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沙冬青脱水素基因的克隆及表达载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究沙冬青脱水素的功能,根据沙冬青cDNA文库中脱水素基因序列设计引物,采用PCR技术进行了脱水素基因的扩增,扩增产物与载体pGM-T载体连接,转化大肠杆菌Top10,筛选阳性克隆,测序结果表明,已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与已知沙冬青cDNA文库中脱水素基因大小一致,为760 bp,说明此序列无内含子.将成功克隆的阳性重组子提取质粒与pCAMBIA3301质粒同样进行酶切反应,再以T4DNA连接酶连接,成功构建了脱水素基因的植物表达载体,为下一步的抗逆性研究打下了基础. 相似文献
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抗旱植物沙冬青对植物激素反应特性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以沙冬青为材料,选用茎尖、茎段、子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,主要研究植物激素6-BA、KT在芽分化中的作用,结果表明 茎尖和茎段在含1mg/L和2mg/L 6-BA的培养基上,形成了玻璃化的丛芽而死亡,在含低浓度6-BA(0.5mg/L,0.1mg/L,0mg/L)的培养基上,能够产生一定比例、无玻璃化生长正常的芽,以6-BA含量为0.5 mg/L分化的芽率较高。在子叶和下胚轴的分化过程中,0.5 mg/L的6-BA,能够提高子叶不定芽的分化频率,作用较KT明显,相反0.5 mg/L KT提高了下胚轴不定芽的分化。 相似文献
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水分胁迫柠条锦鸡儿叶片均一化全长cDNA文库的构建及EST分析 总被引:1,自引:0,他引:1
柠条是包括内蒙古在内干旱荒漠草原上的优势建群植物,具有极强的耐旱(寒)力,为了研究其抗逆机理,挖掘和利用其抗旱基因,用Trizol法从经过干旱处理的柠条当年新生幼嫩枝叶中提取总RNA,分离纯化mRNA,采用SMART技术反转录合成双链cDNA,DSN技术进行均一化,构建了柠条全长cDNA文库。经检验,文库的滴度为1.5×106 cfu/mL,重组率为93.75%,90%以上插入片段的长度为1.0~2.0 kb。从文库中随机挑取3200个克隆进行5’测序,得到3020个有效EST,合成2429个unigenes,其中,singlets 2229条,占总有效序列的91.76%,经与数据库比对,发现了脱水素、抗旱相关转录因子等多个抗旱相关基因。 相似文献
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