石河子某猪场仔猪黄痢病原学调查及部分生物学特征的研究

<正>产肠毒素大肠杆菌主要致病力由黏附素性菌毛和肠毒素两类毒力因子构成,初生幼畜被产肠毒素大肠杆菌感染后常因剧烈水样腹泻和迅速脱水死亡[1]。2012年1—6月份,新疆石河子周边某些猪场2—7日龄仔猪陆续发生严重腹泻,先后死亡仔猪800余头,患病仔猪精神沉郁,不愿吃乳,腹泻严重(呈水样稀粪),病程3~5 d。病理剖检可见肠系膜充血严重,小肠黏膜菲薄,内容物呈黄色且含未消化的凝乳块。为查明病因,笔者采集发病最严重的某猪场病死     

牛支原体间接免疫酶标组织化学检测方法的建立

为建立检测牛支原体的间接免疫组织化学(简称免疫组化)方法,分别以鸡抗牛支原体(Mycoplasma bovis)IgY、羊抗鸡IgG-HRP为一抗和二抗,对牛支原体菌体涂片和牛支原体阳性肺脏组织切片进行免疫组化染色,并对染色条件进行优化,确定组织触片及组织切片的最佳免疫组化条件。在最佳条件下对病死犊牛病料切片进行免疫组化检测,并以细菌分离培养和PCR方法进行验证。结果显示,免疫组化法阳性标本与分离培养和PCR结果相符,而阴性对照和替代试验均为阴性。结果表明本试验建立的间接免疫组化方法可用于检测临床病例组织样本及培养物中的牛支原体,具有特异性和可靠性,为探究该病原在机体内的定位、动态分布规律及致病机理提供了手段。     

致犊牛肺炎牛支原体南疆株的分离鉴定及oppF基因序列分析

本研究旨在调查新疆喀什某规模化奶牛场的犊牛死亡原因,并确定病原体.无菌采集3份因肺炎死亡的犊牛肺脏病料样品.采用牛支原体专用液体培养基和1.0%牛支原体琼脂固体筛选培养基从3份病死犊牛肺脏病料中分离得到2株牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis),分别命名为M.bovis-NJ-1和M.bovis-NJ-2.通过菌落形态学观察、特异性PCR和oppF测序比对对分离株进行鉴定.结果显示,2个分离株在固体培养基上的菌落呈现典型的"煎蛋状",且Dienes染色特点符合牛支原体菌落着色特征,中心呈深蓝色;PCR能扩增出牛支原体特异的448 bp目的片段;2个分离株的oppF基因序列与牛支原体国际标准株PG45的同源性分别为96.7%和95.3%.结果表明,引起犊牛发病死亡的病原是牛支原体,本研究为犊牛支原体肺炎的快速诊断和防制提供依据.     

新疆不同来源单核细胞增生性李斯特氏菌分离株的部分生物学特性及相关性分析

为研究8株来自新疆发病绵羊和健康绵羊的单核细胞增生性李斯特氏菌(LM)分离株的部分生物学特性及相关性,本实验对8株LM分离株进行小鼠致病力检测、多重PCR谱系鉴定、血清型鉴定及InlA基因的PCR-RFLP分析。结果显示,健康绵羊与临床发病绵羊中分离的LM分离株对小鼠具有相同的致病性;除1株临床分离株为血清型4b和谱系Ⅰ外,其余7株均为血清型1/2a和谱系Ⅱ;5株健康绵羊分离株的毒力基因InlA的PCR-RFLP复合基因型均为E型,而3株临床发病绵羊中的分离株为C型或B型。两种不同来源LM在小鼠致病性血清型及谱系上具有一致性及相关性,但其毒力基因InlA存在多样性。初步揭示健康绵羊携带的LM可以经内源性感染而发生李氏杆菌病,表明内源性感染是造成绵羊李氏杆菌病流行的一种传染方式。     

扩展莫尼茨绦虫DAZ基因保守结构域所在片段的克隆及原核表达

为了克隆和表达编码扩展莫尼茨绦虫无精症缺失(DAZ)基因,试验根据GenBank中扩展莫尼茨绦虫DAZ基因cDNA序列(登录号为GH291478)设计1对特异性引物,以扩展莫尼茨绦虫组织总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZ基因,并克隆到pMD19-T载体中进行序列测定,构建重组质粒pET28a-DAZ,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,以异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达;利用非变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分析表达产物,通过螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果表明:重组DAZ基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白分子量约为14 ku。     

仔猪水肿病病原分离鉴定及药敏试验

从患病仔猪体内分离到3株细菌,通过培养特性、细菌形态、菌落形态、生化试验、血清学试验及动物试验等观察确定为埃希氏大肠杆菌.药敏试验证明对头孢氨苄、庆大霉素、诺氟沙星、痢特灵敏感,对青霉素G、链霉素耐药.     

绵羊肠球菌部分生物学特性的比较分析研究

肠球菌是人类和动物肠道正常菌群的一部分,以往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌,但近年来研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰氏阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌〔1〕,肠球菌亦可引起院外感染。所致的疾病包括泌尿道感染、肺部感染、术后感染、心内膜炎、胆囊炎、腹膜炎、败血症、脑炎等,已成为院内感染的第二位主要原因〔2,3〕。由于其固有耐药性,所致感染治疗困难,肠球菌成为当今国外医学界研究的热点。本次实验,对绵羊不同来源的肠球菌(致病菌与健康动物分离菌)进行部分生物学特性的研究,比较致病菌与正常菌群在…     

新疆绵羊致病株李斯特杆菌分离与鉴定

本研究采用生化反应，溶血试验，致病力试验，PCR方法对分离的新疆5株绵羊致病株李斯特杆菌90SB1，90SB2，90SB5，90SS1，125SL进行了种型的鉴别测定，并用RAPD技术对这5株李斯特杆菌及标准株李斯特杆菌进行分型。试验结果，五株绵羊致病株（野毒株），在生化反应，培养特性，溶血性，致病性及溶血素基因特异性等方面表现高度的一致性，属于同一种LM。RAPD实验表明此5株LM指纹图谱相同，属于同一个型。此5株致病性LM与标准LM对照株（从食品中分离到）指纹图谱差异显著，属于不同型。     

细菌内毒素的研究概况

内毒素（Endotoxin）是一种革兰阴性细菌细胞壁的组成成分，只有在细菌死亡或繁殖时，才释放到细胞外，发挥各种效应。内毒素化学本质为脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）。LPS是诱发炎症反应过程中主要的致病成分，它通过诱导体内单核巨噬细胞合成并释放多种炎症介质，参与机体的免疫炎症反应，严重时可导致脓毒血症或休克。另一方面，LPS对机体也可表现出显著的有益作用。     

新疆部分地区绵羊及青贮饲草中单核细胞增多性李氏杆菌的调查

单核细胞增多性李氏杆菌(L．monocytogenes，LM)于1926年由Murry等首先从患病的野兔和实验室中的豚鼠中分离，并明确描述与动物流行病有关，可引起多种家畜、野生动物及人的李氏杆菌病。在多种动物中，以绵羊易感性最高。而多数绵羊发病与饲喂青贮饲草有关，故又称“青贮病”。本病在70