的基因，通过基因的功能进一步了解植物的抗旱机制，并为抗逆育种提供候选基因。【方法】试验应用噬菌体原位杂交技术从小麦旱胁迫cDNA文库中克隆了一个水分胁迫诱导基因片段W89。用5′-RACE和RT-PCR方法，获得了W89基因的全长序列。【结果】W89全长cDNA为2 392 bp，其中，编码区长1 896 bp，编码631个氨基酸。Southern杂交表明，W89是一个单拷贝基因。RT-PCR结果表明，W89受干旱、低温和ABA的诱导。氨基酸序列分析发现W89有一个DUF248保守区（pfam03141），包含一个具有SAM （Sterile Alpha Motif）结合基序的甲基转移酶区。同源性分析发现W89与一个水稻干旱诱导蛋白（BAD67956）的同源性为66%，推测W89可能是一个新的小麦干旱诱导的基因。【结论】根据甲基转移酶和SAM结合基序的功能，推测W89的SAM结合基序可能与其它蛋白或转录因子相互作用调控植物胁迫基因的表达，并且可能在干旱胁迫的早期调控信号的转导。     

垂吊矮牵牛的组织培养和快速繁殖

以垂吊矮牵牛(Petunia hybrida) 叶片为外植体,研究了在培养基中添加不同激素成分及不同浓度对丛生芽形成和生根的影响.结果表明,直接诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.05～0.1 mg/L.外植体接种40 d左右便可形成完整的再生植株.     

植物激素与芦荟原汁对丽格海棠组培快繁的影响

[目的]研究植物激素和芦荟原汁对丽格海棠丛生芽诱导的影响。[方法]以丽格海棠叶片为外植体,研究了不同浓度的6-BA和NAA和芦荟原汁对丽格海棠丛生芽诱导的影响。[结果]不同浓度的NAA对丽格海棠丛生芽的诱导有明显影响,NAA浓度为0.5 mg/L的诱导效果最好(83.3%),随着NAA浓度的下降,诱导率也随之下降;6-BA不同浓度对丛生芽诱导有一定影响,但影响程度不大,以浓度为0.5 mg/L的诱导效果较好(66.7%);在一定的植物激素浓度下,添加适宜浓度的芦荟原汁对丛生芽的诱导有明显的促进作用,以MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%芦荟原汁和MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+1%芦荟原汁的诱导丛生芽的效果较好,诱导率均为100%。[结论]6-BA和NAA和芦荟原汁以适宜的浓度搭配可缩短丽格海棠的出芽时间,提高丛生芽的诱导率。     

过氧乙酸结合钙处理对青种枇杷的保鲜效应

微生物引起的腐烂是枇杷贮藏过程中面对的主要问题之一,而过氧乙酸(PAA)被认为是一种安全、高效、廉价的“绿色”防腐剂.研究了不同浓度PAA结合0.8％ CaCl2处理青种枇杷在非冷害低温(7±1)℃和0.02 mm PE包装贮藏条件下部分品质与理化指标的变化情况.结果表明:与2个对照(0.8％ CaCl2、清水处理)、0.2％ PAA和0.8％ PAA结合钙处理相比,0.4％ PAA+ 0.8％ CaCl2复合处理能显著抑制青种枇杷果实腐烂指数、失重率、硬度和细胞膜渗透率的上升,有效阻延可滴定酸、维生素C、可溶性固形物含量及出汁率的降低,并使果实呼吸强度雏持在较低水平,贮藏25 d时果实外观与风味品质良好,说明0.4％ PAA+ 0.8％ CaCl2复合处理是一种有效、安全、经济的枇杷保鲜实用技术.     

利用SSR 标记对籼稻品种（系）聚类分析的比较研究

以24个籼稻品种(系)为材料,利用SSR标记技术分别采用NTSYS软件、DPS软件和MAGE软件在4种情况下进行聚类分析。结果表明,无论是利用NTSYS软件通过相关系数,还是利用DPS软件和MAGE软件通过遗传距离进行聚类分析,都基本能将恢复系、三系不育系、短光敏不育系3个类群分开,但由于所选标记及其检测到的等位基因数量不同,聚类的结果也随之不同,特别是水稻恢复系和不育系两大类群下的各亚类的分类结果不同。因此,认为只有首先确定合理的引物数量及其检测到的等位基因数,才能较为准确地进行聚类分析,进而有效地划分杂种优势群。