复合诱变选育恶臭假单胞菌高产菌株的研究

以恶臭假单胞菌Pseudomonas putida野生株Ps-FLAG01为出发菌株,经超声波(US)-硫酸二乙酯(DES)复合诱变后,筛选出一高产菌株Ps-FLAG05,其总酶活力为0.325 3 u/mL,比出发菌株提高25.89%;对其发酵培养基配方进行了优化,最佳配方为:玉米浆1.0%,葡萄糖3.5%,氯化钠0.15%,诱导剂4.5%,与原配方相比,发酵水平提高了13.03%.     

固定化青霉素酰化酶制备7-ADCA的条件优化

详细地论述了在固定化青葛索酰化酶（IPA-750）的催化裂解下。由青霉素G扩环得到的头孢G酸（扩环酸）转化为7-ADCA．在0．05mol／L的硼酸缓冲液中，通过改变酶促反应过程中底物质量浓度、温度、pH值，并借助HPLC色谱仪的精确分析。在IPA-750用量为65KU／g（底物）的前提下筛选出最佳反应条件为温度28～30℃、pH值8．2、质量浓度60kg／L，头孢G酸转化率可达96％以上．同时可实现400批的重复转化反应，且反应过后不会造成严重环境污染．     

国产固定化GL-7-ACA酰化酶制备7-ACA的工艺优化

通过对国产固定化GL-7-ACA酰化酶和游离酶的表观米氏常数(Km)及最大反应速度(Vm)的测定.结果表明:固定化GL-7-ACA酰化酶的Km和Vm值分别为8.69 mm o l.L-1和76μm o l.g-1m i-n 1,均较游离酶高;在对酶促反应的关键参数底物质量浓度、转化温度、转化pH进行优化后,用固定化GL-7-ACA酰化酶在底物GL-7-ACA质量浓度30 g.L-1、转化温度25℃、转化pH 8.0的条件下转化GL-7-ACA制备7-ACA可连续操作150批以上,转化率和收率均达95%以上.     

固定化青霉素酰化酶制备7-ADCA的条件优化

详细地论述了在固定化青霉素酰化酶(IPA-750)的催化裂解下．由青霉素G扩环得到的头孢G酸(扩环酸)转化为7-ADCA．在0．05 mol／L的硼酸缓冲液中,通过改变酶促反应过程中底物质量浓度、温度、pH值,并借助HPLC色谱仪的精确分析,在IPA-750用量为65 KU／g(底物)的前提下筛选出最佳反应条件为温度28-30℃、pH值8．2、质量浓度60 kg／L,头孢G酸转化率可达96％以上．同时可实现400批的重复转化反应,且反应过后不会造成严重环境污染．     

恶臭假单胞菌诱变与底物类似物抗性筛选

提高海因酶产生菌株的活力,能为β-内酰胺类抗生素的重要中间体D-对羟基苯甘氨酸的生产带来应用价值.对产海因酶的恶臭假单胞菌MZ-4S-0315进行紫外、微波诱变处理,在加有适量底物类似物5-FU的选择培养基上进行筛选.结果表明:经测定的140株菌株,其海因酶活力大部分比原菌株产酶能力有所提高;其中在微波(800 w,2 450 Hz)40 s诱变条件下筛选到一株产酶活力比原菌株提高2.44倍的菌株ZF-109.该方法比以往化学试剂结合的诱变操作简单,危害性小,特别是筛选速度有了极大提高.     

复合诱变选育恶臭假单胞菌高产菌株的研究

以恶臭假单胞菌Pseudononas putida野生株Ps—FLAG01为出发菌株．经超声波（US）一硫酸二乙酯（DES）复合诱变后．筛选出一高产菌株Ps—FLAG05．其总酶活力为0．3253u／mL．比出发菌株提高25．89％；对其发酵培养基配方进行了优化．最佳配方为：玉米浆1．0％．葡萄糖3．5％．氯化钠0．15％．诱导剂4．5％．与原配方相比．发酵水平提高了13．03％．     

恶臭假单胞菌诱变与底物类似物抗性筛选

提高海因酶产生菌株的活力，能为β-内酰胺类抗生素的重要中间体D-对羟基苯甘氨酸的生产带来应用价值，对产海因酶的恶臭假单胞菌MZ-4S-0315进行紫外、微波诱变处理，在加有适量底物类似物5-FU的选择培养基上进行筛选．结果表明：经测定的140株菌株，其海因酶活力大部分比原菌株产酶能力有所提高；其中在微波（800w,2450Hz）40s诱变条件下筛选到一株产酶活力比原菌株提高2．44倍的菌株ZF-109．该方法比以往化学试剂结合的诱变操作简单，危害性小，特别是筛选速度有了极大提高．